| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语/符号说明 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 研究现状、成果 | 第13-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-17页 |
| 第一部分 血必净对脂多糖诱导大鼠调节性T细胞免疫功能的影响 | 第17-35页 |
| 1.1 实验对象 | 第17-20页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第17页 |
| 1.1.2 实验分组 | 第17页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第17-19页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第19-20页 |
| 1.1.5 相关试剂、液体的配制 | 第20页 |
| 1.2 实验方法 | 第20-27页 |
| 1.2.1 大鼠脾脏单个核细胞的分离 | 第20-21页 |
| 1.2.1.1 取脾脏 | 第20-21页 |
| 1.2.1.2 分离细胞 | 第21页 |
| 1.2.1.3 单个核细胞计数 | 第21页 |
| 1.2.2 MACS磁珠阳选提取调节性T细胞(Treg) | 第21-23页 |
| 1.2.2.1 实验技术原理 | 第21-22页 |
| 1.2.2.2 阳选收集CD25~+T细胞 | 第22页 |
| 1.2.2.3 阳选收集CD4~+CD25~+Treg细胞 | 第22-23页 |
| 1.2.2.4 台盼蓝排斥实验测定细胞活性 | 第23页 |
| 1.2.3 Treg细胞相关指标检测 | 第23-24页 |
| 1.2.3.1 流式细胞术测Treg细胞纯度 | 第23页 |
| 1.2.3.2 Treg细胞表面标志物CTLA-4及转录因子Foxp3的检测 | 第23-24页 |
| 1.2.4 酶联免疫吸附法(ELISA)测细胞因子IL-10、TGF-β的浓度 | 第24-25页 |
| 1.2.4.1 实验技术原理 | 第24页 |
| 1.2.4.2 前期准备及操作步骤 | 第24-25页 |
| 1.2.5 MACS磁珠提取效应性T细胞(Teff) | 第25-26页 |
| 1.2.5.1 分选CD4~+CD25~-Teff细胞 | 第25页 |
| 1.2.5.2 CD4~+CD25~-Teff细胞浓度测定 | 第25-26页 |
| 1.2.6 CFSE法检测调节性T细胞对效应性T细胞免疫抑制实验 | 第26页 |
| 1.2.7 共培养测细胞上清液细胞因子 | 第26页 |
| 1.2.8 统计学处理 | 第26-27页 |
| 1.3 实验结果 | 第27-32页 |
| 1.3.1 CD4~+CD25~+Treg细胞纯度与活性 | 第27页 |
| 1.3.2 CD4~+CD25~+Treg细胞表面标志物CTLA-4及转录因子Foxp3的检测 | 第27-28页 |
| 1.3.3 CD4~+CD25~+Treg细胞上清液中IL-10、TGF-β的浓度 | 第28-29页 |
| 1.3.4 CD4~+CD25~-Teff细胞纯度与活性 | 第29页 |
| 1.3.5 CD4~+CD25~+Treg细胞对CD4~+CD25~-Teff细胞增殖的影响 | 第29-31页 |
| 1.3.6 Treg与Teff共培养上清液细胞因子含量 | 第31-32页 |
| 1.3.6.1 共培养上清中IL-2水平 | 第31页 |
| 1.3.6.2 共培养上清中IFN-γ/IL-4 | 第31-32页 |
| 1.4 讨论 | 第32-34页 |
| 1.5 小结 | 第34-35页 |
| 第二部分 血必净对脂多糖诱导大鼠调节性T细胞代谢水平的影响 | 第35-44页 |
| 2.1 实验对象 | 第36-38页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第36页 |
| 2.1.2 实验分组 | 第36页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第36-37页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第37页 |
| 2.1.5 相关试剂、液体配制 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-39页 |
| 2.2.1 Treg细胞膜蛋白GLUT1及线粒体外膜蛋白CPT-1的检测 | 第38-39页 |
| 2.3 实验结果 | 第39-41页 |
| 2.3.1 CD4~+CD25~+Treg细胞CPT-1及GLUT1的检测 | 第39页 |
| 2.3.2 CD4~+CD25~+Treg细胞活性氧(ROS)水平 | 第39-41页 |
| 2.3.3 Treg细胞活性氧(ROS)检测 | 第41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-43页 |
| 2.5 小结 | 第43-44页 |
| 第三部分 血必净对调节性T细胞免疫代谢AMPK信号通路的影响 | 第44-60页 |
| 3.1 实验对象 | 第44-49页 |
| 3.1.1 动物来源 | 第44页 |
| 3.1.2 实验分组 | 第44页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第44-46页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第46-47页 |
| 3.1.5 相关试剂、液体配制 | 第47-49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-50页 |
| 3.2.1 Treg细胞免疫功能 | 第49页 |
| 3.2.2 Treg细胞代谢方面 | 第49页 |
| 3.2.3 Westernblot | 第49页 |
| 3.2.3.1 样本制备 | 第49页 |
| 3.2.3.2 测定蛋白浓度 | 第49页 |
| 3.2.4 3SDS-PAGE电泳 | 第49-50页 |
| 3.2.5 统计学处理 | 第50页 |
| 3.3 实验结果 | 第50-58页 |
| 3.3.1 CD4~+CD25~+Treg细胞表面标志物CTLA-4及转录因子Foxp3的检测 | 第50-51页 |
| 3.3.2 CD4~+CD25~+Treg细胞上清中IL-10、TGF-β的浓度 | 第51-52页 |
| 3.3.3 CD4~+CD25~+Treg细胞对CD4~+CD25~-Teff细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
| 3.3.4 Treg与Teff共培养上清液细胞因子含量 | 第53-55页 |
| 3.3.4.1 共培养上清中IL-2水平 | 第53-54页 |
| 3.3.4.2 共培养上清中IFN-γ/IL-4 | 第54-55页 |
| 3.3.5 CD4~+CD25~+Treg细胞CPT-1及GLUT1的检测 | 第55-56页 |
| 3.3.6 CD4~+CD25~+Treg细胞活性氧(ROS)水平 | 第56-58页 |
| 3.3.7 Western Blot法检测Treg细胞p-AMPKα/AMPKα的表达 | 第58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-59页 |
| 3.5 小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第69-70页 |
| 综述 | 第70-90页 |
| 1.细胞代谢机制 | 第70-71页 |
| 2.能量代谢途径再编程对T细胞功能与分化的影响 | 第71-76页 |
| 3.cAMP是Treg介导的免疫抑制的关键性一环 | 第76-77页 |
| 4.T细胞关键代谢检查点 | 第77-80页 |
| 5.展望 | 第80-81页 |
| 综述参考文献 | 第81-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 个人简历 | 第91页 |
