中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
前言 | 第14-18页 |
参考文献 | 第15-18页 |
第一部分: 青藤碱抗BV-2细胞OGD/R炎性激活的作用分析 | 第18-44页 |
1 材料 | 第18-20页 |
1.1 主要仪器设备、试剂和材料 | 第18-20页 |
1.2 细胞来源 | 第20页 |
2 实验方法 | 第20-28页 |
2.1 细胞培养 | 第20页 |
2.2 青藤碱毒性测试 | 第20-21页 |
2.3 OGD/R模型建立 | 第21-22页 |
2.4 ELISA检测细胞上清TNF-α、IL-1β和IL-6含量 | 第22-23页 |
2.5 Real Time-PCR检测TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA相对含量 | 第23-25页 |
2.6 免疫印迹检测IκBα蛋白表达和p65、p50蛋白磷酸化 | 第25-28页 |
2.7 统计分析 | 第28页 |
3 实验结果 | 第28-32页 |
3.1 青藤碱安全剂量确定 | 第28-29页 |
3.2 细胞上清TNF-α、IL-1β和IL-6炎性因子含量检测 | 第29页 |
3.3 Real Time-PCR检测TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA含量 | 第29-31页 |
3.4 青藤碱预处理对p50、p65蛋白磷酸化以及IκBα蛋白表达的影响 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-38页 |
5 结论 | 第38页 |
参考文献 | 第38-44页 |
第二部分: 青藤碱抑制OGD/R后BV-2细胞NF-κB激活的机制研究 | 第44-90页 |
1 材料 | 第44-46页 |
1.1 主要仪器设备、试剂和材料 | 第44-46页 |
2 实验方法 | 第46-65页 |
2.1 青藤碱影响IκBα基因表达的调控层次分析 | 第46-51页 |
2.2 mmu-miR-183-5p对IκBα表达调控检测 | 第51-56页 |
2.3 核转录因子SP1调控miR-183-5p转录的机制分析 | 第56-64页 |
2.4 青藤碱通过SP1/miR-183-5p/IκBα炎性调控通路特异性分析 | 第64-65页 |
2.5 统计分析 | 第65页 |
3 实验结果 | 第65-82页 |
3.1 青藤碱对IκBα mRNA及蛋白表达影响检测 | 第65-69页 |
3.2 荧光素酶报告基因法验证mmu-miR-183-5p在IκBα基因3'UTR的结合位点 | 第69-73页 |
3.3 SP1结合miR-183-5p启动子调控其转录的作用分析 | 第73-82页 |
4 讨论 | 第82-86页 |
5 结论 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-90页 |
附录一: 文献综述 | 第90-100页 |
参考文献 | 第97-100页 |
附录二: 缩略词表 | 第100-101页 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第101-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
作者简介 | 第103页 |