| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩写和符号清单 | 第13-15页 |
| 文献综述 | 第15-25页 |
| 引言 | 第25-26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-39页 |
| 1.1 试验动物 | 第26-28页 |
| 1.2 实验材料与仪器设备 | 第28-30页 |
| 1.3 溶液配制 | 第30页 |
| 1.4 血液采集与处理 | 第30页 |
| 1.5 奶牛PMN的分离与培养 | 第30页 |
| 1.6 快速姬姆萨染色 | 第30-31页 |
| 1.7 试验分组及处理 | 第31页 |
| 1.8 最佳添加浓度和时间的确定 | 第31页 |
| 1.9 IKKβ激酶活性检测 | 第31页 |
| 1.10 ELISA法检测氧化抗氧化指标、炎性因子浓度变化 | 第31页 |
| 1.11 westernblot法测定TLR2、TLR4/NF-κB信号通路相关蛋白表达 | 第31-33页 |
| 1.11.1 细胞蛋白的提取 | 第31页 |
| 1.11.2 细胞蛋白的浓度检测 | 第31-32页 |
| 1.11.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第32-33页 |
| 1.12 qRT-PCR法测定TLR2/4-NF-κB信号通路关键因子mRNA的相对表达量 | 第33-34页 |
| 1.12.1 RNA提取 | 第33页 |
| 1.12.2 反转录 | 第33页 |
| 1.12.3 qRT-PCR扩增 | 第33页 |
| 1.12.4 引物设计合成 | 第33-34页 |
| 1.13 EMSA法检测NF-κBp65蛋白入核表达 | 第34-37页 |
| 1.13.1 核蛋白制备 | 第34-35页 |
| 1.13.2 蛋白定量 | 第35页 |
| 1.13.3 凝胶的配制 | 第35-36页 |
| 1.13.4 EMSA结合反应 | 第36页 |
| 1.13.5 电泳分析 | 第36页 |
| 1.13.6 电转膜 | 第36页 |
| 1.13.7 紫外交联 | 第36页 |
| 1.13.8 化学发光法检测生物素标记的探针 | 第36-37页 |
| 1.14 IF检测NF-κBp65的入核表达 | 第37页 |
| 1.15 ROS检测 | 第37页 |
| 1.16 数据处理 | 第37-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-56页 |
| 2.1 血清酮病、氧化抗氧化指标及炎性因子的浓度变化 | 第39-42页 |
| 2.1.1 酮病指标浓度变化 | 第39-40页 |
| 2.1.2 氧化抗氧化指标浓度变化 | 第40-41页 |
| 2.1.3 炎性因子的浓度变化 | 第41-42页 |
| 2.2 PMN分离与形态观察 | 第42页 |
| 2.3 ACAC最佳添加浓度和时间的筛选 | 第42-43页 |
| 2.4 IKKβ激酶活性 | 第43-44页 |
| 2.5 ACAC对TLR2/4-NF-κB信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响 | 第44-46页 |
| 2.6 NAC对TLR2/4-NF-κB信号通路相关蛋白及mRNA相对表达量的影响 | 第46-48页 |
| 2.7 ACAC对炎性因子蛋白及mRNA相对表达量的影响 | 第48-50页 |
| 2.8 NAC对炎性因子蛋白及mRNA相对表达的影响 | 第50-52页 |
| 2.9 ACAC及NAC对细胞上清中炎性因子浓度变化的影响 | 第52-53页 |
| 2.10 NF-κBp65入核表达 | 第53-55页 |
| 2.10.1 EMSA | 第53页 |
| 2.10.2 免疫荧光 | 第53-55页 |
| 2.11 ROS检测 | 第55-56页 |
| 3 讨论 | 第56-60页 |
| 3.1 酮病奶牛体内的氧化抗氧化状态 | 第56-57页 |
| 3.2 ACAC对TLR2/4-NF-κB信号通路的影响 | 第57页 |
| 3.3 氧化应激对TLR2/4-NF-κB信号通路的影响 | 第57-60页 |
| 4 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-75页 |
| 附录 | 第75-80页 |
| 作者简介 | 第80-81页 |
