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ENH在PKA信号通路及血管重构中的作用研究

致谢第4-6页
中文摘要第6-8页
Abstract第8-9页
英文缩略词第10-14页
1 引言第14-17页
2 材料与试剂第17-25页
    2.1 主要仪器第17-18页
    2.2 主要试剂第18-20页
    2.3 小鼠、细胞、细菌及质粒第20-21页
    2.4 溶液及缓冲液配制第21-23页
    2.5 引物序列第23-25页
第一部分 研究ENH与ID、PKA之间的相互作用关系第25-55页
    1.1 实验方法第25-38页
        1.1.1 感受态细胞的制备第25-26页
        1.1.2 Flag-ID2质粒的构建第26-31页
        1.1.3 点突变质粒的构建第31-34页
        1.1.4 293T细胞的培养第34-35页
        1.1.5 细胞转染第35-36页
        1.1.6 细胞免疫共沉淀第36页
        1.1.7 免疫印迹第36-38页
    1.2 实验结果第38-53页
        1.2.1 ENH是PKA的底物第38-41页
        1.2.2 ENH与ID2相互作用第41-45页
        1.2.3 ID2能被PKA磷酸化第45-49页
        1.2.4 ENH能促进PKA磷酸化ID2第49页
        1.2.5 PKA的激活不影响ENH或ID2的核质穿梭第49-51页
        1.2.6 ENH与细胞转录因子STAT3相互作用第51-53页
    1.3 讨论第53-55页
第二部分 研究ENH在血管重构中的作用第55-72页
    2.1 实验方法第55-61页
        2.1.1 小鼠基因型鉴定第55页
        2.1.2 组织蛋白的提取第55-56页
        2.1.3 BCA法蛋白定量第56页
        2.1.4 血管石蜡切片第56-57页
        2.1.5 苏木素-伊红染色(H&E染色)第57-58页
        2.1.6 小鼠颈总动脉结扎术第58页
        2.1.7 冰冻切片第58-59页
        2.1.8 血管组织免疫荧光染色第59页
        2.1.9 ENH shRNA慢病毒包装第59-60页
        2.1.10 细胞免疫荧光染色第60页
        2.1.11 细胞RNA的提取第60-61页
        2.1.12 实时荧光定量PCR第61页
    2.2 实验结果第61-70页
        2.2.1 ENH敲除小鼠的鉴定第61-62页
        2.2.2 ENH敲除小鼠血管表现异常第62-64页
        2.2.3 ENH及ID2在血管新生内膜中表达升高第64页
        2.2.4 ENH缺失显著抑制由结扎引起的新生内膜的形成第64-67页
        2.2.5 ENH在内皮细胞及平滑肌细胞中的缺失能部分抑制新生内膜的形成第67-68页
        2.2.6 分化型平滑肌中ENH表达上调第68-69页
        2.2.7 ENH shRNA慢病毒的构建第69-70页
        2.2.8 ENH抑制了由PDGF-BB刺激引起的血管平滑肌细胞的迁移第70页
    2.3 讨论第70-72页
结论第72-73页
参考文献第73-78页
综述第78-90页
    参考文献第85-90页
作者简历及在读期间取得的科研成果第90页

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