摘要 | 第2-4页 |
Summary | 第4-5页 |
缩略词对照表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-21页 |
1 天祝白牦牛 | 第11-13页 |
1.1 白牦牛概述 | 第11页 |
1.2 牦牛品种 | 第11-12页 |
1.3 天祝白牦牛的特性 | 第12-13页 |
2 IGF-2 基因的研究进展 | 第13-16页 |
2.1 IGFs概述 | 第13页 |
2.2 IGF-2 结构与基因定位 | 第13-14页 |
2.3 IGF-2 与胚胎发育的关系 | 第14-15页 |
2.4 IGF-2 与骨骼、肌肉的关系 | 第15页 |
2.5 IGF-2 基因的多态性研究进展 | 第15-16页 |
3. RACE技术 | 第16-17页 |
3.1 RACE的原理 | 第16页 |
3.2 RACE技术的特点 | 第16页 |
3.3 RACE技术的应用 | 第16-17页 |
4 高分辨率溶解曲线 | 第17-19页 |
4.1 HRM的发展 | 第17页 |
4.2 HRM的原理 | 第17-18页 |
4.3 HRM的优点 | 第18页 |
4.4 高分辨率溶解曲线的应用 | 第18-19页 |
5.研究目的和意义 | 第19-21页 |
第二章 天祝白牦牛IGF-2 基因的cDNA克隆和组织表达 | 第21-38页 |
1 材料与方法 | 第21-30页 |
1.1 材料 | 第21页 |
1.2 试剂与仪器 | 第21页 |
1.3 方法 | 第21-30页 |
1.3.1 引物设计与合成 | 第21-22页 |
1.3.2 总RNA的提取 | 第22页 |
1.3.3 IGF-2 基因CDS区部分扩增 | 第22-25页 |
1.3.4 3’RACE | 第25-26页 |
1.3.5 5’RACE | 第26-29页 |
1.3.6 IGF-2 基因的生物信息学分析 | 第29-30页 |
2 结果 | 第30-35页 |
2.1 肝脏总RNA的检测结果 | 第30页 |
2.2 IGF-2 基因部分CDS区序列克隆结果 | 第30-31页 |
2.3 IGF-2 基因cDNA全序列结果 | 第31-35页 |
2.3.1 3'-RACE 5'-RACE结果 | 第31页 |
2.3.3 IGF-2 基因全长cDNA序列结果 | 第31页 |
2.3.4 IGF-2 基因同源性分析 | 第31-33页 |
2.3.5 编码蛋白质的理化性质分析 | 第33页 |
2.3.6 多序列比较 | 第33-34页 |
2.3.7 蛋白结二级结构构预测 | 第34页 |
2.3.8 蛋白三级结构预测 | 第34-35页 |
3 讨论 | 第35-38页 |
3.1 RCAE操作注意事项 | 第36页 |
3.2 关于IGF-2 基因cDNA全序列克隆的讨论 | 第36-38页 |
第三章 天祝白牦牛IGF-2 基因mRNA组织表达 | 第38-45页 |
1 材料 | 第38页 |
1.1 样品采集 | 第38页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第38页 |
2 方法 | 第38-40页 |
2.1 引物设计与合成 | 第38-39页 |
2.2 各组织总RNA的提取 | 第39页 |
2.3 cDNA的合成 | 第39页 |
2.4 引物检测 | 第39-40页 |
2.5 建立标准曲线 | 第40页 |
2.6 组织样品的Real-tine PCR | 第40页 |
3.结果 | 第40-43页 |
3.1 各组织总RNA检测 | 第41页 |
3.2 引物检测结果 | 第41页 |
3.3 标准曲线 | 第41-42页 |
3.4 IGF-2 基因的Real-time PCR | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
4.1 Real-time PCR操作注意事项 | 第43页 |
4.2 天祝白牦牛IGF-2 基因组织表达的讨论 | 第43-45页 |
第四章 天祝白牦牛IGF-2 基因多态性及其与生产性状的相关性分析 | 第45-53页 |
1 材料 | 第45页 |
1.1 试验对象 | 第45页 |
1.2 主要试剂与仪器 | 第45页 |
2 方法 | 第45-48页 |
2.1 提取血液基因组DNA | 第45页 |
2.2 构建DNA混合池 | 第45页 |
2.3 引物设计 | 第45-46页 |
2.4 PCR扩增 | 第46页 |
2.5 HRM基因分型 | 第46-48页 |
2.7 数据统计 | 第48页 |
3 结果 | 第48-50页 |
3.1 血样DNA检测 | 第48页 |
3.2 天祝白牦牛IGF-2 基因多态位点分析 | 第48-49页 |
3.3 多态位点与尺体性状的相关性 | 第49-50页 |
4.讨论 | 第50-53页 |
4.1 HRM操作注意事项 | 第50-51页 |
4.2 天祝白牦牛IGF-2 基因多态性及其与生产性状的相关性结果的讨论 | 第51-53页 |
第五章 结论 | 第53-54页 |
附录 | 第54-56页 |
所用试剂及试剂盒 | 第54页 |
所用仪器 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
导师简介 | 第64-65页 |
作者简介 | 第65-66页 |