| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 中英文缩略词表 | 第17-19页 |
| 引言 | 第19-23页 |
| 第一部分 lncRNA PCA17在鼻咽癌中的表达及其对鼻咽癌细胞增殖的影响 | 第23-43页 |
| 1.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 1.1.1 临床组织标本 | 第24页 |
| 1.1.2 实验所用细胞 | 第24页 |
| 1.1.3 主要仪器及耗材 | 第24-25页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第25-26页 |
| 1.2 实验方法 | 第26-32页 |
| 1.2.1 细胞的复苏及培养 | 第26页 |
| 1.2.2 lncRNA PCAT7 siRNA转染细胞 | 第26-27页 |
| 1.2.3 组织及细胞总RNA提取 | 第27-28页 |
| 1.2.4 抽提的RNA进行变性琼脂糖电泳检测 | 第28页 |
| 1.2.5 RNA逆转录 | 第28页 |
| 1.2.6 实时荧光定量PCR反应(Real-time PCR) | 第28-29页 |
| 1.2.7 CCK-8检测细胞增殖 | 第29-30页 |
| 1.2.8 细胞克隆形成实验 | 第30页 |
| 1.2.9 鼻咽癌动物模型的建立 | 第30页 |
| 1.2.10 样本包埋与固定 | 第30-31页 |
| 1.2.11 免疫组织化学 | 第31-32页 |
| 1.2.12 统计学分析 | 第32页 |
| 1.3 结果 | 第32-40页 |
| 1.3.1 lncRNA PCAT7在鼻咽癌组织中表达上调 | 第32-34页 |
| 1.3.2 临床病理资料分析结果 | 第34-35页 |
| 1.3.3 lncRNA PCAT7在鼻咽癌细胞中表达上调 | 第35-36页 |
| 1.3.4 生存分析 | 第36页 |
| 1.3.5 siRNA对目的基因的靶向沉默 | 第36-37页 |
| 1.3.6 lncRNA PCAT7-siRNA干扰作用可抑制鼻咽癌细胞增殖和克隆形成 | 第37-38页 |
| 1.3.7 lncRNA PCAT7基因表达被干扰可抑制鼻咽癌小鼠模型肿瘤生长 | 第38-40页 |
| 1.3.8 lncRNA PCAT7基因沉默可抑制鼻咽癌小鼠模型肿瘤组织中Ki-67的表达 | 第40页 |
| 1.4 讨论 | 第40-43页 |
| 第二部分 lncRNA PCA17调控鼻咽癌细胞机制的初步研究 | 第43-71页 |
| 2.1 实验材料 | 第43-46页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第43-44页 |
| 2.1.2 主要仪器及耗材 | 第44-45页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第45-46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-58页 |
| 2.2.1 构建lncRNA PCAT7及ELF2真核表达载体 | 第46-49页 |
| 2.2.2 质粒提取 | 第49-50页 |
| 2.2.3 质粒转染 | 第50页 |
| 2.2.4 构建pciCHECK-2-PCAT7及pciCHECK-2-ELF2 3'UTR表达报告质粒 | 第50-52页 |
| 2.2.5 质粒与miRNA共转染 | 第52-53页 |
| 2.2.6 荧光素酶活性检测 | 第53页 |
| 2.2.7 RNA pull down实验 | 第53-55页 |
| 2.2.8 细胞蛋白质提取 | 第55-56页 |
| 2.2.9 蛋白浓度的测定 | 第56页 |
| 2.2.10 Western blot | 第56-58页 |
| 2.2.11 统计学处理 | 第58页 |
| 2.3 结果 | 第58-68页 |
| 2.3.1 miRDB生物信息学软件对lncRNA PCAT7的靶miRNA进行预测 | 第58-60页 |
| 2.3.2 在鼻咽癌组织中PCAT7表达与miR-134-5p表达呈负相关 | 第60-61页 |
| 2.3.3 在鼻咽癌细胞中PCAT7作为miR-134-5p的一种ceRNA | 第61-62页 |
| 2.3.4 PCAT7通过吸附miR-134-5p进而促进鼻咽癌细胞增殖 | 第62-63页 |
| 2.3.5 miR-134-5p在鼻咽癌组织中表达下调 | 第63页 |
| 2.3.6 ELF2是miR-134-5p的直接靶基因 | 第63-65页 |
| 2.3.7 ELF2是鼻咽癌组织中表达上调 | 第65-66页 |
| 2.3.8 miR-134-5p通过调控ELF2蛋白表达进而抑制鼻咽癌细胞增殖 | 第66-67页 |
| 2.3.9 lncRNA PCAT7通过吸附miR-134-5p调控ELF2表达进而促进鼻咽癌细胞增殖 | 第67-68页 |
| 2.4 讨论 | 第68-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 综述 鼻咽癌组织中的miRNAs的研究进展 | 第79-98页 |
| 参考文献 | 第89-98页 |
| 攻读博士期间发表论文及科研成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
