摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写一览表 | 第11-13页 |
第1章 引言 | 第13-20页 |
1.1 研究背景 | 第13-19页 |
1.1.1 细菌的程序性细胞死亡 | 第13-14页 |
1.1.2 毒素 | 第14页 |
1.1.3 细菌的群体感应现象 | 第14-15页 |
1.1.4 MAZEF系统和胞外死亡因子 | 第15-17页 |
1.1.5 谷氨酰胺合成酶(GS) | 第17-18页 |
1.1.6 谷氨酸脱氢酶(GDH) | 第18页 |
1.1.7 外膜孔蛋白(OMPC) | 第18页 |
1.1.8 羟自由基(·OH) | 第18-19页 |
1.2 研究目的及意义 | 第19页 |
1.3 研究内容与方法 | 第19-20页 |
第2章 EDF对大肠杆菌的作用机制的研究 | 第20-52页 |
2.1 材料和仪器 | 第20-25页 |
2.1.1 主要材料和试剂 | 第20页 |
2.1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
2.1.3 试剂配制 | 第21-25页 |
2.2 方法 | 第25-28页 |
2.2.1 亲和层析柱的制备 | 第25-26页 |
2.2.2 亲和层析 | 第26-28页 |
2.3 蛋白质分析 | 第28页 |
2.4 目的蛋白的提取与纯化 | 第28-34页 |
2.4.1 Omp C的分离纯化 | 第28-29页 |
2.4.2 GS的分离纯化 | 第29-31页 |
2.4.3 GDH的诱导表达纯化 | 第31-34页 |
2.5 EDF对GS和GDH酶活力的影响 | 第34-37页 |
2.5.1 GS合成酶活力 | 第34-35页 |
2.5.2 GDH酶活 | 第35-37页 |
2.6 结果 | 第37-50页 |
2.6.1 亲和层析 | 第37页 |
2.6.2 蛋白的质谱鉴定 | 第37-43页 |
2.6.3 Omp C的分离纯化 | 第43页 |
2.6.4 GS的分离纯化 | 第43-44页 |
2.6.5 GDH纯化跑胶验证 | 第44-46页 |
2.6.6 酶活力测定 | 第46-47页 |
2.6.7 Gly对GS酶活力的抑制 | 第47页 |
2.6.8 EDF及其突变体对GS合成酶活力的抑制 | 第47-49页 |
2.6.9 EDF 对 GDH 酶活的影响 | 第49-50页 |
2.7 讨论 | 第50-52页 |
第3章 EDF的清除自由基活性及其作用机制 | 第52-62页 |
3.1 材料和仪器 | 第52-53页 |
3.1.1 主要试剂 | 第52页 |
3.1.2 主要仪器 | 第52-53页 |
3.1.3 试剂配制 | 第53页 |
3.2 方法 | 第53-55页 |
3.2.1 DPPH自由基清除实验 | 第53页 |
3.2.2 超氧自由基清除实验 | 第53-54页 |
3.2.3 羟自由基清除实验 | 第54页 |
3.2.4 对羟自由基诱导的亚油酸氧化的保护作用 | 第54页 |
3.2.5 对羟自由基诱导蛋白质氧化的保护作用 | 第54-55页 |
3.2.6 对羟自由基诱导的DNA损伤的保护作用 | 第55页 |
3.2.7 EDF对杀菌型抗生素作用的研究 | 第55页 |
3.2.8 统计分析 | 第55页 |
3.3 结果 | 第55-60页 |
3.3.1 EDF对自由基的清除活性研究 | 第55-57页 |
3.3.2 EDF抵御羟自由基对脂质、蛋白质和DNA的氧化损伤作用 | 第57-59页 |
3.3.3 EDF清除自由基的关键氨基酸残基 | 第59-60页 |
3.3.4 EDF与杀菌型抗生素作用的研究 | 第60页 |
3.4 讨论 | 第60-62页 |
全文结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
硕士期间发表论文、专利目录及研究成果 | 第69页 |