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西瓜枯萎病菌蛋白质二硫键异构酶(PDI)家族基因在致病性中的功能研究

致谢第5-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
第一章 文献综述及研究背景第13-23页
    1.1 西瓜枯萎病概述第13-14页
        1.1.1 病害特征第13页
        1.1.2 病害菌以及病害循环第13-14页
        1.1.3 西瓜枯萎病病原菌生理小种分化第14页
    1.2 西瓜枯萎病菌侵染机制研究进展第14-18页
        1.2.1 致病相关基因第14-16页
        1.2.2 真菌毒素第16-17页
        1.2.3 胞外水解酶第17-18页
    1.3 PDI基因家族及其功能第18-21页
        1.3.1 PDI的结构特征与家族成员第19-20页
        1.3.2 PDI的生物学功能第20-21页
    1.4 本研究的目的意义与主要内容第21-23页
        1.4.1 研究的目的与意义第21页
        1.4.2 研究的主要内容第21-23页
第二章 材料与方法第23-37页
    2.1 实验材料第23页
        2.1.1 菌株第23页
        2.1.2 试供西瓜品种第23页
        2.1.3 生化试剂与实验耗材第23页
    2.2 实验方法第23-37页
        2.2.1 菌株的培养和保存第23页
        2.2.2 西瓜枯萎病菌基因组DNA小量提取第23-24页
        2.2.3 CTAB法提取西瓜枯萎病菌基因组DNA第24页
        2.2.4 PCR技术第24-25页
        2.2.5 DNA琼脂糖凝胶电泳第25-26页
        2.2.6 DNA克隆与载体构建第26-27页
        2.2.7 基因的敲除、回补与验证第27-28页
        2.2.8 PEG介导的西瓜枯萎病菌原生质体转化第28-29页
        2.2.9 DNA Southern blot分析第29-31页
        2.2.10 西瓜枯萎病菌RNA的提取第31-32页
        2.2.11 cDNA的合成第32页
        2.2.12 实时荧光定量PCR第32-33页
        2.2.13 西瓜枯萎病菌的生物学特性分析第33-34页
        2.2.14 西瓜枯萎病菌致病性测定第34-35页
        2.2.15 西瓜枯萎病菌的扫描电镜观察第35页
        2.2.16 西瓜枯萎病菌胞外酶活测定第35-37页
第三章 结果与分析第37-67页
    3.1 西瓜枯萎病菌PDI基因的鉴定及突变体的构建第37-45页
        3.1.1 西瓜枯萎病菌PDI基因的鉴定第37-42页
        3.1.2 突变体的构建第42-45页
    3.2 西瓜枯萎病菌PDIs的功能分析第45-67页
        3.2.1 PDIs基因缺失突变体的菌落形态第45-48页
        3.2.2 PDIs基因参与调控西瓜枯萎病菌的无性生殖第48-54页
        3.2.3 PDIs基因参与西瓜枯萎病菌响应环境胁迫第54-57页
        3.2.4 Fon00140和Fon08535基因参与西瓜枯萎病菌的致病性第57-62页
        3.2.5 Fo00140和Fo08535基因影响西瓜枯萎病菌的侵染能力和次级代谢物质的合成第62-65页
        3.2.6 Fon00140和Fon08535基因影响西瓜枯萎病菌的胞外酶第65-67页
第四章 讨论第67-69页
第五章 小结与展望第69-72页
    5.1 全文小结第69-70页
    5.2 后续工作展望第70-72页
参考文献第72-81页
附录 引物序列第81-84页

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