| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-23页 |
| 1 介体昆虫传播植物病毒的机制 | 第9-15页 |
| 1.1 传播方式 | 第9-10页 |
| 1.2 传播机制 | 第10-15页 |
| 2 刺吸式昆虫分泌唾液的组成和功能 | 第15-17页 |
| 3 RNAi干扰技术的研究及应用 | 第17-21页 |
| 3.1 RNAi干扰的定义 | 第17页 |
| 3.2 RNAi分子作用机制 | 第17-19页 |
| 3.3 dsRNA的导入方法 | 第19-20页 |
| 3.4 RNAi在昆虫学领域的应用 | 第20-21页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 带毒与不带毒灰飞虱唾液腺差异蛋白基因克隆和表达 | 第23-48页 |
| 1 材料与方法 | 第24-37页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第24页 |
| 1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 1.3 实验方法 | 第24-37页 |
| 1.3.1 灰飞虱无毒和有毒虫种群筛选 | 第24-25页 |
| 1.3.2 总RNA提取 | 第25页 |
| 1.3.3 cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
| 1.3.4 唾液腺差异蛋白基因的引物 | 第26-28页 |
| 1.3.5 基因中间片段扩增 | 第28-31页 |
| 1.3.6 cDNA 5’端快速扩增 | 第31-34页 |
| 1.3.7 cDNA 3’端快速扩增 | 第34-36页 |
| 1.3.8 沉默效应检测及数据统计方法 | 第36-37页 |
| 1.3.9 数据处理 | 第37页 |
| 2 结果与分析 | 第37-46页 |
| 2.1 带RSV的灰飞虱总RNA提取 | 第37页 |
| 2.2 灰飞虱苹灰果酸脱氢酶基因LsNADP基因 | 第37-40页 |
| 2.3 线粒体内膜移位酶LsMIT | 第40-42页 |
| 2.4 泛素-60s核糖体L40前体LsUBI | 第42-45页 |
| 2.5 唾液腺差异蛋白基因的相对表达量 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 带毒与不带毒灰飞虱唾液腺差异蛋白功能研究 | 第48-57页 |
| 1 实验材料 | 第48-53页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第48页 |
| 1.2 主要试剂 | 第48-49页 |
| 1.3 实验方法 | 第49-53页 |
| 1.3.1 总RNA提取 | 第49页 |
| 1.3.2 cDNA第一链的合成 | 第49页 |
| 1.3.3 dsRNA合成引物 | 第49-50页 |
| 1.3.4 PCR扩增 | 第50页 |
| 1.3.5 回收纯化 | 第50页 |
| 1.3.6 提取质粒并保存菌株 | 第50-51页 |
| 1.3.7 dsRNA合成 | 第51页 |
| 1.3.8 灰飞虱喂食dsRNA的试验方法 | 第51-52页 |
| 1.3.9 沉默效应检测及数据统计方法 | 第52页 |
| 1.3.10 干扰目标基基因对带毒灰飞虱的传毒率影响 | 第52-53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-55页 |
| 2.1 dsRNA的合成 | 第53页 |
| 2.2 用dsRNA喂食处理灰飞虱的死亡率 | 第53-54页 |
| 2.3 喂食dsRNA对靶标基因表达量的影响 | 第54页 |
| 2.4 dsRNA干扰对带毒灰飞虱传毒率的影响 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |