| 摘要 | 第1-4页 |
| Summary | 第4-8页 |
| 缩写词英汉对照表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1 大肠杆菌不耐热肠毒素B 亚基的研究概况 | 第9-12页 |
| ·LT 的结构和功能 | 第9-10页 |
| ·LTB 的免疫原性及黏膜佐剂研究 | 第10-12页 |
| ·LTB 的免疫原性表位 | 第10页 |
| ·LTB 的免疫原性 | 第10-11页 |
| ·LTB 的黏膜免疫佐剂作用 | 第11-12页 |
| ·存在的问题及展望 | 第12页 |
| 2 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5 蛋白的研究概况 | 第12-16页 |
| ·PRRSV 的结构 | 第12-13页 |
| ·GP5 蛋白的研究现状 | 第13-15页 |
| ·GP5 蛋白特性 | 第13页 |
| ·GP5 蛋白的免疫作用 | 第13-14页 |
| ·GP5 蛋白的生物学功能 | 第14-15页 |
| ·存在的问题及展望 | 第15-16页 |
| 3 研究的目的和意义 | 第16页 |
| 4 研究的内容和方法 | 第16-17页 |
| 第二章 PRRSV-GP5 蛋白的原核表达条件与纯化技术的优化 | 第17-24页 |
| 1 材料与方法 | 第17-19页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-19页 |
| ·种子菌的制备 | 第17-18页 |
| ·GP5 蛋白表达条件优化试验 | 第18页 |
| ·蛋白纯化条件优化 | 第18页 |
| ·大批量制备GP5 表达蛋白 | 第18-19页 |
| ·ELISA 检测表达蛋白的免疫原性 | 第19页 |
| 2 结果与分析 | 第19-22页 |
| ·基因工程菌表达条件的优化 | 第19-20页 |
| ·诱导时间优化 | 第19页 |
| ·IPTG 浓度优化 | 第19-20页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第20-21页 |
| ·表达裂解液的比较 | 第20页 |
| ·洗涤液优化 | 第20-21页 |
| ·大量纯化重组蛋白 | 第21-22页 |
| ·表达蛋白反应原性鉴定 | 第22页 |
| 3 讨论 | 第22-24页 |
| 第三章 LTB 蛋白真核酵母表达条件与纯化技术的优化 | 第24-31页 |
| 1 材料与方法 | 第24-26页 |
| ·材料 | 第24页 |
| ·方法 | 第24-26页 |
| ·种子菌的制备 | 第24页 |
| ·LTB 蛋白表达程序及检测方法 | 第24-25页 |
| ·发酵条件优化试验 | 第25页 |
| ·LTB 蛋白提纯试验 | 第25-26页 |
| ·LTB 蛋白特性检测 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-30页 |
| ·LTB 酵母工程菌表达条件的优化 | 第26-28页 |
| ·诱导时间优化 | 第26-27页 |
| ·甲醇浓度优化 | 第27页 |
| ·表达培养基浓度优化 | 第27页 |
| ·表达菌起始浓度优化 | 第27-28页 |
| ·LTB 蛋白提纯试验 | 第28-29页 |
| ·硫酸铵饱和度优化 | 第28页 |
| ·二步法亲和层析提纯LTB | 第28-29页 |
| ·LTB 蛋白特性检测 | 第29-30页 |
| ·非变性SDS-PAGE 电泳检测 | 第29页 |
| ·GM1-ELISA 检测LTB 与神经节苷脂的结合能力 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-31页 |
| 第四章 LTB 增强 PRRSV-GP5 蛋白免疫原性的研究 | 第31-38页 |
| 1 材料与方法 | 第31-34页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·表达蛋白 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·实验动物 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·小鼠免疫试验 | 第32-33页 |
| ·仔猪免疫试验 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·最佳抗原包被浓度结果 | 第34页 |
| ·小鼠抗体水平检测结果 | 第34-35页 |
| ·皮下免疫的体液检测结果 | 第34页 |
| ·肌肉免疫体液检测结果 | 第34页 |
| ·滴鼻免疫的体液检测结果 | 第34-35页 |
| ·不同免疫途径的体液检测 | 第35页 |
| ·小鼠细胞免疫检测结果 | 第35-36页 |
| ·小鼠B 淋巴细胞增殖的检测结果 | 第35页 |
| ·小鼠T 淋巴细胞增殖的检测结果 | 第35-36页 |
| ·仔猪抗体水平检测结果 | 第36-37页 |
| ·滴鼻+注射免疫的体液检测结果 | 第36页 |
| ·滴鼻免疫的体液检测结果 | 第36页 |
| ·不同免疫途径的体液检测 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 作者简介 | 第44-45页 |
| 导师简介 | 第45-46页 |
