| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略词注释表 | 第13-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-23页 |
| 1.1 胃癌的简介 | 第15页 |
| 1.2 上皮间质转化(EMT)与肿瘤 | 第15-19页 |
| 1.2.1 EMT的概述 | 第15-16页 |
| 1.2.2 EMT的发生机制 | 第16-17页 |
| 1.2.3 EMT与肿瘤细胞的侵袭和转移 | 第17-18页 |
| 1.2.4 EMT与胃癌 | 第18-19页 |
| 1.3 SIRT6的研究现状 | 第19-23页 |
| 1.3.1 SIRT6简介及其在组织中的表达情况 | 第19-20页 |
| 1.3.2 SIRT6与疾病 | 第20-21页 |
| 1.3.3 SIRT6与肿瘤 | 第21-23页 |
| 第二章 实验研究的目的、方法、实验设计方案和意义 | 第23-27页 |
| 2.1 实验研究目的 | 第23页 |
| 2.2 实验研究方法 | 第23-24页 |
| 2.3 实验设计方案 | 第24-26页 |
| 2.3.1 SIRT6在胃癌组织和胃癌细胞系中表达情况的研究 | 第24-25页 |
| 2.3.2 RNAi抑制SIRT6表达后对胃癌细胞生物学特性影响的研究 | 第25-26页 |
| 2.3.3 体外上调SIRT6表达后对胃癌细胞增殖与转移的影响 | 第26页 |
| 2.4 研究意义 | 第26-27页 |
| 第三章 SIRT6在人胃癌组织及胃癌细胞系中的表达及临床意义 | 第27-45页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第27-32页 |
| 3.1.1 数据库分析 | 第27页 |
| 3.1.2 标本采集 | 第27-28页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.4 主要溶液配制 | 第29-31页 |
| 3.1.5 主要仪器和耗材 | 第31-32页 |
| 3.2 方法 | 第32-37页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第32-33页 |
| 3.2.2 总RNA提取 | 第33-34页 |
| 3.2.3 RNA逆转录 | 第34页 |
| 3.2.4 荧光定量PCR | 第34-35页 |
| 3.2.5 免疫组织化学 | 第35-36页 |
| 3.2.6 蛋白提取 | 第36页 |
| 3.2.7 Westernblot | 第36页 |
| 3.2.8 统计分析 | 第36-37页 |
| 3.3 结果 | 第37-42页 |
| 3.3.1 肿瘤数据库分析SIRT6在胃癌患者中的表达及其与患者生存率的关系 | 第37-39页 |
| 3.3.2 SIRT6在胃癌组织中的表达情况 | 第39-40页 |
| 3.3.3 胃癌患者中SIRT6的表达与临床病理因数相关性分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 SIRT6在人胃癌细胞系中的表达 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-45页 |
| 第四章 SIRT6过表达对胃癌细胞生物学特性的影响 | 第45-61页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第45-48页 |
| 4.1.1 细胞和质粒 | 第45页 |
| 4.1.2 主要仪器及耗材 | 第45-46页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第46-47页 |
| 4.1.4 主要溶液及配制 | 第47-48页 |
| 4.2 方法 | 第48-51页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第48页 |
| 4.2.2 蛋白提取 | 第48页 |
| 4.2.3 Westernblot | 第48页 |
| 4.2.4 SIRT6过表达标准质粒的构建 | 第48-49页 |
| 4.2.5 质粒转染 | 第49-50页 |
| 4.2.6 Transwell迁移试验 | 第50页 |
| 4.2.7 划痕愈合实验 | 第50页 |
| 4.2.8 平板克隆实验 | 第50-51页 |
| 4.2.9 CCK8细胞增殖实验 | 第51页 |
| 4.2.10 结果统计 | 第51页 |
| 4.3 主要结果 | 第51-58页 |
| 4.3.1 SIRT6过表达SGC-7901瞬时转染细胞株的建立 | 第51-52页 |
| 4.3.2 SIRT6体外过表达促进SGC-7901细胞的增殖 | 第52-53页 |
| 4.3.3 SIRT6过表达在体外促进胃癌细胞的迁移 | 第53-55页 |
| 4.3.4 SIRT6过表达在体外促进胃癌细胞EMT的发生 | 第55-56页 |
| 4.3.5 SIRT6过表达在体外促进胃癌细胞CSC特性 | 第56页 |
| 4.3.6 胃癌细胞中SIRT6过表达对SGC-7901细胞顺铂药物治疗敏感性的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.7 胃癌细胞中SIRT6过表达对TGFβ相关通路的影响 | 第57-58页 |
| 4.4 讨论 | 第58-61页 |
| 第五章 RNAi抑制SIRT6表达对胃癌细胞增殖和转移的影响 | 第61-73页 |
| 5.1 材料与仪器 | 第61-62页 |
| 5.1.1 主要试剂及配制 | 第61页 |
| 5.1.2 主要仪器及耗材 | 第61-62页 |
| 5.2 方法 | 第62-63页 |
| 5.2.1 细胞培养 | 第62页 |
| 5.2.2 蛋白提取 | 第62页 |
| 5.2.3 Westernblot | 第62页 |
| 5.2.4 Transwell迁移实验 | 第62页 |
| 5.2.5 划痕愈合实验 | 第62页 |
| 5.2.6 平板克隆形成实验 | 第62页 |
| 5.2.7 siRNA瞬时转染 | 第62-63页 |
| 5.2.8 统计学分析 | 第63页 |
| 5.3 结果 | 第63-70页 |
| 5.3.1 SIRT6干扰效果验证 | 第63-64页 |
| 5.3.2 SIRT6干扰抑制MGC-803细胞的增殖 | 第64-65页 |
| 5.3.3 SIRT6敲减抑制胃癌细胞MGC-803的迁移 | 第65-67页 |
| 5.3.4 SIRT6干扰抑制胃癌细胞EMT的发生 | 第67-68页 |
| 5.3.5 SIRT6干扰抑制胃癌细胞CSC特性 | 第68页 |
| 5.3.6 SIRT6抑制对胃癌细胞肿瘤顺铂反应性的影响 | 第68-69页 |
| 5.3.7 SIRT6沉默对胃癌细胞TGFβ相关通路的影响 | 第69-70页 |
| 5.4 讨论 | 第70-73页 |
| 结论与展望 | 第73-75页 |
| 一、结论 | 第73页 |
| 二、展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
