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磺胺嘧啶单克隆抗体的制备及其在免疫学检测中的应用

致谢第1-10页
摘要第10-11页
第一章 文献综述第11-17页
 1 磺胺嘧啶简介第11-16页
   ·SD 的理化特性及临床应用第11-12页
     ·SD 的化学结构与理化特性第11页
     ·SD 的药理作用与药动学特性第11-12页
     ·SD 的临床应用第12页
   ·SD 的毒性作用第12页
   ·动物性食品中SD 及磺胺类药物残留检测研究进展第12-16页
     ·高效液相色谱法第12-13页
     ·气相色谱法第13页
     ·联用技术第13页
     ·毛细管电泳法第13-14页
     ·免疫学检测方法第14-16页
 2 目的及意义第16页
 3 技术路线第16-17页
第二章 磺胺嘧啶人工抗原的合成与鉴定第17-22页
 1 材料与方法第17-19页
   ·材料与设备第17页
   ·方法第17-19页
     ·载体蛋白的选择第17-18页
     ·载体蛋白与SD 的偶联第18页
     ·紫外扫描鉴定第18页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定第18-19页
 2 结果与分析第19-20页
   ·全抗原的合成第19页
   ·全抗原的鉴定第19-20页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳鉴定第19页
     ·紫外扫描鉴定第19-20页
 3 讨论第20-22页
   ·关于载体蛋白的选择第20页
   ·关于SD 人工抗原的制备方法第20-21页
   ·关于SD 人工抗原的免疫剂量及免疫间隔第21页
   ·关于SD 人工抗原的鉴定第21-22页
第三章 磺胺嘧啶抗体的制备及其免疫学特性鉴定第22-29页
 1 材料与方法第22-26页
   ·材料与设备第22页
   ·方法第22-26页
     ·细胞第22页
     ·实验动物第22页
     ·主要试剂配制第22-23页
     ·动物免疫第23-24页
     ·单克隆抗体的制备第24-25页
       ·骨髓瘤细胞的培养第24页
       ·饲养细胞的制备第24页
       ·脾细胞的制备第24页
       ·细胞融合第24-25页
     ·杂交瘤细胞的筛选及克隆第25页
     ·单克隆抗体的生产第25页
     ·单克隆抗体的鉴定第25-26页
       ·单克隆抗体特异性鉴定第25页
       ·SD 单抗上清和腹水间接ELISA 效价第25-26页
     ·单抗腹水IgG 的纯化第26页
 2 结果与分析第26-28页
   ·免疫小鼠多抗的效价测定第26-27页
   ·SD 单抗杂交瘤细胞株的建立及单抗腹水的纯化第27页
     ·杂交瘤细胞的筛选及克隆第27页
     ·单克隆抗体的生产第27页
     ·单抗腹水IgG 的纯化第27页
   ·单克隆抗体的鉴定第27-28页
     ·SD 单抗上清和腹水间接ELISA 效价及工作浓度的测定第27页
     ·单克隆抗体特异性鉴定第27-28页
 3 讨论第28-29页
   ·关于BALB/c 小鼠超免方法第28页
   ·关于SD 多抗和SD 单抗的比较第28页
   ·关于单抗的纯化第28-29页
第四章 磺胺嘧啶残留检测ELISA 试剂盒的研制及性能测定第29-37页
 1 材料与方法第29-32页
   ·材料与设备第29页
   ·方法第29-32页
     ·主要试剂的配制第29-30页
       ·SD 标准品及磺胺类同系物标准品第29-30页
       ·辣根过氧化物酶(HRP)标记SD第30页
       ·ELISA 使用试剂配制第30页
     ·HRP-SD 工作浓度的筛选第30页
     ·羊抗鼠IgG 包被浓度及SD mAb IgG 工作浓度的筛选第30-31页
     ·SD ELISA 检测试剂盒的建立第31页
     ·SD-kit 灵敏度测定及交叉性测定第31页
     ·SD-kit 的添加回收率测定第31-32页
       ·SD 的样品添加第31页
       ·SD-kit 的添加样品回收率测定第31-32页
     ·结果判定第32页
 2 结果与分析第32-35页
   ·HRP-SD 工作浓度的筛选第32页
   ·羊抗鼠IgG 包被浓度及SD mAb IgG 工作浓度的筛选第32-33页
   ·SD ELISA 检测试剂盒的建立第33页
   ·SD-kit 灵敏度测定及交叉性测定第33-35页
   ·SD-kit 的添加回收率第35页
 3 讨论第35-37页
   ·试剂盒的交叉反应性第35-36页
   ·试剂盒对不同样品的添加回收率第36页
   ·有待完成的工作第36-37页
第五章 磺胺嘧啶残留快速检测试纸的研制及性能测定第37-46页
 1 材料与方法第37-40页
   ·材料与设备第37-38页
   ·方法第38-40页
     ·标准品的配制第38页
     ·单克隆抗体的标记第38-39页
       ·胶体金的制备第38页
       ·胶体金与待标记蛋白比例的确定第38页
       ·SD mAb IgG 的标记第38-39页
     ·SD 检测试纸的制备第39页
       ·胶金垫的准备第39页
       ·膜的准备第39页
       ·样品垫和吸水垫的准备第39页
       ·试纸的组装第39页
     ·试纸的敏感性检测第39页
     ·试纸条的特异性检测第39-40页
     ·结果判定第40页
 2 结果与分析第40-43页
   ·试纸条的敏感性检测第40-41页
   ·试纸条的特异性检测第41-43页
 3 讨论第43-46页
   ·胶体金技术的优势第43页
   ·试纸的结构及工作原理第43-44页
   ·胶体金的质量第44-45页
   ·试纸硝酸纤维素膜的选择第45-46页
结论第46-47页
参考文献第47-52页
ABSTRACT第52-53页

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