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斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略词表第9-10页
第一章 文献综述第10-20页
 1 斑点叉尾蛔病毒病第10-13页
   ·斑点叉尾徊生物学特性第10页
   ·斑点叉尾如病毒病流行病学特征第10-13页
 2 斑点叉尾蛔病毒第13-15页
   ·斑点叉尾胭病毒的分类地位和理化性质第13页
   ·斑点叉尾胭病毒的分子生物学特性第13-15页
     ·CCV的生长、繁殖第13-14页
     ·CCV基因组及其所编码蛋白的研究第14-15页
 3 抗斑点叉尾蛔病毒病疫苗的研究进程第15-17页
 4 其它疙疹病毒科成员的基因及蛋白功能的研究第17-18页
 5 本研究的目的和意义第18-20页
第二章 CCO的培养和CCV的增殖第20-26页
 1 材料和方法第20-22页
   ·实验材料第20-21页
     ·细胞、病毒第20页
     ·实验的主要试剂及其来源第20-21页
     ·实验器材及其产地第21页
   ·实验方法第21-22页
     ·CCO复苏和传代培养第21页
     ·CCV的增殖第21-22页
     ·CCV基因组序列的抽提第22页
 2 结果与分析第22-25页
   ·CCO的培养第22页
   ·CCV的增殖第22-25页
 3 讨论第25-26页
第三章 ORF6和ORF10基因的克隆及表达第26-38页
 1 材料和方法第26-31页
   ·实验材料第26-28页
     ·病毒、菌株和载体第26页
     ·原核载体构建主要试剂及来源第26-27页
     ·蛋白表达和鉴定的主要试剂及来源第27页
     ·实验所用仪器设备及产地第27-28页
   ·实验方法第28-31页
     ·特异性引物的设计与基因的PCR扩增第28页
     ·原核表达载体的构建第28-31页
     ·目的基因在大肠杆菌中的诱导表达第31页
     ·表达蛋白的Western Blot检测第31页
 2 结果与分析第31-36页
   ·ORF6/ORF10的PCR扩增及重组表达载体的酶切鉴定第31-33页
   ·ORF6和ORF10在大肠杆菌中的诱导表达第33-36页
     ·目的基因的诱导表达第33页
     ·表达产物的可溶性分析第33-36页
 3 讨论第36-38页
第四章 ORF6和ORF10的抗体的制备及其保护性研究第38-46页
 1 材料和方法第38-40页
   ·实验材料第38-39页
     ·细胞、病毒第38页
     ·实验试剂和耗材第38-39页
   ·实验方法第39-40页
     ·表达蛋白的纯化第39页
     ·多克隆抗体的制备第39-40页
     ·ORF6和ORF10多克隆抗体的保护性实验第40页
 2 结果与分析第40-41页
   ·多克隆抗体的特异性检测第40-41页
   ·ORF6和ORF10多克隆抗体的保护性研究第41页
 3 讨论第41-46页
参考文献第46-53页
致谢第53-54页
附表Ⅰ:实验中试剂的配制方法第54-58页
附表Ⅱ:硕士期间发表的论文第58页

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