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长链非编码RNAPCAT7在鼻咽癌细胞中的功能及作用机制研究

中文摘要第10-13页
Abstract第13-16页
中英文缩略词表第17-19页
引言第19-23页
第一部分 lncRNA PCA17在鼻咽癌中的表达及其对鼻咽癌细胞增殖的影响第23-43页
    1.1 实验材料第24-26页
        1.1.1 临床组织标本第24页
        1.1.2 实验所用细胞第24页
        1.1.3 主要仪器及耗材第24-25页
        1.1.4 主要试剂第25-26页
    1.2 实验方法第26-32页
        1.2.1 细胞的复苏及培养第26页
        1.2.2 lncRNA PCAT7 siRNA转染细胞第26-27页
        1.2.3 组织及细胞总RNA提取第27-28页
        1.2.4 抽提的RNA进行变性琼脂糖电泳检测第28页
        1.2.5 RNA逆转录第28页
        1.2.6 实时荧光定量PCR反应(Real-time PCR)第28-29页
        1.2.7 CCK-8检测细胞增殖第29-30页
        1.2.8 细胞克隆形成实验第30页
        1.2.9 鼻咽癌动物模型的建立第30页
        1.2.10 样本包埋与固定第30-31页
        1.2.11 免疫组织化学第31-32页
        1.2.12 统计学分析第32页
    1.3 结果第32-40页
        1.3.1 lncRNA PCAT7在鼻咽癌组织中表达上调第32-34页
        1.3.2 临床病理资料分析结果第34-35页
        1.3.3 lncRNA PCAT7在鼻咽癌细胞中表达上调第35-36页
        1.3.4 生存分析第36页
        1.3.5 siRNA对目的基因的靶向沉默第36-37页
        1.3.6 lncRNA PCAT7-siRNA干扰作用可抑制鼻咽癌细胞增殖和克隆形成第37-38页
        1.3.7 lncRNA PCAT7基因表达被干扰可抑制鼻咽癌小鼠模型肿瘤生长第38-40页
        1.3.8 lncRNA PCAT7基因沉默可抑制鼻咽癌小鼠模型肿瘤组织中Ki-67的表达第40页
    1.4 讨论第40-43页
第二部分 lncRNA PCA17调控鼻咽癌细胞机制的初步研究第43-71页
    2.1 实验材料第43-46页
        2.1.1 菌株和质粒第43-44页
        2.1.2 主要仪器及耗材第44-45页
        2.1.3 主要试剂第45-46页
    2.2 实验方法第46-58页
        2.2.1 构建lncRNA PCAT7及ELF2真核表达载体第46-49页
        2.2.2 质粒提取第49-50页
        2.2.3 质粒转染第50页
        2.2.4 构建pciCHECK-2-PCAT7及pciCHECK-2-ELF2 3'UTR表达报告质粒第50-52页
        2.2.5 质粒与miRNA共转染第52-53页
        2.2.6 荧光素酶活性检测第53页
        2.2.7 RNA pull down实验第53-55页
        2.2.8 细胞蛋白质提取第55-56页
        2.2.9 蛋白浓度的测定第56页
        2.2.10 Western blot第56-58页
        2.2.11 统计学处理第58页
    2.3 结果第58-68页
        2.3.1 miRDB生物信息学软件对lncRNA PCAT7的靶miRNA进行预测第58-60页
        2.3.2 在鼻咽癌组织中PCAT7表达与miR-134-5p表达呈负相关第60-61页
        2.3.3 在鼻咽癌细胞中PCAT7作为miR-134-5p的一种ceRNA第61-62页
        2.3.4 PCAT7通过吸附miR-134-5p进而促进鼻咽癌细胞增殖第62-63页
        2.3.5 miR-134-5p在鼻咽癌组织中表达下调第63页
        2.3.6 ELF2是miR-134-5p的直接靶基因第63-65页
        2.3.7 ELF2是鼻咽癌组织中表达上调第65-66页
        2.3.8 miR-134-5p通过调控ELF2蛋白表达进而抑制鼻咽癌细胞增殖第66-67页
        2.3.9 lncRNA PCAT7通过吸附miR-134-5p调控ELF2表达进而促进鼻咽癌细胞增殖第67-68页
    2.4 讨论第68-71页
结论第71-72页
参考文献第72-79页
综述 鼻咽癌组织中的miRNAs的研究进展第79-98页
    参考文献第89-98页
攻读博士期间发表论文及科研成果第98-99页
致谢第99页

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