| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·羽叶决明的研究进展 | 第11页 |
| ·缩合单宁的结构与功能 | 第11-16页 |
| ·缩合单宁的结构 | 第11-13页 |
| ·缩合单宁的功能 | 第13-16页 |
| ·缩合单宁合成途径及二氢黄酮醇-4-还原酶的研究现状 | 第16-17页 |
| ·DFR 基因的相关研究 | 第17-19页 |
| ·荧光定量PCR 的应用 | 第19-21页 |
| ·实时定量技术 | 第19页 |
| ·实时荧光定量的原理 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量的应用 | 第20-21页 |
| 第二章 缩合单宁含量的测定及DFR 酶活性的检测 | 第21-31页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第21-22页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·仪器 | 第21-22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·对材料的培育与前期处理 | 第22页 |
| ·缩合单宁粗提液制备 | 第22-23页 |
| ·缩合单宁的含量测定 | 第23页 |
| ·粗酶液的制备 | 第23页 |
| ·DFR 酶含量的测定 | 第23-24页 |
| ·植株全氮的测定 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-30页 |
| ·不同氮素水平对缩合单宁含量的影响 | 第24-26页 |
| ·不同氮素水平对DFR 酶活性的影响 | 第26-28页 |
| ·不同氮素水平对植株全氮的影响 | 第28-29页 |
| ·DFR 活性与缩合单宁含量的相关关系分析 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·羽叶决明缩合单宁的合成 | 第30页 |
| ·DFR 活性与缩合单宁含量的关系 | 第30-31页 |
| 第三章 DFR 基因的克隆及序列分析 | 第31-49页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·试剂 | 第31页 |
| ·仪器 | 第31-32页 |
| ·实验方法 | 第32-40页 |
| ·植物材料的处理 | 第32页 |
| ·总RNA 的提取与检测 | 第32-34页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第34-35页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·RT-PCR 的扩增 | 第35-37页 |
| ·RT-PCR 产物的回收、连接及转化 | 第37-39页 |
| ·阳性克隆的鉴定及测序 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-48页 |
| ·羽叶决明总RNA 的提取 | 第40-41页 |
| ·羽叶决明DFR 基因的cDNA 克隆 | 第41-42页 |
| ·序列分析 | 第42-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 荧光定量PCR 对DFR 基因表达差异的检测 | 第49-59页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第49-50页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·试剂 | 第49页 |
| ·仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-53页 |
| ·植物前处理 | 第50页 |
| ·RNA 的提取及验证 | 第50页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第50页 |
| ·引物设计 | 第50页 |
| ·内参 GAPDH 片段的扩增及DFR 目的片段的扩增 | 第50-52页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-58页 |
| ·总RNA 的提取 | 第53-54页 |
| ·内参 GAPDH 片段和DFR 目的片段的获得 | 第54-55页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第55-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 小结 | 第59-61页 |
| ·羽叶决明缩合单宁含量及DFR 酶活性的变化 | 第59页 |
| ·羽叶决明DFR 基因的克隆 | 第59页 |
| ·DFR 基因的表达差异分析 | 第59-60页 |
| ·本研究的不足与下一步的研究设想 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
