致谢 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-17页 |
1 磺胺嘧啶简介 | 第11-16页 |
·SD 的理化特性及临床应用 | 第11-12页 |
·SD 的化学结构与理化特性 | 第11页 |
·SD 的药理作用与药动学特性 | 第11-12页 |
·SD 的临床应用 | 第12页 |
·SD 的毒性作用 | 第12页 |
·动物性食品中SD 及磺胺类药物残留检测研究进展 | 第12-16页 |
·高效液相色谱法 | 第12-13页 |
·气相色谱法 | 第13页 |
·联用技术 | 第13页 |
·毛细管电泳法 | 第13-14页 |
·免疫学检测方法 | 第14-16页 |
2 目的及意义 | 第16页 |
3 技术路线 | 第16-17页 |
第二章 磺胺嘧啶人工抗原的合成与鉴定 | 第17-22页 |
1 材料与方法 | 第17-19页 |
·材料与设备 | 第17页 |
·方法 | 第17-19页 |
·载体蛋白的选择 | 第17-18页 |
·载体蛋白与SD 的偶联 | 第18页 |
·紫外扫描鉴定 | 第18页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定 | 第18-19页 |
2 结果与分析 | 第19-20页 |
·全抗原的合成 | 第19页 |
·全抗原的鉴定 | 第19-20页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定 | 第19页 |
·紫外扫描鉴定 | 第19-20页 |
3 讨论 | 第20-22页 |
·关于载体蛋白的选择 | 第20页 |
·关于SD 人工抗原的制备方法 | 第20-21页 |
·关于SD 人工抗原的免疫剂量及免疫间隔 | 第21页 |
·关于SD 人工抗原的鉴定 | 第21-22页 |
第三章 磺胺嘧啶抗体的制备及其免疫学特性鉴定 | 第22-29页 |
1 材料与方法 | 第22-26页 |
·材料与设备 | 第22页 |
·方法 | 第22-26页 |
·细胞 | 第22页 |
·实验动物 | 第22页 |
·主要试剂配制 | 第22-23页 |
·动物免疫 | 第23-24页 |
·单克隆抗体的制备 | 第24-25页 |
·骨髓瘤细胞的培养 | 第24页 |
·饲养细胞的制备 | 第24页 |
·脾细胞的制备 | 第24页 |
·细胞融合 | 第24-25页 |
·杂交瘤细胞的筛选及克隆 | 第25页 |
·单克隆抗体的生产 | 第25页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第25-26页 |
·单克隆抗体特异性鉴定 | 第25页 |
·SD 单抗上清和腹水间接ELISA 效价 | 第25-26页 |
·单抗腹水IgG 的纯化 | 第26页 |
2 结果与分析 | 第26-28页 |
·免疫小鼠多抗的效价测定 | 第26-27页 |
·SD 单抗杂交瘤细胞株的建立及单抗腹水的纯化 | 第27页 |
·杂交瘤细胞的筛选及克隆 | 第27页 |
·单克隆抗体的生产 | 第27页 |
·单抗腹水IgG 的纯化 | 第27页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第27-28页 |
·SD 单抗上清和腹水间接ELISA 效价及工作浓度的测定 | 第27页 |
·单克隆抗体特异性鉴定 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-29页 |
·关于BALB/c 小鼠超免方法 | 第28页 |
·关于SD 多抗和SD 单抗的比较 | 第28页 |
·关于单抗的纯化 | 第28-29页 |
第四章 磺胺嘧啶残留检测ELISA 试剂盒的研制及性能测定 | 第29-37页 |
1 材料与方法 | 第29-32页 |
·材料与设备 | 第29页 |
·方法 | 第29-32页 |
·主要试剂的配制 | 第29-30页 |
·SD 标准品及磺胺类同系物标准品 | 第29-30页 |
·辣根过氧化物酶(HRP)标记SD | 第30页 |
·ELISA 使用试剂配制 | 第30页 |
·HRP-SD 工作浓度的筛选 | 第30页 |
·羊抗鼠IgG 包被浓度及SD mAb IgG 工作浓度的筛选 | 第30-31页 |
·SD ELISA 检测试剂盒的建立 | 第31页 |
·SD-kit 灵敏度测定及交叉性测定 | 第31页 |
·SD-kit 的添加回收率测定 | 第31-32页 |
·SD 的样品添加 | 第31页 |
·SD-kit 的添加样品回收率测定 | 第31-32页 |
·结果判定 | 第32页 |
2 结果与分析 | 第32-35页 |
·HRP-SD 工作浓度的筛选 | 第32页 |
·羊抗鼠IgG 包被浓度及SD mAb IgG 工作浓度的筛选 | 第32-33页 |
·SD ELISA 检测试剂盒的建立 | 第33页 |
·SD-kit 灵敏度测定及交叉性测定 | 第33-35页 |
·SD-kit 的添加回收率 | 第35页 |
3 讨论 | 第35-37页 |
·试剂盒的交叉反应性 | 第35-36页 |
·试剂盒对不同样品的添加回收率 | 第36页 |
·有待完成的工作 | 第36-37页 |
第五章 磺胺嘧啶残留快速检测试纸的研制及性能测定 | 第37-46页 |
1 材料与方法 | 第37-40页 |
·材料与设备 | 第37-38页 |
·方法 | 第38-40页 |
·标准品的配制 | 第38页 |
·单克隆抗体的标记 | 第38-39页 |
·胶体金的制备 | 第38页 |
·胶体金与待标记蛋白比例的确定 | 第38页 |
·SD mAb IgG 的标记 | 第38-39页 |
·SD 检测试纸的制备 | 第39页 |
·胶金垫的准备 | 第39页 |
·膜的准备 | 第39页 |
·样品垫和吸水垫的准备 | 第39页 |
·试纸的组装 | 第39页 |
·试纸的敏感性检测 | 第39页 |
·试纸条的特异性检测 | 第39-40页 |
·结果判定 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-43页 |
·试纸条的敏感性检测 | 第40-41页 |
·试纸条的特异性检测 | 第41-43页 |
3 讨论 | 第43-46页 |
·胶体金技术的优势 | 第43页 |
·试纸的结构及工作原理 | 第43-44页 |
·胶体金的质量 | 第44-45页 |
·试纸硝酸纤维素膜的选择 | 第45-46页 |
结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
ABSTRACT | 第52-53页 |