| 摘要 | 第3-6页 |
| abstract | 第6-9页 |
| 第1章 前言 | 第14-20页 |
| 1.1 概述 | 第14页 |
| 1.2 心肌肥大的产生及其信号传导通路 | 第14-15页 |
| 1.3 钙离子信号通路与心肌肥大 | 第15-16页 |
| 1.3.1 Calcineurin(CaN)/NFAT信号传导通路与心肌肥大 | 第15页 |
| 1.3.2 RyR2、FKBP12.6与心肌细胞Ca~(2+)释放 | 第15-16页 |
| 1.4 CD38与心肌肥大 | 第16-18页 |
| 1.4.1 CD38、NAD+与Sir1的关系 | 第16-17页 |
| 1.4.2 Sirt1与心肌肥大 | 第17-18页 |
| 1.5 性腺激素与心肌肥大 | 第18页 |
| 1.6 “下丘脑-腺垂体-性腺轴调节性别相关心肌肥大”假说 | 第18-20页 |
| 第2章 HPGs对FKBP12.6雄性小鼠心肌肥大的调控机制研究 | 第20-60页 |
| 2.1 引言 | 第20-22页 |
| 2.2 材料 | 第22-26页 |
| 2.2.1 小鼠 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞株及质粒 | 第22页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第22-24页 |
| 2.2.4 主要仪器和设备 | 第24-25页 |
| 2.2.5 主要试剂的配制 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-45页 |
| 2.3.1 组织与细胞蛋白提取与westernblot分析 | 第26-31页 |
| 2.3.2 小鼠血清性激素水平检测方法 | 第31-33页 |
| 2.3.3 细胞培养 | 第33-34页 |
| 2.3.4 FKBP12.6基因siRNA干扰实验 | 第34-38页 |
| 2.3.5 FKBP12.6shRNA质粒构建 | 第38-42页 |
| 2.3.6 LβT2细胞F12.6shRNA稳定细胞系的建立 | 第42-44页 |
| 2.3.7 流式细胞术检测心肌细胞内[Ca~(2+)]i含量的变化 | 第44页 |
| 2.3.8 统计 | 第44-45页 |
| 2.4 结果 | 第45-55页 |
| 2.4.1 FKBP12.6~(-/-)小鼠心脏中钙相关基因和性激素受体的表达变化 | 第45-48页 |
| 2.4.2 雄激素在雄性FKBP12.6敲除小鼠心肌肥大中的作用 | 第48-49页 |
| 2.4.3 FKBP12.6基因敲除小鼠性激素水平和繁殖能力的检测 | 第49-51页 |
| 2.4.4 确定FKBP12.6对下丘脑-腺垂体-性腺轴的调控部位。 | 第51-52页 |
| 2.4.5 FKBP12.6对LβT2细胞的调控作用及其机制 | 第52-55页 |
| 2.5 讨论 | 第55-59页 |
| 2.6 小结 | 第59-60页 |
| 第3章 CD38~(-/-)对下丘脑-腺垂体-性腺轴的调控机制研究 | 第60-71页 |
| 3.1 引言 | 第60-62页 |
| 3.2 材料 | 第62-63页 |
| 3.2.1 小鼠 | 第62页 |
| 3.2.2 细胞来源 | 第62页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第62页 |
| 3.2.4 实验主要仪器和设备 | 第62页 |
| 3.2.5 主要试剂的配制 | 第62-63页 |
| 3.3 实验方法 | 第63-65页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第63页 |
| 3.3.2 细胞蛋白提取和蛋白样品制备 | 第63页 |
| 3.3.3 CD38shRNA干扰质粒构建 | 第63-64页 |
| 3.3.4 细胞总RNA提取和cDNA逆转录 | 第64页 |
| 3.3.5 半定量PCR | 第64页 |
| 3.3.6 蛋白SDS-PAGE电泳、转膜、Westernblot方法 | 第64页 |
| 3.3.7 统计 | 第64-65页 |
| 3.4 结果 | 第65-69页 |
| 3.4.1 LβT2细胞和GT1-7中CD38的表达 | 第65-67页 |
| 3.4.2 CD38 对 GnRH1 蛋白前体合成的作用及其机制 | 第67-69页 |
| 3.5 讨论 | 第69-70页 |
| 3.6 小结 | 第70-71页 |
| 第4章 下丘脑特异性GnRH1过表达小鼠产生性别差异性心肌肥大 | 第71-99页 |
| 4.1 引言 | 第71-74页 |
| 4.2 材料 | 第74-76页 |
| 4.2.1 小鼠 | 第74页 |
| 4.2.2 质粒 | 第74页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第74-75页 |
| 4.2.4 实验主要仪器和设备 | 第75页 |
| 4.2.5 主要试剂的配制 | 第75-76页 |
| 4.3 实验方法 | 第76-90页 |
| 4.3.1 Tet-on可诱导性下丘脑特异性GnRH1质粒构建 | 第76-84页 |
| 4.3.2 细胞培养 | 第84页 |
| 4.3.3 Tet-on系统质粒显微注射 | 第84-86页 |
| 4.3.4 获得双阳性GnRH1TG小鼠和DOX诱导表达 | 第86页 |
| 4.3.5 GnRH1TG小鼠下丘脑中GnRH1的表达测定 | 第86-87页 |
| 4.3.6 ELISA法测定小鼠血清中GnRH1和FSH含量 | 第87-88页 |
| 4.3.7 GnRH1TG小鼠下丘脑组织和心脏组织蛋白的检测 | 第88页 |
| 4.3.8 小鼠超声心动图检测 | 第88-89页 |
| 4.3.9 统计 | 第89-90页 |
| 4.4 结果 | 第90-93页 |
| 4.4.1 Tet-on系统质粒在细胞水平的功能验证 | 第90页 |
| 4.4.2 GnRH1TG小鼠基因型鉴定结果。 | 第90-91页 |
| 4.4.3 GnRHTG小鼠GnRH1的表达和功能验证 | 第91-92页 |
| 4.4.4 GnRHTG小鼠中血清促性腺激素释放激素的检测 | 第92-93页 |
| 4.5 小鼠超声心动图检测 | 第93-95页 |
| 4.6 GnRHTG 小鼠心脏蛋白检测 | 第95-96页 |
| 4.7 讨论 | 第96-98页 |
| 4.8 小结 | 第98-99页 |
| 第5章 结论与展望 | 第99-100页 |
| 5.1 结论 | 第99页 |
| 5.2 展望 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-110页 |
| 附录 中英文对照表 | 第110-112页 |
| 综述 FKBP12.6：心肌细胞钙信号的调节因子 | 第112-121页 |
| 1.概述 | 第112页 |
| 2.FKBP12.6的发现、表达分布及其生理功能 | 第112-113页 |
| 3.FKBP12.6介导的免疫抑制作用 | 第113页 |
| 4.FKBP12.6对心肌肌质网RYR2的调节作用及其机制 | 第113-115页 |
| 5.FKBP12.6与心血管疾病的关系 | 第115-117页 |
| 5.1 FKBP12.6与心肌肥大 | 第115页 |
| 5.2 FKBP12.6与心律失常 | 第115-116页 |
| 5.3 FKBP12.6与心力衰竭 | 第116-117页 |
| 6.小结与展望 | 第117-118页 |
| 参考文献 | 第118-121页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第121页 |
