致谢 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 植物与病原菌体系–番茄与白粉菌 | 第13-14页 |
·番茄 | 第13页 |
·番茄白粉菌 | 第13-14页 |
·番茄对白粉菌O. neolycopersici 的抗性 | 第14页 |
2 植物与病原菌互作的分子机制 | 第14-16页 |
·植物病原菌互作的遗传模式 | 第14-15页 |
·与非亲和因子相关的互作模式 | 第14-15页 |
·与亲和因子相关的互作模式 | 第15页 |
·植物抗病相关基因 | 第15-16页 |
·抗病基因(resistance, R) | 第15-16页 |
·抗病关键基因 | 第16页 |
3 病毒载体在植物与病原菌互作研究中的应用 | 第16-19页 |
·病毒沉默载体诱导的基因沉默 | 第17-19页 |
·VIGS 的分子机制 | 第17页 |
·VIGS 载体的发展 | 第17-18页 |
·VIGS 载体在植物抗病基因功能研究中的应用 | 第18页 |
·VIGS 的优越性和局限性 | 第18-19页 |
·病毒表达载体介导的基因表达 | 第19页 |
·病毒表达载体的发展和应用 | 第19页 |
·病毒表达载体在研究病原菌基因中的作用 | 第19页 |
4 研究目的、意义、内容与技术路线 | 第19-22页 |
·研究目的与意义 | 第19-20页 |
·研究内容 | 第20-21页 |
·技术路线 | 第21-22页 |
第二章 番茄白粉菌Oidum neolycopersici 商丘菌株的鉴定 | 第22-31页 |
1 前言 | 第22页 |
2 材料与方法 | 第22-24页 |
·植物材料及其生长条件 | 第22页 |
·病原菌及其培养方法 | 第22页 |
·症状及病原菌形态特征观察 | 第22-23页 |
·病原菌致病性鉴定 | 第23页 |
·番茄抗性材料特异性分析 | 第23页 |
·品种抗病性评价 | 第23页 |
·病原菌分子生物学鉴定 | 第23-24页 |
·白粉菌DNA 的提取 | 第23页 |
·rDNA ITS 区的PCR 扩增 | 第23-24页 |
·rDNA ITS 序列分析 | 第24页 |
3 结果与分析 | 第24-29页 |
·番茄白粉病症状 | 第24-25页 |
·番茄白粉菌形态特征 | 第25页 |
·番茄病原菌致病性鉴定 | 第25页 |
·番茄抗性材料特异性分析 | 第25-26页 |
·番茄品种的抗病性评价 | 第26页 |
·rDNA ITS 区的扩增和测序 | 第26-28页 |
·ITS 同源序列比对和系统进化树的构建 | 第28页 |
·其它植物白粉菌的形态学和分子生物学鉴定 | 第28-29页 |
4 讨论 | 第29-30页 |
5 小结 | 第30-31页 |
第三章 番茄与白粉菌互作的细胞学及生理生化分析 | 第31-42页 |
1 前言 | 第31-32页 |
2 材料和方法 | 第32-33页 |
·植物材料与病原菌 | 第32页 |
·活性氧的检测方法 | 第32页 |
·核黄素处理方法 | 第32页 |
·番茄白粉菌病情调查 | 第32页 |
·O_2-产生速率的测定 | 第32-33页 |
·MDA 含量测定 | 第33页 |
·POD 酶活测定 | 第33页 |
·PAL 酶活测定 | 第33页 |
·蛋白质浓度的测定 | 第33页 |
3 结果与分析 | 第33-39页 |
·番茄与白粉菌互作活性氧积累的分析 | 第33-35页 |
·非亲和互作中活性氧的积累 | 第33-34页 |
·亲和互作中活性氧的积累 | 第34-35页 |
·核黄素诱导番茄与白粉菌互作的生理生化分析 | 第35-39页 |
·核黄素诱导番茄对白粉菌的抗性 | 第35-36页 |
·核黄素对诱导番茄叶片累积 H_2O_2的影响 | 第36-37页 |
·核黄素对诱导番茄叶片 O_2-产生速率的影响 | 第37页 |
·核黄素对诱导番茄叶片MDA 含量影响 | 第37-38页 |
·核黄素对诱导番茄叶片POD 活性影响 | 第38-39页 |
·核黄素对诱导番茄叶片PAL 活性的影响 | 第39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
·番茄与白粉菌互作活性氧积累 | 第39页 |
·核黄素诱导的番茄系统抗病性 | 第39-41页 |
5 小结 | 第41-42页 |
第四章 番茄白粉病抗性反应关键基因的鉴定及功能验证 | 第42-69页 |
1 前言 | 第42-43页 |
2 材料与方法 | 第43-48页 |
·植物材料及其生长条件 | 第43页 |
·病原菌及其接种方法 | 第43-44页 |
·TRV-LIC 载体 | 第44页 |
·RNA 的提取、cDNA 合成和RT-PCR | 第44-45页 |
·TRV2-LIC 重组载体的构建 | 第45页 |
·TRV2-LIC 重组载体的鉴定 | 第45-46页 |
·农杆菌侵染和植株生长 | 第46页 |
·组织显微形态学分析 | 第46-47页 |
·半定量RT-PCR 分析 | 第47页 |
·基因全长测序 | 第47-48页 |
3 结果与分析 | 第48-64页 |
·目的基因的克隆 | 第48-53页 |
·PDS 基因片段的克隆 | 第48页 |
·抗病候选基因的克隆 | 第48-53页 |
·TRV2-LIC 重组载体的构建与鉴定 | 第53页 |
·VIGS 表型观察 | 第53-55页 |
·PDS 基因沉默表型观察 | 第53-54页 |
·抗病候选基因沉默表型观察 | 第54-55页 |
·VIGS 沉默植株显微形态及活性氧积累的分析 | 第55-57页 |
·VIGS 沉默后RT-PCR 检测 | 第57-58页 |
·A8 序列对应基因的全长 | 第58-61页 |
·C1 序列对应基因的全长 | 第61页 |
·B6 序列对应基因的全长 | 第61-64页 |
4 讨论 | 第64-68页 |
·VIGS 体系的建立 | 第64页 |
·番茄白粉病抗性反应的关键基因 | 第64-65页 |
·抗病反应关键基因ShGSTU1 | 第64-65页 |
·抗病反应关键基因ShME1 | 第65页 |
·抗病反应关键基因ShMADSTF | 第65页 |
·抗病反应关键基因ShORR-1 | 第65页 |
·番茄白粉病抗性反应关键基因的全长获得 | 第65-66页 |
·沉默植株表现慢性过敏反应 | 第66页 |
·番茄白粉病抗性反应机理初步分析 | 第66-67页 |
·后续工作 | 第67-68页 |
5 小结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-79页 |
Abstract | 第79-81页 |
附录 | 第81页 |