| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1.1 病原真菌 | 第14-15页 |
| 1.2 新生隐球菌概述 | 第15-21页 |
| 1.2.1 新生隐球菌的分类 | 第15页 |
| 1.2.2 新生隐球菌的致病性及临床治疗 | 第15-18页 |
| 1.2.3 新生隐球菌毒力因子研究 | 第18-19页 |
| 1.2.4 新生隐球菌的有性生殖 | 第19-21页 |
| 1.3 致病真菌中毒力相关基因的研究现状 | 第21-24页 |
| 1.3.1 植物致病真菌中毒力相关基因的研究现状 | 第21-22页 |
| 1.3.2 人体致病真菌毒力相关基因的研究现状 | 第22-24页 |
| 1.4 新生隐球菌致病性相关基因研究策略 | 第24-26页 |
| 第二章 引言 | 第26-28页 |
| 2.1 研究背景 | 第26页 |
| 2.2 研究目的和意义 | 第26页 |
| 2.3 研究内容 | 第26-27页 |
| 2.4 技术路线 | 第27-28页 |
| 第三章 FRT1基因序列和表达模式分析 | 第28-50页 |
| 3.1 材料与方法 | 第28-41页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.2 实验仪器和试剂 | 第28-33页 |
| 3.1.3 实验方法 | 第33-41页 |
| 3.2 结果与分析 | 第41-48页 |
| 3.2.1 FRT1序列分析 | 第41-42页 |
| 3.2.2 PFRT1-mCherry载体构建 | 第42-43页 |
| 3.2.3 PFRT1-mCherry融合表达菌株构建 | 第43-44页 |
| 3.2.4 FRT1在隐球菌各个发育时期的表达情况 | 第44页 |
| 3.2.5 FRT1在交配早期的表达情况 | 第44-45页 |
| 3.2.6 Frt1-荧光蛋白融合表达载体构建 | 第45-47页 |
| 3.2.7 构建两种交配型的Frt1-mCherry、GFP-Frt1荧光菌株 | 第47页 |
| 3.2.8 Frt1亚细胞定位 | 第47-48页 |
| 3.3 结论与讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 FRT1基因敲除、互补和超表达菌株的构建 | 第50-62页 |
| 4.1 材料与方法 | 第50-57页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第50页 |
| 4.1.2 试剂与仪器 | 第50-52页 |
| 4.1.3 实验方法 | 第52-57页 |
| 4.2 结果与分析 | 第57-61页 |
| 4.2.1 α交配型基因敲除突变体构建 | 第57-59页 |
| 4.2.2 a交配型基因敲除突变体构建 | 第59页 |
| 4.2.3 互补载体构建 | 第59-60页 |
| 4.2.4 互补菌株构建 | 第60-61页 |
| 4.2.5 超表达菌株构建 | 第61页 |
| 4.3 结论与讨论 | 第61-62页 |
| 第五章 突变体表型分析 | 第62-76页 |
| 5.1 材料与方法 | 第62-66页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第62页 |
| 5.1.2 实验仪器与试剂 | 第62-64页 |
| 5.1.3 实验方法 | 第64-66页 |
| 5.2 结果与分析 | 第66-73页 |
| 5.2.1 经典毒力因子观察 | 第66-67页 |
| 5.2.2 应激条件下菌株表型检测 | 第67-68页 |
| 5.2.3 交配产孢观察 | 第68-69页 |
| 5.2.4 不产孢机理分析 | 第69-72页 |
| 5.2.5 致病性分析 | 第72-73页 |
| 5.3 结论与讨论 | 第73-76页 |
| 第六章 综合与讨论 | 第76-80页 |
| 6.1 FRT1基因生物信息学分析 | 第76页 |
| 6.2 FRT1时空表达分析 | 第76-77页 |
| 6.3 构建α、a两种交配型的frt1Δ突变体菌株和FRT1互补菌株 | 第77页 |
| 6.4 突变体表型分析 | 第77页 |
| 6.5 后续研究计划 | 第77-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 附录 | 第88-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
