aldh和stpk基因敲除对明串珠菌产甘露醇的影响
| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 甘露醇的功能和应用 | 第10-11页 |
| 1.1.1 甘露醇的功能 | 第10页 |
| 1.1.2 甘露醇的应用 | 第10-11页 |
| 1.2 甘露醇的生产方法 | 第11-13页 |
| 1.2.1 植物提取法 | 第11-12页 |
| 1.2.2 化学合成法 | 第12页 |
| 1.2.3 生物合成法 | 第12-13页 |
| 1.3 明串珠菌概述 | 第13-15页 |
| 1.3.1 明串珠菌的简介 | 第13-14页 |
| 1.3.2 明串珠菌的代谢途径 | 第14-15页 |
| 1.4 研究的背景及内容 | 第15-16页 |
| 1.4.1 研究的背景 | 第15页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 aldh基因敲除对明串珠菌产甘露醇的影响 | 第16-50页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-21页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第16-17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 培养基 | 第17-20页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第20页 |
| 2.1.5 引物 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-34页 |
| 2.2.1 aldh基因克隆 | 第21-25页 |
| 2.2.2 中间载体pTA2-Tet的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.3 同源重组载体的构建 | 第26-29页 |
| 2.2.4 明串珠菌的转化 | 第29-31页 |
| 2.2.5 互补型突变菌株的构建 | 第31-32页 |
| 2.2.6 菌株发酵 | 第32-33页 |
| 2.2.7 生理特性检测 | 第33-34页 |
| 2.3 结果 | 第34-45页 |
| 2.3.1 乙醛脱氢酶基因aldh的克隆 | 第34-35页 |
| 2.3.2 中间载体pTA2-Tet的构建 | 第35-37页 |
| 2.3.3 同源重组载体的构建 | 第37-40页 |
| 2.3.4 同源重组载体的测序 | 第40页 |
| 2.3.5 突变菌株的PCR验证 | 第40-41页 |
| 2.3.6 互补型菌株的构建 | 第41-43页 |
| 2.3.7 生理特性检测 | 第43-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-49页 |
| 2.4.1 明串珠菌的电转化 | 第45页 |
| 2.4.2 同源重组 | 第45-46页 |
| 2.4.3 构建同源重组载体的影响因素 | 第46-47页 |
| 2.4.4 基因敲除对菌株代谢的影响 | 第47-49页 |
| 2.5 小结 | 第49-50页 |
| 第三章 stpk基因敲除对明串珠菌产甘露醇的影响 | 第50-70页 |
| 3.1 实验材料 | 第50-52页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第50-51页 |
| 3.1.2 引物 | 第51-52页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第52页 |
| 3.1.4 培养基 | 第52页 |
| 3.1.5 实验仪器 | 第52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-58页 |
| 3.2.1 stpk基因的克隆 | 第52-53页 |
| 3.2.2 同源重组载体的构建 | 第53-56页 |
| 3.2.3 明串珠菌的转化 | 第56-58页 |
| 3.2.4 菌株的发酵 | 第58页 |
| 3.3 实验结果 | 第58-66页 |
| 3.3.1 stpk基因的克隆 | 第58-60页 |
| 3.3.2 同源重组载体的构建 | 第60-62页 |
| 3.3.3 stpk基因敲除菌株的构建 | 第62-63页 |
| 3.3.4 突变菌株的PCR验证 | 第63页 |
| 3.3.5 菌株发酵与生理特性检测 | 第63-66页 |
| 3.4 讨论 | 第66-69页 |
| 3.4.1 明串珠菌的甘露醇合成 | 第66-67页 |
| 3.4.2 重叠延伸PCR | 第67页 |
| 3.4.3 α-淀粉酶基因 | 第67-68页 |
| 3.4.4 stpk基因的敲除对代谢的影响 | 第68-69页 |
| 3.5 小结 | 第69-70页 |
| 第四章 结论 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 附录 A | 第78-80页 |
| 附录 B | 第80-82页 |
| 攻读学位期间取得的相关科研成果 | 第82-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
