| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第1章 引言 | 第10-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-31页 |
| ·实验材料 | 第13-16页 |
| ·实验细胞株 | 第13页 |
| ·主要试剂及产地 | 第13-16页 |
| ·仪器设备和产地 | 第16页 |
| ·实验方法和步骤 | 第16-31页 |
| ·实验步骤 | 第16-18页 |
| ·表达HIF-1 siRNA的寡核苷酸的设计及合成 | 第18-19页 |
| ·宫颈癌细胞SiHa的培养 | 第19-20页 |
| ·细胞转染 | 第20-21页 |
| ·使用荧光标记的siRNA观察转染效果 | 第21-22页 |
| ·使用阳性对照检测GAPDHsiRNA对GAPDH的干扰情况 | 第22-23页 |
| ·筛选干扰效率最高的siRNA- | 第23-29页 |
| ·筛选得出的siRNA对HIF-1基因干扰作用的时效性和特异性的检测 | 第29-30页 |
| ·统计学分析 | 第30-31页 |
| 第3章 结果 | 第31-44页 |
| ·表达HIF-1 siRNA的寡核苷酸的设计及合成 | 第31-32页 |
| ·使用荧光标记的siRNA观察转染效果 | 第32-33页 |
| ·使用阳性对照检测GAPDHsiRNA对GAPDH的干扰情况 | 第33-35页 |
| ·筛选干扰效率最高的siRNA | 第35-40页 |
| ·常氧条件下靶向于HIF-1的高效siRNA的筛选 | 第35-37页 |
| ·低氧条件下靶向于HIF-1的高效siRNA的筛选 | 第37-40页 |
| ·筛选得出的H2siRNA对HIF-1基因干扰作用的时效性和特异性的检测 | 第40-44页 |
| ·H2siRNA转染SiHa细胞后常氧培养各时段HIF-1mRNA的和蛋白的表达情况 | 第40-41页 |
| ·H2siRNA转染SiHa细胞后低氧培养各时段HIF-1mRNA的和蛋白的表达情况 | 第41-44页 |
| 第4章 讨论 | 第44-50页 |
| ·低氧诱导因子—1(HIF-1) | 第44-45页 |
| ·HIF-1的生物学特性 | 第44页 |
| ·HIF-1表达的基因调控 | 第44-45页 |
| ·HIF-1与宫颈癌 | 第45-46页 |
| ·RNAi技术 | 第46-47页 |
| ·RNAi的干扰效率问题 | 第47-48页 |
| ·结语 | 第48-50页 |
| 第5章 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 综述 | 第55-67页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第67页 |
