| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第12-14页 |
| 中文部分 | 第14-93页 |
| 第一章 绪论 | 第14-17页 |
| 第二章 过表达miR-140-5p的滑膜间充质干细胞来源的外泌体预防骨关节炎 | 第17-61页 |
| 2.1 前言 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-34页 |
| 2.2.1 主要仪器与耗材 | 第18-20页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第20-23页 |
| 2.2.3 细胞分离培养 | 第23-24页 |
| 2.2.4 SMSC的三系分化能力鉴定 | 第24-26页 |
| 2.2.5 SMSC的表面标记鉴定 | 第26页 |
| 2.2.6 外泌体的分离提取 | 第26-27页 |
| 2.2.7 外泌体的动态光散射分析 | 第27页 |
| 2.2.8 外泌体的透射电子显微镜分析 | 第27-28页 |
| 2.2.9 从外泌体分离RNA和蛋白质 | 第28页 |
| 2.2.10 观察软骨细胞摄取外泌体 | 第28页 |
| 2.2.11 慢病毒转染 | 第28-29页 |
| 2.2.12 miR-140-5p的功能验证 | 第29页 |
| 2.2.13 实时定量聚合酶链反应(qPCR) | 第29-31页 |
| 2.2.14 免疫印迹(Western blot) | 第31-32页 |
| 2.2.15 miRNA芯片检测 | 第32页 |
| 2.2.16 免疫荧光分析 | 第32页 |
| 2.2.17 软骨细胞增殖实验 | 第32-33页 |
| 2.2.18 软骨细胞迁移 | 第33页 |
| 2.2.19 动物实验 | 第33-34页 |
| 2.2.20 组织学和免疫组化分析 | 第34页 |
| 2.2.21 统计分析 | 第34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-58页 |
| 2.3.1 SMSC的分离培养和鉴定 | 第34-36页 |
| 2.3.2 来自SMSC的外泌体的分离和鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3.3 外泌体能够被软骨细胞摄取 | 第37-38页 |
| 2.3.4 SMSC-Exos可以激活YAP、促进软骨细胞的增殖和迁移、减少软骨细胞的ECM分泌 | 第38-41页 |
| 2.3.5 SMSC-Exos通过Wnt5a和 Wnt5b激活YAP、促进软骨细胞的增殖和迁移、减少ECM分泌 | 第41-45页 |
| 2.3.6 SMSC-Exos通过激活YAP来发挥促进软骨细胞增殖和迁移、减少ECM分泌的功能 | 第45-49页 |
| 2.3.7 miR-140-5p维持软骨细胞的功能 | 第49-52页 |
| 2.3.8 SMSC-140-Exos促进软骨细胞的增殖和迁移,且不抑制ECM的分泌 | 第52-56页 |
| 2.3.9 SMSC-140-Exos可以用于预防OA | 第56-58页 |
| 2.3.10 机制总结 | 第58页 |
| 2.4 讨论 | 第58-60页 |
| 2.5 本章小结 | 第60-61页 |
| 第三章 低温聚合的壳聚糖水凝胶用于缓释过表达miR-126-3p的滑膜间充质干细胞来源的外泌体促进慢性创面修复 | 第61-91页 |
| 3.1 前言 | 第61-62页 |
| 3.2 实验方法 | 第62-71页 |
| 3.2.1 主要仪器与耗材 | 第62-64页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第64-67页 |
| 3.2.3 SMSC的分离培养 | 第67页 |
| 3.2.4 慢病毒转染 | 第67页 |
| 3.2.5 外泌体的分离提取与鉴定 | 第67页 |
| 3.2.6 制备装载外泌体的壳聚糖(CS)水凝胶 | 第67-68页 |
| 3.2.7 材料表征 | 第68页 |
| 3.2.8 释放曲线 | 第68页 |
| 3.2.9 从外泌体分离RNA和蛋白质 | 第68页 |
| 3.2.10 实时定量聚合酶链反应(qPCR) | 第68-69页 |
| 3.2.11 人皮肤微血管内皮细胞的培养 | 第69页 |
| 3.2.12 成纤维细胞的分离培养 | 第69页 |
| 3.2.13 细胞增殖实验 | 第69页 |
| 3.2.14 HMEC-1 迁移实验 | 第69-70页 |
| 3.2.15 HMEC-1 成管实验 | 第70页 |
| 3.2.16 大鼠慢性创面修复实验 | 第70页 |
| 3.2.17 组织学分析 | 第70-71页 |
| 3.2.18 Microfil灌注和μCT检测血供情况 | 第71页 |
| 3.2.19 统计分析 | 第71页 |
| 3.3 实验结果 | 第71-88页 |
| 3.3.1 SMSC和 SMSC-Exos的分离培养和鉴定 | 第71-75页 |
| 3.3.2 低温聚合的CS水凝胶的材料表征 | 第75-79页 |
| 3.3.3 低温聚合的CS水凝胶缓释SMSC-126-Exos | 第79-81页 |
| 3.3.4 体外实验证实SMSC-126-Exos促进HMEC-1和FBs的增殖 | 第81-83页 |
| 3.3.5 SMSC-126-Exos促进慢性创面愈合 | 第83-85页 |
| 3.3.6 使用μCT对创面血供进行评估 | 第85-86页 |
| 3.3.7 通过组织学方法对创面愈合情况进行分析 | 第86-88页 |
| 3.4 讨论 | 第88-90页 |
| 3.5 本章小结 | 第90-91页 |
| 第四章 结束语 | 第91-93页 |
| 4.1 主要工作与创新点 | 第91页 |
| 4.2 后续研究工作 | 第91-93页 |
| 英文部分 | 第93-173页 |
| Chapter One: Introduction | 第93-96页 |
| Chapter Two: Exosomes derived from mi R-140-5p-overexpressed synovium mesenchymal stem cells prevent osteoarthritis | 第96-140页 |
| Chapter Three: Low-temperature polymerized chitosan hydrogel provides sustained release of exosomes derived from mi R-126-3p-overexpressed synovium mesenchymal stem cells and promotes chronic wound repairing | 第140-171页 |
| Chapter Four: Conclusion | 第171-173页 |
| 参考文献 | 第173-183页 |
| 致谢 | 第183-185页 |
| 攻读博士学位期间已发表或录用的论文 | 第185-186页 |
