摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第11-19页 |
1.1 生物防治的现状 | 第11页 |
1.2 植物根际促生菌 | 第11-12页 |
1.3 荧光性假单胞菌的生物防治概述 | 第12-14页 |
1.3.1 荧光性假单胞菌特征 | 第12页 |
1.3.2 荧光性假单胞菌的生防机制 | 第12-13页 |
1.3.3 荧光性假单胞菌的应用研究现状 | 第13-14页 |
1.4 荧光性假单胞菌产环脂肽类抗生素的研究现状概述 | 第14-17页 |
1.4.1 问题的提出 | 第14页 |
1.4.2 荧光性假单胞菌产环脂肽类抗生素的研究现状概述 | 第14-17页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第17-19页 |
第2章 产抗生性次级代谢产物的荧光性假单胞菌的筛选 | 第19-29页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 材料及仪器 | 第19-21页 |
2.2.1 土壤样品 | 第19页 |
2.2.2 实验菌株 | 第19页 |
2.2.3 培养基 | 第19-20页 |
2.2.4 引物 | 第20-21页 |
2.2.5 其他试剂 | 第21页 |
2.2.6 实验仪器 | 第21页 |
2.3 方法 | 第21-24页 |
2.3.1 稀释涂布法 | 第21页 |
2.3.2 平板划线分离法 | 第21-22页 |
2.3.3 扩增核糖体DNA限制性分析 | 第22-24页 |
2.3.4 平板对峙法 | 第24页 |
2.4 结果与分析 | 第24-27页 |
2.4.1 荧光性假单胞菌的分离 | 第24-25页 |
2.4.2 ARDRA分类结果 | 第25-26页 |
2.4.3 LMA-2、SXM-13、SXM-19和EG-42的抑菌实验结果 | 第26-27页 |
2.5 小结及讨论 | 第27-29页 |
第3章 LMA-2、SXM-13、SXM-19和EG-42菌种鉴定 | 第29-39页 |
3.1 引言 | 第29页 |
3.2 材料及仪器 | 第29-31页 |
3.2.1 实验材料 | 第29页 |
3.2.2 培养基 | 第29页 |
3.2.3 工具酶、试剂盒 | 第29页 |
3.2.4 TSS所需试剂 | 第29-30页 |
3.2.5 DNA提取试剂 | 第30页 |
3.2.6 引物 | 第30页 |
3.2.7 实验仪器 | 第30-31页 |
3.3 方法 | 第31-34页 |
3.3.1 16S rDNA基因克隆及序列分析 | 第31-33页 |
3.3.2 磷脂肪酸鉴定 | 第33页 |
3.3.3 环境扫描电镜观察荧光性假单胞菌株形态实验步骤 | 第33-34页 |
3.4 结果与分析 | 第34-38页 |
3.4.1 LMA-2菌种鉴定结果 | 第34-35页 |
3.4.2 SXM-13菌种鉴定结果 | 第35-36页 |
3.4.3 SXM-19菌种鉴定结果 | 第36-37页 |
3.4.4 QZ-42菌株鉴定结果 | 第37-38页 |
3.5 小结及讨论 | 第38-39页 |
第4章 LMA-2、SXM-13、SXM-19、EG-42产抗生性次级代谢产物的相关基因克隆及HCN和几丁质酶的检测 | 第39-49页 |
4.1 引言 | 第39页 |
4.2 材料 | 第39-41页 |
4.2.1 实验材料 | 第39页 |
4.2.2 培养基 | 第39-40页 |
4.2.3 工具酶、试剂盒 | 第40页 |
4.2.4 DNA提取试剂 | 第40页 |
4.2.5 引物 | 第40-41页 |
4.2.6 实验仪器 | 第41页 |
4.3 方法 | 第41-45页 |
4.3.1 聚合酶链式反应 | 第41-44页 |
4.3.2 几丁质平板法 | 第44页 |
4.3.3 HCN的检测 | 第44-45页 |
4.4 结果与分析 | 第45-47页 |
4.4.1 荧光性假单胞菌phlD合成相关基因的克隆 | 第45页 |
4.4.2 荧光性假单胞菌产环脂肽相关基因的C1、Te区克隆 | 第45-47页 |
4.4.3 几丁质酶水解几丁质 | 第47页 |
4.5 小结和讨论 | 第47-49页 |
第5章 恶臭假单胞菌SXM-19产环脂肽的鉴定、分离、纯化及其活性的初步研究 | 第49-61页 |
5.1 引言 | 第49页 |
5.2 材料 | 第49-50页 |
5.2.1 实验材料 | 第49页 |
5.2.2 培养基 | 第49-50页 |
5.2.3 其它试剂 | 第50页 |
5.2.4 实验仪器 | 第50页 |
5.3 方法 | 第50-55页 |
5.3.1 排油圈法 | 第50-51页 |
5.3.2 表面/界面张力仪 | 第51页 |
5.3.3 环脂肽的提取 | 第51页 |
5.3.4 薄层色谱 | 第51-52页 |
5.3.5 SephadexG-25纯化环脂肽物质 | 第52-53页 |
5.3.6 ESI-MS | 第53页 |
5.3.7 MTT法检测环脂肽抑制肿瘤细胞活性 | 第53-55页 |
5.4 结果与分析 | 第55-58页 |
5.4.1 LMA-2,SXM-13,SXM-19和QZ-42排油圈结果 | 第55页 |
5.4.2 表面张力的测定 | 第55页 |
5.4.3 SXM-19表面活性剂的TLC | 第55-56页 |
5.4.4 SephadexG-25纯化环脂肽的层析图谱 | 第56-57页 |
5.4.5 ESI-MS结果 | 第57页 |
5.4.6 MTT | 第57-58页 |
5.5 小结及讨论 | 第58-61页 |
第6章 讨论和展望 | 第61-63页 |
6.1 讨论 | 第61页 |
6.2 展望 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第75页 |