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EDF的清除自由基活性和对大肠杆菌的作用机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩写一览表第11-13页
第1章 引言第13-20页
    1.1 研究背景第13-19页
        1.1.1 细菌的程序性细胞死亡第13-14页
        1.1.2 毒素第14页
        1.1.3 细菌的群体感应现象第14-15页
        1.1.4 MAZEF系统和胞外死亡因子第15-17页
        1.1.5 谷氨酰胺合成酶(GS)第17-18页
        1.1.6 谷氨酸脱氢酶(GDH)第18页
        1.1.7 外膜孔蛋白(OMPC)第18页
        1.1.8 羟自由基(·OH)第18-19页
    1.2 研究目的及意义第19页
    1.3 研究内容与方法第19-20页
第2章 EDF对大肠杆菌的作用机制的研究第20-52页
    2.1 材料和仪器第20-25页
        2.1.1 主要材料和试剂第20页
        2.1.2 主要仪器第20-21页
        2.1.3 试剂配制第21-25页
    2.2 方法第25-28页
        2.2.1 亲和层析柱的制备第25-26页
        2.2.2 亲和层析第26-28页
    2.3 蛋白质分析第28页
    2.4 目的蛋白的提取与纯化第28-34页
        2.4.1 Omp C的分离纯化第28-29页
        2.4.2 GS的分离纯化第29-31页
        2.4.3 GDH的诱导表达纯化第31-34页
    2.5 EDF对GS和GDH酶活力的影响第34-37页
        2.5.1 GS合成酶活力第34-35页
        2.5.2 GDH酶活第35-37页
    2.6 结果第37-50页
        2.6.1 亲和层析第37页
        2.6.2 蛋白的质谱鉴定第37-43页
        2.6.3 Omp C的分离纯化第43页
        2.6.4 GS的分离纯化第43-44页
        2.6.5 GDH纯化跑胶验证第44-46页
        2.6.6 酶活力测定第46-47页
        2.6.7 Gly对GS酶活力的抑制第47页
        2.6.8 EDF及其突变体对GS合成酶活力的抑制第47-49页
        2.6.9 EDF 对 GDH 酶活的影响第49-50页
    2.7 讨论第50-52页
第3章 EDF的清除自由基活性及其作用机制第52-62页
    3.1 材料和仪器第52-53页
        3.1.1 主要试剂第52页
        3.1.2 主要仪器第52-53页
        3.1.3 试剂配制第53页
    3.2 方法第53-55页
        3.2.1 DPPH自由基清除实验第53页
        3.2.2 超氧自由基清除实验第53-54页
        3.2.3 羟自由基清除实验第54页
        3.2.4 对羟自由基诱导的亚油酸氧化的保护作用第54页
        3.2.5 对羟自由基诱导蛋白质氧化的保护作用第54-55页
        3.2.6 对羟自由基诱导的DNA损伤的保护作用第55页
        3.2.7 EDF对杀菌型抗生素作用的研究第55页
        3.2.8 统计分析第55页
    3.3 结果第55-60页
        3.3.1 EDF对自由基的清除活性研究第55-57页
        3.3.2 EDF抵御羟自由基对脂质、蛋白质和DNA的氧化损伤作用第57-59页
        3.3.3 EDF清除自由基的关键氨基酸残基第59-60页
        3.3.4 EDF与杀菌型抗生素作用的研究第60页
    3.4 讨论第60-62页
全文结论第62-63页
参考文献第63-68页
致谢第68-69页
硕士期间发表论文、专利目录及研究成果第69页

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