| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-16页 |
| 缩略词 | 第16-18页 |
| 文献综述 Ghrelin 与生殖的研究进展 | 第18-27页 |
| 1 Ghrelin 的发现背景及命名 | 第18页 |
| 2 Ghrelin 及其受体的分子结构 | 第18-20页 |
| ·Ghrelin 的分子结构 | 第18-19页 |
| ·Ghrelin 受体GHS-R 的分子结构 | 第19-20页 |
| 3 Ghrelin 在体内的分布 | 第20页 |
| 4 Ghrelin 的生理功能 | 第20-27页 |
| ·调节生长素的分泌 | 第20-21页 |
| ·调节胃肠道功能 | 第21页 |
| ·调节摄食和能量代谢 | 第21-22页 |
| ·调节心血管系统功能 | 第22页 |
| ·对生殖的调节作用 | 第22-27页 |
| ·调节激素分泌 | 第22-23页 |
| ·对生殖细胞的调节 | 第23-25页 |
| ·调节胚胎发育 | 第25页 |
| ·调节动物发情 | 第25-27页 |
| 研究论文 Ghrelin 对大鼠下丘脑-垂体-性腺的影响及其机理研究 | 第27-89页 |
| 引言 | 第27-28页 |
| 第一章 Ghrelin 及其功能性受体GHS-R_(1a)在大鼠下丘脑-垂体-性腺上的定位 | 第28-38页 |
| 前言 | 第28页 |
| 1 材料与方法 | 第28-30页 |
| ·试验材料 | 第28-29页 |
| ·试验动物 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28-29页 |
| ·溶液的配制 | 第29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-30页 |
| ·试验动物处理 | 第29页 |
| ·组织切片制作 | 第29页 |
| ·免疫组织化学步骤 | 第29-30页 |
| ·观察并拍照 | 第30页 |
| 2 结果 | 第30-35页 |
| ·Ghrelin 在下丘脑-垂体-性腺轴上的定位 | 第30-32页 |
| ·Ghrelin 在下丘脑上的定位 | 第30-31页 |
| ·Ghrelin 在垂体上的定位 | 第31页 |
| ·Ghrelin 在睾丸上的定位 | 第31-32页 |
| ·Ghrelin 在卵巢上的定位 | 第32页 |
| ·GHS-R_(1a) 在大鼠下丘脑-垂体-性腺轴上的定位 | 第32-35页 |
| ·GHS-R_(1a) 在下丘脑上的定位 | 第32-33页 |
| ·GHS-R_(1a) 在垂体上的定位 | 第33页 |
| ·GHS-R_(1a) 在卵巢上的定位 | 第33-34页 |
| ·GHS-R_(1a) 在睾丸上的定位 | 第34-35页 |
| 3 分析与讨论 | 第35-37页 |
| ·关于Ghrelin 在下丘脑、垂体、性腺中的分布 | 第35-36页 |
| ·关于Ghrelin 受体在下丘脑、垂体、性腺中的分布 | 第36-37页 |
| 4 小结 | 第37-38页 |
| 第二章 Ghrelin mRNA 在大鼠下丘脑-垂体-性腺上的表达 | 第38-45页 |
| 前言 | 第38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·试验材料 | 第38-39页 |
| ·试验动物 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·溶液的配制 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-41页 |
| ·试验动物处理 | 第39页 |
| ·组织切片制作 | 第39-40页 |
| ·地高辛标记的Ghrelin 寡核苷酸探针序列 | 第40页 |
| ·切片的原位杂交检测 | 第40页 |
| ·观察并拍照 | 第40-41页 |
| 2 结果 | 第41-43页 |
| ·Ghrelin mRNA 在大鼠下丘脑上的表达 | 第41页 |
| ·Ghrelin mRNA 在大鼠脑垂体上的定位 | 第41页 |
| ·Ghrelin mRNA 在大鼠睾丸上的表达 | 第41-42页 |
| ·Ghrelin mRNA 在大鼠卵巢上的表达 | 第42-43页 |
| 3 分析与讨论 | 第43-44页 |
| ·关于Ghrelin mRNA 在下丘脑中的表达 | 第43页 |
| ·关于Ghrelin mRNA 在垂体中的表达 | 第43页 |
| ·关于Ghrelin mRNA 在睾丸中的表达 | 第43-44页 |
| ·关于Ghrelin mRNA 在卵巢中的表达 | 第44页 |
| 4 小结 | 第44-45页 |
| 第三章 Ghrelin 及其受体mRNA 在不同发情周期中的表达 | 第45-56页 |
| 前言 | 第45-46页 |
| 1 材料与方法 | 第46-50页 |
| ·试验材料 | 第46-47页 |
| ·试验动物 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·溶液的配制 | 第46页 |
| ·主要仪器设备 | 第46-47页 |
| ·组织取材 | 第47页 |
| ·试验方法 | 第47-50页 |
| ·大鼠发情各阶段的阴道组织涂片观察 | 第47-48页 |
| ·总RNA 的提取 | 第48页 |
| ·RNA 完整性检测 | 第48页 |
| ·RNA 浓度和纯度测定 | 第48-49页 |
| ·引物的设计与合成 | 第49页 |
| ·逆转录 | 第49页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第49-50页 |
| ·统计分析 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-53页 |
| ·标准曲线与溶解曲线 | 第50-51页 |
| ·Ghrelin mRNA、GHS-R_(1a) mRNA 在下丘脑上的表达 | 第51页 |
| ·Ghrelin mRNA、GHS-R_(1a) mRNA 在脑垂体上的表达 | 第51-52页 |
| ·Ghrelin mRNA、GHS-R_(1a) mRNA 在卵巢上的表达 | 第52-53页 |
| 3 分析与讨论 | 第53-55页 |
| ·Ghrelin mRNA 在生殖轴中的表达 | 第53-54页 |
| ·GHS-R_(1a) mRNA 在生殖轴中的表达 | 第54-55页 |
| 4 小结 | 第55-56页 |
| 第四章 侧脑室注射Ghrelin 对大鼠促性腺激素和性腺激素分泌的影响 | 第56-67页 |
| 前言 | 第56-57页 |
| 1 材料与方法 | 第57-60页 |
| ·试验材料 | 第57页 |
| ·试验动物 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·溶液的配制 | 第57页 |
| ·主要仪器设备 | 第57页 |
| ·试验方法 | 第57-60页 |
| ·试验动物的分组与处理 | 第57-58页 |
| ·大鼠的侧脑室注射 | 第58页 |
| ·血样的采集 | 第58页 |
| ·促性腺激素的测定 | 第58-59页 |
| ·性腺激素的测定 | 第59页 |
| ·统计分析 | 第59-60页 |
| 2 结果 | 第60-62页 |
| ·不同剂量Ghrelin 侧脑室注射对成年雄性大鼠LH、FSH、T 分泌的影响 | 第60页 |
| ·对LH 的影响 | 第60页 |
| ·对FSH 的影响 | 第60页 |
| ·对T 的影响 | 第60页 |
| ·不同剂量Ghrelin 侧脑室注射对发情后期雌性大鼠LH、FSH、E_2、P_4 分泌的影响 | 第60-61页 |
| ·对LH 的影响 | 第60页 |
| ·对FSH 的影响 | 第60页 |
| ·对E_2 的影响 | 第60页 |
| ·对P_4 的影响 | 第60-61页 |
| ·111mol Ghrelin 侧脑室注射对不同发情周期雌性大鼠LH、FSH 分泌的影响 | 第61-62页 |
| ·对LH 的影响 | 第61页 |
| ·对FSH 的影响 | 第61-62页 |
| ·3 nmol Ghrelin 侧脑室注射对不同发情周期雌性大鼠E_2、P_4 分泌的影响 | 第62页 |
| ·对E_2 的影响 | 第62页 |
| ·对P_4 的影响 | 第62页 |
| 3 分析与讨论 | 第62-66页 |
| ·Ghrelin 对促性腺激素分泌的影响 | 第62-64页 |
| ·Ghrelin 大鼠性腺激素分泌的影响 | 第64-66页 |
| 4 小结 | 第66-67页 |
| 第五章 侧脑室注射 Ghrelin 对大鼠促性腺激素释放激素、促性腺激素mRNA、性腺激素受体mRNA 表达的影响 | 第67-80页 |
| 前言 | 第67页 |
| 1 材料与方法 | 第67-69页 |
| ·试验材料 | 第67-68页 |
| ·试验动物 | 第67页 |
| ·主要试剂 | 第67页 |
| ·溶液的配制 | 第67页 |
| ·主要仪器设备 | 第67-68页 |
| ·组织取材 | 第68页 |
| ·试验方法 | 第68-69页 |
| ·总RNA 的提取 | 第68页 |
| ·RNA 完整性检测 | 第68页 |
| ·RNA 浓度和纯度测定 | 第68页 |
| ·逆转录方法 | 第68页 |
| ·引物设计 | 第68-69页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第69页 |
| ·统计分析 | 第69页 |
| 2 结果 | 第69-76页 |
| ·标准曲线与溶解曲线 | 第69-71页 |
| ·侧脑室注射 Ghrelin (1nmol)对不同发情周期雌性大鼠GnRH mRNA 表达的影响 | 第71-72页 |
| ·侧脑室注射Ghrelin（1nmol）对不同发情周期雌性大鼠LH、FSH mRNA 表达的影响 | 第72-73页 |
| ·对LH mRNA 表达的影响 | 第72页 |
| ·对FSH mRNA 表达的影响 | 第72-73页 |
| ·不同剂量 Ghrelin 侧脑室注射对发情后期雌性大鼠 LH、FSH mRNA 表达的影响 | 第73页 |
| ·对LH mRNA 表达的影响 | 第73页 |
| ·对FSH mRNA 表达的影响 | 第73页 |
| ·侧脑室注射Ghrelin 对不同发情周期大鼠ER_β、PR_(A+B) mRNA 表达的影响 | 第73-74页 |
| ·对ER_βmRNA 表达的影响 | 第73页 |
| ·对PR_(A+B) mRNA 表达的影响 | 第73-74页 |
| ·不同剂量的 Ghrelin 侧脑室注射对发情后期大鼠对卵巢 ER_β、PR_(A+B) mRNA 表达的影响 | 第74-75页 |
| ·对ER_βmRNA 表达的影响 | 第74页 |
| ·对PR_(A+B)mRNA 表达的影响 | 第74-75页 |
| ·侧脑室注射不同剂量的 Ghrelin 对雄性大鼠ARmRNA.表达的影响 | 第75页 |
| ·侧脑室注射Ghrelin，大鼠垂体促性腺激素mRNA 表达丰度与血清促性腺激素浓度的相关性分析 | 第75-76页 |
| 3 分析与讨论 | 第76-79页 |
| ·侧脑室注射 Ghrelin 对促性腺激素释放激素mRNA 表达的影响 | 第76页 |
| ·侧脑室注射Ghrelin 对促性腺激素mRNA 表达的影响 | 第76-77页 |
| ·侧脑室注射Ghrelin 对性腺激素受体mRNA 表达的影响 | 第77-79页 |
| 4 小结 | 第79-80页 |
| 第六章 Ghrelin 在体外对大鼠性腺激素分泌及其受体mRNA 表达的影响 | 第80-89页 |
| 前言 | 第80页 |
| 1 材料与方法 | 第80-83页 |
| ·试验材料 | 第80-82页 |
| ·试验动物 | 第80页 |
| ·主要试剂 | 第80-81页 |
| ·溶液的配制 | 第81页 |
| ·主要仪器设备 | 第81-82页 |
| ·试验方法 | 第82-83页 |
| ·性腺激素的测定 | 第82页 |
| ·实时定量PCR 试验部分 | 第82页 |
| ·细胞的制备与培养 | 第82-83页 |
| ·统计分析 | 第83页 |
| 2 结果 | 第83-85页 |
| ·不同浓度的Ghrelin 对孕酮、雌激素分泌的影响 | 第83-84页 |
| ·对P_4 的影响 | 第83页 |
| ·对E_2 的影响 | 第83-84页 |
| ·不同浓度的Ghrelin 对睾丸间质细胞睾酮分泌的影响 | 第84页 |
| ·不同浓度的Ghrelin 对PR_(A+B) mRNA、ER_βmRNA 表达的影响 | 第84-85页 |
| ·对PR_(A+B) mRNA 的影响 | 第84页 |
| ·对ER_βmRNA 的影响 | 第84-85页 |
| ·不同浓度的Ghrelin 对睾丸间质细胞AR mRNA 表达的影响 | 第85页 |
| 3 分析与讨论 | 第85-87页 |
| ·体外条件下Ghrelin 对E_2、P_4、T 分泌的影响 | 第85-87页 |
| ·体外条件下Ghrelin 对ER_βmRNA、PR_(A+B) mRNA、AR mRNA 表达的影响 | 第87页 |
| 4 小结 | 第87-89页 |
| 全文结论 | 第89-90页 |
| 本课题的创新点和对课题的进一步设想 | 第90-91页 |
| 1. 从分子角度进一步阐明 Ghrelin 及其受体在大鼠精母细胞、卵母细胞中的表达 规律, | 第90页 |
| 2. GHS-R_(1b) 以及其它亚型的主要生理功能 | 第90页 |
| 3. Ghrelin 对生殖轴的作用机理有待于进一步探索 | 第90页 |
| 4. Ghrelin 在家畜体内的分布和表达，从而为畜牧业生产提供理论指导 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
| 作者简介 | 第104-105页 |
| 读期间发表论文 | 第105页 |
