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核受体因子HR3和βFTZ-F1在飞蝗蜕皮发育中的功能研究

中文摘要第10-12页
ABSTRACT第12-14页
第一章 文献综述第15-21页
    1.1 昆虫表皮结构第15-16页
    1.2 蜕皮激素信号通路第16-18页
        1.2.1 HR3在昆虫蜕皮中的作用第16-17页
        1.2.2 FTZ-F1的功能研究进展第17-18页
    1.3 研究目的及意义第18-19页
    技术路线第19-21页
第二章 飞蝗核受体因子HR3和βFTZ-F1的克隆与表达分析第21-35页
    2.1 所用材料和试剂第21-22页
        2.1.1 实验昆虫第21页
        2.1.2 所用试剂第21-22页
        2.1.3 相关设备和仪器第22页
    2.2 实验方法第22-28页
        2.2.1 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1基因的获取和分子特性第22-23页
        2.2.2 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1基因结构和聚类分析第23页
        2.2.3 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1引物设计和模板制备第23-25页
        2.2.4 L_(m)HR3和L_(m)FTZ-F1的PCR扩增和胶回收第25页
        2.2.5 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1载体构建第25-26页
        2.2.6 L_(m)HR3和L_(m)FTZ-F1的菌液检测和测序、提取质粒第26-27页
        2.2.7 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1时期和组织的RT-qPCR第27-28页
        2.2.8 20 E诱导实验第28页
    2.3 结果分析第28-34页
        2.3.1 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1的分子特性第28-31页
        2.3.2 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1的组织和时期表达模式第31-33页
        2.3.3 L_(m)HR3和L_(m)βFTZ-F1响应20E诱导表达第33-34页
    2.4 讨论第34-35页
第三章 L_(m)HR3在飞蝗蜕皮中的功能分析第35-47页
    3.1 所用材料和试剂第35-36页
        3.1.1 实验昆虫第35页
        3.1.2 所用试剂第35-36页
        3.1.3 所用仪器第36页
    3.2 实验方法第36-40页
        3.2.1 L_(m)HR3的RNAi实验及取样第36-38页
        3.2.2 H&E和几丁质染色第38-39页
        3.2.3 透射电镜观察第39页
        3.2.4 L_(m)HR3对几丁质代谢相关基因的表达影响第39-40页
    3.3 结果分析第40-44页
        3.3.1 L_(m)HR3RNAi后表型观察及沉默效率检测第40页
        3.3.2 L_(m)HR3对表皮发育及结构的影响第40-41页
        3.3.3 L_(m)HR3对几丁质合成和降解相关基因表达的影响第41-42页
        3.3.4 L_(m)HR3对若虫之间转变的影响第42-44页
    3.4 讨论第44-47页
第四章 βFTZ-F1在飞蝗翅发育中的功能分析第47-55页
    4.1 所用材料和试剂第47-48页
        4.1.1 实验昆虫第47页
        4.1.2 实验试剂第47-48页
        4.1.3 所用仪器第48页
    4.2 实验方法第48-49页
        4.2.1 RNAi和表型观察第48页
        4.2.2 H&E染色第48-49页
        4.2.3 成虫前翅电镜观察第49页
    4.3 结果分析第49-52页
        4.3.1 βFTZ-F1的沉默效率检测和表型观察第49-50页
        4.3.2 5龄若虫翅芽的H&E染色第50页
        4.3.3 成虫的透射电镜观察第50-51页
        4.3.4 βFTZ-F1对若虫到若虫转变的影响第51-52页
    4.4 讨论第52-55页
第五章 5龄飞蝗翅芽转录组分析第55-69页
    5.1 所用材料和试剂第55-56页
        5.1.1 实验昆虫第55页
        5.1.2 实验试剂第55-56页
        5.1.3 所用仪器第56页
    5.2 实验方法第56-60页
        5.2.1 5龄翅芽的RNA样品提取和检测第56-57页
        5.2.2 对测序结果质量评估第57页
        5.2.3 Unigene的装配、功能注释和相关性评估第57-58页
        5.2.4 差异表达基因的筛选和分析第58-59页
        5.2.5 荧光定量PCR验证差异表达基因第59-60页
    5.3 结果分析第60-68页
        5.3.1 RNAi干扰和总RNA的提取及质量检测第60-61页
        5.3.2 测序结果质量评估分析第61页
        5.3.3 Unigene组装和注释结果统计和相关分析第61-64页
        5.3.4 数据库中差异表达基因筛查第64-67页
        5.3.5 RT-qPCR结果验证第67-68页
    5.4 讨论第68-69页
全文总结第69-71页
参考文献第71-76页
攻读学位期间取得的研究成果第76-77页
致谢第77-78页
个人简况及联系方式第78-81页

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