| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-42页 |
| ·引言 | 第14-15页 |
| ·天然产物药物的组合生物合成及异源合成 | 第15-21页 |
| ·天然产物药物的组合生物合成 | 第15-19页 |
| ·天然产物药物的异源合成 | 第19-21页 |
| ·异源合成之于组合生物合成的意义 | 第21页 |
| ·抗肿瘤抗生素C-1027的研究进展 | 第21-28页 |
| ·C-1027的结构 | 第21-23页 |
| ·C-1027的生物活性及作用机制 | 第23-24页 |
| ·C-1027的化学合成 | 第24-25页 |
| ·C-1027生物合成 | 第25-28页 |
| ·C-1027的开发利用前景 | 第28页 |
| ·抗肿瘤抗生素iso-migrastatin的研究进展 | 第28-38页 |
| ·Migrastatin族抗生素 | 第29页 |
| ·Migrastatin族抗生素的结构 | 第29-31页 |
| ·Migrastatin族抗生素的生物合成 | 第31-34页 |
| ·Migrastatin族抗生素的化学合成 | 第34-36页 |
| ·Migrastatin族抗生素的生物活性 | 第36-37页 |
| ·Migrastatin族抗生素抑制肿瘤细胞转移的机制 | 第37-38页 |
| ·Migrastatin族抗生素的开发应用前景 | 第38页 |
| ·本工作的研究基本思路及拟研究内容 | 第38-42页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第42-52页 |
| ·菌株和质粒 | 第42-43页 |
| ·C-1027实验菌株和质粒 | 第42-43页 |
| ·iso-MGS实验菌株 | 第43页 |
| ·仪器与试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器 | 第43-44页 |
| ·主要试剂 | 第44页 |
| ·培养基和培养条件 | 第44-47页 |
| ·去甲基C-1027的培养基和培养条件 | 第44-46页 |
| ·iso-MGS的培养基和培养条件 | 第46-47页 |
| ·实验及分析检测方法 | 第47-52页 |
| ·pH值测定 | 第47-48页 |
| ·细胞干重的测定 | 第48页 |
| ·还原糖及总糖的测定 | 第48页 |
| ·SDS-PAGE蛋白电泳 | 第48页 |
| ·C-1027及去甲基C-1027分离及检测方法 | 第48-50页 |
| ·iso-MGS定量检测方法 | 第50-52页 |
| 第三章 产去甲基C-1027工程菌的构建 | 第52-62页 |
| ·引言 | 第52-53页 |
| ·材料和方法 | 第53-55页 |
| ·菌株和质粒 | 第53-54页 |
| ·培养基和培养条件 | 第54页 |
| ·工具酶及主要试剂 | 第54页 |
| ·基本的DNA及其他基因工程实验操作 | 第54页 |
| ·S.globisporus C-1027和E.coli的属间接合转移 | 第54-55页 |
| ·载体pBS1052及sgcD4基因阻断株obisporus S1052的构建 | 第55页 |
| ·载体pBS1053及sgcD4基因补全株S.globisporus S1053的构建 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-59页 |
| ·sgcD4基因阻断株S.globisporus SB1052的构建 | 第56-57页 |
| ·sgcD4基因补全株S.globisporus S1053的构建 | 第57页 |
| ·S.globisporus SB1052和S1053发醇产物的检验 | 第57-59页 |
| ·小结 | 第59-62页 |
| 第四章 产去甲基C-1027工程菌的优化生产 | 第62-72页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·材料和方法 | 第62-63页 |
| ·菌种及培养方法 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62-63页 |
| ·主要实验设备 | 第63页 |
| ·分析检测方法 | 第63页 |
| ·结果和讨论 | 第63-71页 |
| ·去甲基C-1027生物检测标准曲线的建立 | 第63-64页 |
| ·基因工程菌SB1052产去甲基C-1027的培养条件优化 | 第64-71页 |
| ·优化条件下去甲基C-1027的放大发酵及初步分离 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第五章 iso-MGS异源生物合成的优化生产 | 第72-90页 |
| ·引言 | 第72-73页 |
| ·材料与方法 | 第73-74页 |
| ·菌种及培养方法 | 第73-74页 |
| ·试剂 | 第74页 |
| ·主要实验设备 | 第74页 |
| ·iso-MGS分离及检测方法 | 第74页 |
| ·结果与讨论 | 第74-87页 |
| ·培养基及宿主菌的初步比较与筛选 | 第74-75页 |
| ·发酵培养基中碳源的选择与优化 | 第75-78页 |
| ·培养条件的确定 | 第78-80页 |
| ·培养基中氮源的选择与优化 | 第80-82页 |
| ·优化小结 | 第82-83页 |
| ·混合培养基的探索 | 第83-85页 |
| ·推测前体的添加对iso-MGS产量的影响 | 第85-87页 |
| ·小结 | 第87-90页 |
| 第六章 iso-MGS异源生物合成的qRT-PCR研究 | 第90-108页 |
| ·引言 | 第90-93页 |
| ·材料与方法 | 第93-101页 |
| ·qRT-PCR实验材料和实验仪器 | 第93-95页 |
| ·qRT-PCR实验中所用引物 | 第95-97页 |
| ·qRT-PCR实验方法 | 第97-101页 |
| ·结果与讨论 | 第101-107页 |
| ·生长曲线 | 第101-103页 |
| ·定量RT-PCR实验 | 第103-107页 |
| ·小结 | 第107-108页 |
| 第七章 结论与展望 | 第108-112页 |
| ·结论 | 第109-110页 |
| ·展望 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-122页 |
| 作者简历 | 第122-123页 |
