| 致谢 | 第1-15页 |
| 摘要 | 第15-19页 |
| Abstract | 第19-24页 |
| 前言 | 第24-26页 |
| 第一章 昆虫先天免疫及其研究进展 | 第26-43页 |
| 1 引言 | 第26-28页 |
| 2 物理防御 | 第28-29页 |
| 3 非我识别 | 第29-31页 |
| ·病原物关联的模式分子 | 第29页 |
| ·模式识别受体介导的非我识别 | 第29-31页 |
| 4 体液免疫 | 第31-36页 |
| ·抗菌肽合成 | 第31-33页 |
| ·原酚氧化酶级联系统与血淋巴蛋白酶 | 第33-36页 |
| 5 细胞免疫 | 第36-42页 |
| ·吞噬反应 | 第37-38页 |
| ·凝集反应 | 第38-39页 |
| ·结节形成与包囊反应 | 第39-42页 |
| 6 小结与展望 | 第42-43页 |
| 第二章 寄生蜂调控寄主先天免疫反应的研究进展 | 第43-50页 |
| 1 引言 | 第43页 |
| 2 对寄主体液免疫反应的影响 | 第43-46页 |
| ·对proPO激活的影响 | 第44-45页 |
| ·对抗菌肽诱导合成的影响 | 第45-46页 |
| 3 对寄主细胞免疫反应的影响 | 第46-49页 |
| ·对血细胞的影响 | 第46-47页 |
| ·对包囊反应的影响 | 第47-49页 |
| 4 小结与展望 | 第49-50页 |
| 第三章 毒液对菜粉蝶蛹期免疫相关基因表达的抑制作用 | 第50-81页 |
| 1 引言 | 第50-52页 |
| 2 材料与方法 | 第52-61页 |
| ·供试昆虫饲养 | 第52页 |
| ·粗毒液制备 | 第52页 |
| ·活体包囊反应测定 | 第52-53页 |
| ·样品制备与总RNA分离 | 第53-54页 |
| ·抑制性消减杂交文库构建及其ESTs序列测定 | 第54-58页 |
| ·半定量reverse transcription-PCR(RT-PCR) | 第58-60页 |
| ·酶活性检测 | 第60-61页 |
| ·统计分析 | 第61页 |
| 3 结果与讨论 | 第61-81页 |
| ·蝶蛹金小蜂毒液对菜粉蝶蛹包囊反应的抑制作用 | 第61-62页 |
| ·血细胞与脂肪体正向差异显示cDNA文库构建 | 第62-73页 |
| ·菜粉蝶蛹免疫应答相关基因 | 第73-77页 |
| ·体液免疫相关基因 | 第73-75页 |
| ·非我识别及细胞免疫相关基因 | 第75-77页 |
| ·菜粉蝶蛹蛋白质翻译与合成相关基因 | 第77页 |
| ·菜粉蝶蛹解毒代谢及应激反应相关基因 | 第77-78页 |
| ·半定量RT-PCR及酶活性测定结果 | 第78-81页 |
| 第四章 毒液对菜粉蝶蛹期天蚕素与溶菌酶基因表达的抑制作用 | 第81-112页 |
| 1 引言 | 第81-82页 |
| 2 材料与方法 | 第82-91页 |
| ·供试昆虫饲养 | 第82页 |
| ·粗毒液制备 | 第82页 |
| ·寄生与免疫诱导及血淋巴提取 | 第82页 |
| ·抗菌活性测定 | 第82-83页 |
| ·ESTs克隆获得与序列分析 | 第83页 |
| ·表达模式检测 | 第83-86页 |
| ·免疫诱导与抑制 | 第83-84页 |
| ·时间效应 | 第84-85页 |
| ·组织分布 | 第85-86页 |
| ·RNA干扰 | 第86-88页 |
| ·Double strand RNA合成 | 第86-87页 |
| ·dsRNA注射 | 第87-88页 |
| ·rq-rtPCR检测 | 第88页 |
| ·RNA干扰后抗菌活性检测 | 第88页 |
| ·毒液作用的时间与剂量效应检测 | 第88-89页 |
| ·时间效应 | 第88-89页 |
| ·剂量效应 | 第89页 |
| ·原核重组表达及活性检测 | 第89-91页 |
| ·Pr-cec与P-lys的重组表达与蛋白纯化 | 第89-90页 |
| ·重组表达产物活性测定 | 第90-91页 |
| ·重组表达产物影响出蜂率的研究 | 第91页 |
| ·统计分析 | 第91页 |
| 3 结果 | 第91-106页 |
| ·不同处理对菜粉蝶蛹血浆抗菌活性的诱导与抑制 | 第91-92页 |
| ·Pr-cec全长cDNA筛选及其序列分析 | 第92页 |
| ·Pr-lys全长cDNA筛选及其序列分析 | 第92-93页 |
| ·免疫诱导对Pr-cec和Pr-lys基因转录的影响 | 第93-94页 |
| ·免疫诱导后Pr-cec和Pr-lys基因转录的组织特异性 | 第94页 |
| ·Pr-cec和Pr-lys基因功能验证 | 第94-103页 |
| ·毒液抑制Pr-cec和Pr-lys基因转录的时间与剂量效应 | 第103-104页 |
| ·Pr-cec和Pr-lys基因表达及其产物对出蜂率的影响 | 第104-106页 |
| 4 讨论 | 第106-112页 |
| 第五章 毒液对菜粉蝶蛹期原酚氧化酶级联反应的负调机制 | 第112-153页 |
| 1 引言 | 第112-113页 |
| 2 材料与方法 | 第113-124页 |
| ·供试昆虫饲养 | 第113页 |
| ·粗毒液制备 | 第113-114页 |
| ·原酚氧化酶的活体激活 | 第114-115页 |
| ·酚氧化酶活性测定 | 第115页 |
| ·全长cDNA序列克隆 | 第115-117页 |
| ·编码菜粉蝶PAP1的全长cDNA | 第115-116页 |
| ·编码菜粉蝶PAP2的全长cDNA | 第116页 |
| ·编码菜粉蝶proPO亚基的全长cDNA | 第116-117页 |
| ·序列拼接与分析 | 第117页 |
| ·原核表达与抗体制备 | 第117-118页 |
| ·基因表达模式检测 | 第118-121页 |
| ·免疫诱导与抑制 | 第118-119页 |
| ·时间效应 | 第119-120页 |
| ·组织分布 | 第120-121页 |
| ·RNA干扰 | 第121-122页 |
| ·dsRNA合成 | 第121页 |
| ·dsRNA注射 | 第121页 |
| ·rq-rtPCR检测 | 第121页 |
| ·Western blotting检测 | 第121-122页 |
| ·RNA干扰后PO活性检测 | 第122页 |
| ·毒液作用的时间与剂量效应检测 | 第122-123页 |
| ·时间效应 | 第122-123页 |
| ·剂量效应 | 第123页 |
| ·包囊体黑化程度测定 | 第123-124页 |
| ·统计分析 | 第124页 |
| 3 结果 | 第124-133页 |
| ·不同处理对菜粉蝶蛹血浆PO活性的诱导与抑制 | 第124-125页 |
| ·Pr-PAP1全长cDNA克隆及其序列分析 | 第125-126页 |
| ·Pr-PAP2全长cDNA克隆及其序列分析 | 第126-128页 |
| ·Pr-PPO sub1全长cDNA克隆及其序列分析 | 第128页 |
| ·Pr-PAP1、Pr-PAP2及Pr-PPO sub1重组表达与抗体制备 | 第128-129页 |
| ·免疫诱导对基因转录与表达的影响 | 第129-130页 |
| ·诱导时间对基因转录与表达的影响 | 第130页 |
| ·诱导后基因转录与表达的组织特异性 | 第130-131页 |
| ·Pr-PAP1、Pr-PAP2和Pr-PPO sub1基因功能验证 | 第131-132页 |
| ·毒液抑制基因转录的时间剂量效应 | 第132-133页 |
| ·毒液对包囊体黑化的抑制作用 | 第133页 |
| 4 讨论 | 第133-153页 |
| 第六章 毒液对菜粉蝶蛹期清道夫受体基因表达的抑制作用 | 第153-184页 |
| 1 引言 | 第153-154页 |
| 2 材料与方法 | 第154-163页 |
| ·供试昆虫饲养 | 第154页 |
| ·粗毒液制备 | 第154页 |
| ·不同处理后血淋巴提取 | 第154-155页 |
| ·离体吞噬能力测定 | 第155页 |
| ·全长cDNA序列克隆 | 第155-156页 |
| ·序列拼接与分析 | 第156页 |
| ·原核表达与抗体制备 | 第156-157页 |
| ·基因表达模式检测 | 第157-159页 |
| ·免疫诱导与抑制 | 第157-158页 |
| ·时间效应 | 第158页 |
| ·组织分布 | 第158-159页 |
| ·基因表达产物的亚细胞定位 | 第159-160页 |
| ·RNA干扰 | 第160-161页 |
| ·dsRNA合成 | 第160页 |
| ·dsRNA注射 | 第160页 |
| ·相对定量Real time PCR检测 | 第160页 |
| ·Western blotting检测 | 第160-161页 |
| ·RNA干扰后离体吞噬能力测定 | 第161页 |
| ·RNA干扰后离体包囊能力测定 | 第161页 |
| ·毒液作用的时间与剂量效应检测 | 第161-162页 |
| ·时间效应 | 第161-162页 |
| ·剂量效应 | 第162页 |
| ·统计分析 | 第162-163页 |
| 3 结果 | 第163-177页 |
| ·不同处理对菜粉蝶蛹血细胞吞噬能力的诱导与抑制 | 第163页 |
| ·Pr-SR全长cDNA克隆及其序列分析 | 第163-164页 |
| ·Pr-SR的重组表达与抗体制备 | 第164页 |
| ·免疫诱导对Pr-SR基因转录与表达的影响 | 第164-165页 |
| ·诱导时间对Pr-SR基因转录与表达的影响 | 第165-168页 |
| ·诱导后Pr-SR基因转录与表达的组织特异性 | 第168-170页 |
| ·毒液处理对Pr-SR在血细胞中表达模式的影响 | 第170-171页 |
| ·Pr-SR基因功能验证 | 第171-174页 |
| ·毒液抑制Pr-SR基因转录的时间剂量效应 | 第174-177页 |
| 4 讨论 | 第177-184页 |
| 第七章 毒液对菜粉蝶蛹期C型凝集素基因表达的抑制作用 | 第184-213页 |
| 1 引言 | 第184-185页 |
| 2 材料与方法 | 第185-192页 |
| ·供试昆虫饲养 | 第185页 |
| ·粗毒液制备 | 第185页 |
| ·全长cDNA序列克隆 | 第185-186页 |
| ·序列拼接与分析 | 第186页 |
| ·原核表达与抗体制备 | 第186-187页 |
| ·基因表达模式检测 | 第187-189页 |
| ·免疫诱导与抑制 | 第187页 |
| ·时间效应 | 第187-188页 |
| ·组织分布 | 第188-189页 |
| ·基因表达产物的亚细胞定位 | 第189页 |
| ·时间动态 | 第189页 |
| ·毒液处理后的亚细胞定位 | 第189页 |
| ·RNA干扰 | 第189-191页 |
| ·dsRNA合成 | 第189页 |
| ·dsRNA注射 | 第189-190页 |
| ·rq-rtPCR检测 | 第190页 |
| ·Western blotting检测 | 第190页 |
| ·RNA干扰后离体吞噬能力测定 | 第190-191页 |
| ·RNA干扰后离体包囊能力测定 | 第191页 |
| ·RNA干扰后抗菌活性测定 | 第191页 |
| ·RNA干扰后离体PO测定 | 第191页 |
| ·毒液作用的时间与剂量效应检测 | 第191-192页 |
| ·时间效应 | 第191-192页 |
| ·剂量效应 | 第192页 |
| ·统计分析 | 第192页 |
| 3 结果 | 第192-206页 |
| ·Pr-CTL全长cDNA克隆及其序列分析 | 第192-193页 |
| ·Pr-CTL重组表达与抗体制备 | 第193-197页 |
| ·免疫诱导对Pr-CTL基因转录与表达的影响 | 第197-198页 |
| ·诱导时间对Pr-CTL基因转录与表达的影响 | 第198-199页 |
| ·诱导后Pr-CTL基因转录与表达的组织特异性 | 第199页 |
| ·Pr-CTL在血细胞中的定位及毒液处理对其影响 | 第199-200页 |
| ·Pr-CTL基因功能验证 | 第200-201页 |
| ·毒液抑制Pr-CTL基因转录的时间剂量效应 | 第201-206页 |
| 4 讨论 | 第206-213页 |
| 第八章 总讨论 | 第213-219页 |
| 1 昆虫先天免疫 | 第213-214页 |
| 2 寄生蜂对寄主先天免疫的调控作用 | 第214-215页 |
| 3 蝶蛹金小蜂毒液调控菜粉蝶蛹期先天免疫的模式 | 第215-218页 |
| 4 本研究创新之处 | 第218页 |
| 5 本研究存在的问题与不足 | 第218页 |
| 6 今后的研究方向 | 第218-219页 |
| 参考文献 | 第219-240页 |
| 作者简历 | 第240-242页 |
