| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-22页 |
| ·野生稻的分类及我国野生稻的分布情况 | 第10-11页 |
| ·野生稻中抗病虫基因研究进展 | 第11-12页 |
| ·野生稻抗病性研究进展 | 第11-12页 |
| ·野生稻抗虫性研究进展 | 第12页 |
| ·常用的植物抗病基因克隆策略 | 第12-15页 |
| ·图位克隆 | 第12-13页 |
| ·转座子标签技术 | 第13页 |
| ·功能克隆 | 第13页 |
| ·表型克隆 | 第13-14页 |
| ·几种克隆方法优缺点比较 | 第14-15页 |
| ·常用的抗病基因克隆策略在野生稻应用的局限性 | 第15页 |
| ·抗病基因同源序列法(RGA法)的概念及进展 | 第15-17页 |
| ·植物R基因序列保守性 | 第15-16页 |
| ·基于RGA寻找、克隆候选抗病基因的策略 | 第16-17页 |
| ·RGAs技术与RecA蛋白文库富集技术结合克隆抗性基因 | 第17-19页 |
| ·基于RecA蛋白的文库富集技术 | 第18-19页 |
| ·RGAs技术与RecA蛋白文库富集技术结合克隆抗性基因新策略 | 第19页 |
| ·LA-PCR技术克隆获得全长候选抗性基因 | 第19-20页 |
| ·转基因植株的田间白叶枯抗性鉴定 | 第20-21页 |
| ·研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 研究内容及技术路线 | 第22-23页 |
| 第三章 实验材料 | 第23-26页 |
| ·野生稻、菌株和载体 | 第23页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第23页 |
| ·生物信息学分析软件 | 第23-24页 |
| ·实验所用引物 | 第24-26页 |
| ·富集内参引物 | 第24页 |
| ·STK类引物 | 第24页 |
| ·nT-NBS-LRR类引物 | 第24-25页 |
| ·LA-PCR引物 | 第25-26页 |
| 第四章 实验方法 | 第26-37页 |
| ·富集效率的检测及小粒野生稻富集文库构建 | 第26-31页 |
| ·富集内参的制备 | 第26页 |
| ·探针的制备 | 第26-29页 |
| ·富集反应及转化 | 第29-30页 |
| ·一次富集产物回收 | 第30页 |
| ·二次富集及富集文库的筛选、保存 | 第30-31页 |
| ·富集文库的杂交筛选 | 第31-33页 |
| ·杂交探针的制备 | 第31页 |
| ·杂交膜的处理 | 第31-32页 |
| ·杂交 | 第32页 |
| ·显色与压片 | 第32-33页 |
| ·富集阳性克隆的鉴定及分析 | 第33页 |
| ·LA-PCR扩增获得全长RPS2候选抗性基因 | 第33-34页 |
| ·转基因植株获得 | 第34-36页 |
| ·阳性克隆穿梭至农杆菌 | 第34页 |
| ·农杆菌介导的水稻转化体系 | 第34-36页 |
| ·田间白叶枯病抗性鉴定 | 第36-37页 |
| ·播种前材料处理 | 第36页 |
| ·田间接种 | 第36页 |
| ·染病情况分析 | 第36-37页 |
| 第五章 结果与分析 | 第37-52页 |
| ·内参富集效率检测 | 第37-38页 |
| ·小粒野生稻富集文库制备 | 第38-41页 |
| ·STK类探针的制备及分析 | 第38-40页 |
| ·STK混合探针、NBS兼并、混合探针制备及分析 | 第40页 |
| ·小粒富集文库制备 | 第40-41页 |
| ·富集文库的杂交筛选和鉴定 | 第41-42页 |
| ·杂交探针质量分析 | 第41页 |
| ·杂交膜显色 | 第41-42页 |
| ·阳性克隆酶切鉴定 | 第42页 |
| ·阳性克隆末端测序分析 | 第42-47页 |
| ·STK类阳性克隆的测序分析 | 第42-45页 |
| ·NBS类阳性克隆的测序分析 | 第45-47页 |
| ·RPS2候选抗性基因的克隆与分析 | 第47-50页 |
| ·RPS2候选抗性基因的克隆 | 第47-49页 |
| ·野生稻全长RPS2类抗性基因序列分析 | 第49-50页 |
| ·穿梭农杆菌稳定性检测 | 第50页 |
| ·转基因植株田间白叶枯抗性鉴定 | 第50-52页 |
| 第六章 讨论 | 第52-54页 |
| ·RGAs技术与文库富集技术结合提供抗性基因克隆的新策略 | 第52页 |
| ·高保真PCR在抗性基因研究方面的应用 | 第52页 |
| ·抗病、感病基因序列相似性及对抗性基因克隆的影响 | 第52-53页 |
| ·抗性基因克隆的研究展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 附录1 仪器设备 | 第62-63页 |
| 附录2 试剂配方 | 第63-66页 |
| 附录3 缩略词 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者在学期间取得的学术成果 | 第68页 |
