| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-24页 |
| ·火鸡疱疹病毒概述 | 第14-17页 |
| ·HVT 与MDV | 第14页 |
| ·HVT 的生物学特性和基因组结构 | 第14-15页 |
| ·HVT 的基因和蛋白 | 第15-16页 |
| ·HVT 的感染机制 | 第16-17页 |
| ·禽流感概述 | 第17-20页 |
| ·禽流感历史 | 第18-19页 |
| ·AIV 基因功能 | 第19-20页 |
| ·重组HVT 的研究 | 第20-23页 |
| ·构建重组病毒的原则 | 第21页 |
| ·构建重组病毒的方法 | 第21-22页 |
| ·HVT 作为病毒载体的优点 | 第22-23页 |
| ·重组HVT 的研究现状 | 第23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 US2 区域表达AIV H5 亚型HA 基因重组HVT 转移载体的构建 | 第24-29页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·质粒载体、工程菌和毒株 | 第24页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-26页 |
| ·引物设计与合成 | 第24-25页 |
| ·重组病毒转移载体加压筛选标记基因和HA 表达盒的扩增 | 第25页 |
| ·重组病毒转移载体pGAB-gpt-HA 的构建 | 第25-26页 |
| ·结果 | 第26-27页 |
| ·加压筛选标记gpt 基因和HA 基因表达盒的鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组病毒转移载体鉴定结果 | 第27页 |
| ·讨论 | 第27-29页 |
| ·表达AIV H5 亚型HA 基因 | 第27-28页 |
| ·表达Eco-gpt 选择标记基因 | 第28-29页 |
| 第三章 US10 区域表达AIV H5 亚型HA 基因重组HVT 转移载体的构建 | 第29-34页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·质粒载体、工程菌和毒株 | 第29页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-31页 |
| ·引物设计与合成 | 第29-30页 |
| ·重组病毒转移载体同源序列及gpt 基因的扩增 | 第30页 |
| ·US10 区域重组病毒转移载体pUAB-gpt-HA 的构建 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-32页 |
| ·转移载体同源序列及gpt 基因的鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组病毒转移载体鉴定结果 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| ·HVT 非必需基因US10 区同源序列设计 | 第32-33页 |
| ·双表达盒方向 | 第33-34页 |
| 第四章 表达AIV H5 亚型HA 基因重组火鸡疱疹病毒的构建 | 第34-43页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·病毒、试剂与鸡胚 | 第34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-37页 |
| ·转移载体质粒的提取和纯化 | 第35页 |
| ·转染用HVT 感染细胞总DNA 的制备 | 第35页 |
| ·转移载体与感染细胞总DNA 共转染CEF | 第35-36页 |
| ·重组病毒的筛选与纯化 | 第36页 |
| ·重组病毒的PCR 鉴定 | 第36页 |
| ·间接免疫荧光检测（IFA） | 第36-37页 |
| ·HA 表达的western blot 检测 | 第37页 |
| ·红细胞凝集试验 | 第37页 |
| ·重组病毒生长特性的测定 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·重组病毒的PCR 鉴定HA 基因 | 第37-38页 |
| ·重组HVT 表达HA 的IFA 检测 | 第38-39页 |
| ·重组HVT 表达HA 的western blot 结果 | 第39页 |
| ·红细胞凝集试验检测结果 | 第39-40页 |
| ·生长特性 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·转染方法的比较 | 第41页 |
| ·加压筛选条件的优化 | 第41页 |
| ·加压筛选培养液的更换方法 | 第41页 |
| ·重组病毒rHVT-US2-HA 和rHVT-US10-HA 体外特性比较 | 第41-43页 |
| 第五章 RHVT-US2-HA 和RHVT-US10-HA 免疫效果比较 | 第43-51页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·试验鸡 | 第43页 |
| ·病毒和疫苗 | 第43页 |
| ·试剂和仪器 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·病毒的准备 | 第43-44页 |
| ·重组病毒MDV 攻毒免疫保护性试验 | 第44-45页 |
| ·重组病毒针对AIV 攻毒免疫保护性试验 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-48页 |
| ·重组病毒免疫鸡MDV 攻毒试验 | 第45-47页 |
| ·重组病毒免疫鸡AIV 攻毒试验 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-51页 |
| ·MDV 攻毒免疫保护试验分析 | 第48-49页 |
| ·AIV 攻毒免疫保护试验分析 | 第49页 |
| ·AIV 和MDV 攻毒免疫保护试验综合分析 | 第49-51页 |
| 第六章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |
