中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-42页 |
·分子仿生学及研究方法 | 第14-16页 |
·无机结合肽及纳米科学 | 第16-27页 |
·总述 | 第16-18页 |
·表面展示技术筛选无机结合蛋白 | 第18-19页 |
·无机结合肽的化学特性 | 第19-21页 |
·肽固定的分子模型及物理特性 | 第21-23页 |
·无机结合肽为媒介的纳米组装 | 第23-24页 |
·无机结合肽与纳米聚集及应用前景 | 第24-26页 |
·无机结合肽研究的最新进展 | 第26-27页 |
·表面展示技术及杆状病毒表达系统 | 第27-40页 |
·噬菌体展示技术 | 第27-29页 |
·基本原理与扩展 | 第28页 |
·单链丝状噬菌体展示系统 | 第28-29页 |
·杆状病毒表达体系及展示技术 | 第29-33页 |
·杆状病毒简介与分类 | 第30-31页 |
·杆状病毒的结构 | 第31页 |
·杆状病毒的感染周期 | 第31-33页 |
·杆状病毒表达体系的原理 | 第33-34页 |
·传统的杆状病毒表达体系 | 第34-35页 |
·Bac-to-Bac杆状病毒表达体系 | 第35-36页 |
·杆状病毒表面展示 | 第36-39页 |
·杆状病毒衣壳展示 | 第39-40页 |
·本实验的目的和意义 | 第40-42页 |
第二章 原核体系下ZnO无机结合肽应用于生物无机合成方法的研究 | 第42-58页 |
·引言 | 第42-43页 |
·材料与方法 | 第43-48页 |
·材料 | 第43-44页 |
·实验仪器 | 第44页 |
·方法 | 第44-48页 |
·合成编码ZnO无机结合肽基因His-Zno | 第44-45页 |
·重组质粒构建和融合蛋白表达 | 第45-47页 |
·亲和吸附实验 | 第47-48页 |
·重组蛋白促进ZnO前驱粉体的生物-无机合成 | 第48页 |
·XRD和TEM实验 | 第48页 |
·结果 | 第48-55页 |
·融合蛋白表达的检定分析 | 第48-50页 |
·亲和吸附实验特异性吸附的验证 | 第50-53页 |
·重组蛋白促进ZnO前驱粉体的生物-无机合成 | 第53-55页 |
·讨论 | 第55-58页 |
第三章 基于Bac-to-Bac表面展示、无机结合肽介导的杆状病毒-ZnO.纳米粒复合体的构建 | 第58-72页 |
·引言 | 第58-59页 |
·材料和方法 | 第59-62页 |
·质粒、菌株与试剂 | 第59-60页 |
·细胞 | 第60页 |
·目的基因的构建 | 第60-61页 |
·质粒的构建及酶切鉴定 | 第61页 |
·重组病毒的构建 | 第61页 |
·融合表达产物的检测 | 第61-62页 |
·原核表达重组蛋白 | 第62页 |
·重组病毒-纳米粒子复合体的组建与TEM分析 | 第62页 |
·结果 | 第62-69页 |
·重组供体质粒pFB-gp64-ZnO的构建及其鉴定 | 第62-65页 |
·重组Bacmid的构建与筛选 | 第65-66页 |
·重组Bacmid转染昆虫细胞及收获重组病毒 | 第66页 |
·重组病毒纯化、SDS-PAGE电泳及western blot鉴定融合蛋白表达 | 第66-67页 |
·胶体金免疫电镜分析融合蛋白的展示 | 第67-68页 |
·重组病毒与纳米粒子的结合 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-72页 |
第四章 带His标签的ZnO结合肽通过Bac-to-Bac系统与杆状病毒.衣壳蛋白的融合展示 | 第72-84页 |
·引言 | 第72页 |
·材料与方法 | 第72-75页 |
·质粒、菌株与试剂 | 第73页 |
·细胞 | 第73页 |
·目的基因的构建 | 第73页 |
·质粒的构建及酶切鉴定 | 第73-74页 |
·重组病毒的构建 | 第74页 |
·融合表达产物的检测 | 第74页 |
·原核表达重组蛋白 | 第74页 |
·核壳分离、病毒-纳米ZnO复合体组建与TEM分析 | 第74-75页 |
·结果 | 第75-82页 |
·重组供体质粒pFB-vp39-ZnO的构建及其鉴定 | 第75-78页 |
·重组Bacmid的构建与筛选 | 第78-79页 |
·重组Bacmid转染昆虫细胞及收获重组病毒 | 第79页 |
·重组病毒制备及融合蛋Western blot检测 | 第79-81页 |
·重组病毒与纳米粒子的结合 | 第81-82页 |
·讨论 | 第82-84页 |
第五章 金特异性结合短肽介导的重组杆状病毒与胶体金构成的纳米.复合体 | 第84-92页 |
·引言 | 第84页 |
·材料和方法 | 第84-86页 |
·质粒、菌株与试剂 | 第84-85页 |
·细胞 | 第85页 |
·目的基因的构建 | 第85页 |
·gp64基因的克隆及重组转座质粒的构建 | 第85页 |
·重组病毒的构建 | 第85页 |
·SDS-PAGE分析检测融合表达产物 | 第85-86页 |
·胶体金的制备 | 第86页 |
·重组病毒-胶体金复合体的组建与TEM分析 | 第86页 |
·结果 | 第86-91页 |
·重组供体质粒pFB-gp64-Au的构建及其鉴定 | 第86-89页 |
·重组Bacmid的构建与筛选 | 第89页 |
·重组Bacmid转染昆虫细胞及收获重组病毒 | 第89页 |
·重组病毒纯化及SDS-PAGE电泳鉴定融合蛋白表达 | 第89-90页 |
·重组病毒与胶体金的结合 | 第90-91页 |
·讨论 | 第91-92页 |
第六章 双标签蛋白的克隆,表达和纯化及其吸附纳米ZnO的生物活性.研究 | 第92-100页 |
·引言 | 第92页 |
·材料和方法 | 第92-95页 |
·材料 | 第92-93页 |
·方法 | 第93-95页 |
·结果和讨论 | 第95-98页 |
·含6×His基因片段的扩增、克隆和表达 | 第95-96页 |
·亲和吸附实验 | 第96-98页 |
·结论 | 第98-100页 |
结论与展望 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-108页 |
博士研究生期间已发表的论文及专利 | 第108-110页 |
致谢 | 第110-111页 |
北京化工大学博士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第111-112页 |