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天祝白牦牛IGF-2基因的全长cDNA克隆、组织表达及生产性状相关性分析

摘要第2-4页
Summary第4-5页
缩略词对照表第10-11页
第一章 文献综述第11-21页
    1 天祝白牦牛第11-13页
        1.1 白牦牛概述第11页
        1.2 牦牛品种第11-12页
        1.3 天祝白牦牛的特性第12-13页
    2 IGF-2 基因的研究进展第13-16页
        2.1 IGFs概述第13页
        2.2 IGF-2 结构与基因定位第13-14页
        2.3 IGF-2 与胚胎发育的关系第14-15页
        2.4 IGF-2 与骨骼、肌肉的关系第15页
        2.5 IGF-2 基因的多态性研究进展第15-16页
    3. RACE技术第16-17页
        3.1 RACE的原理第16页
        3.2 RACE技术的特点第16页
        3.3 RACE技术的应用第16-17页
    4 高分辨率溶解曲线第17-19页
        4.1 HRM的发展第17页
        4.2 HRM的原理第17-18页
        4.3 HRM的优点第18页
        4.4 高分辨率溶解曲线的应用第18-19页
    5.研究目的和意义第19-21页
第二章 天祝白牦牛IGF-2 基因的cDNA克隆和组织表达第21-38页
    1 材料与方法第21-30页
        1.1 材料第21页
        1.2 试剂与仪器第21页
        1.3 方法第21-30页
            1.3.1 引物设计与合成第21-22页
            1.3.2 总RNA的提取第22页
            1.3.3 IGF-2 基因CDS区部分扩增第22-25页
            1.3.4 3’RACE第25-26页
            1.3.5 5’RACE第26-29页
            1.3.6 IGF-2 基因的生物信息学分析第29-30页
    2 结果第30-35页
        2.1 肝脏总RNA的检测结果第30页
        2.2 IGF-2 基因部分CDS区序列克隆结果第30-31页
        2.3 IGF-2 基因cDNA全序列结果第31-35页
            2.3.1 3'-RACE 5'-RACE结果第31页
            2.3.3 IGF-2 基因全长cDNA序列结果第31页
            2.3.4 IGF-2 基因同源性分析第31-33页
            2.3.5 编码蛋白质的理化性质分析第33页
            2.3.6 多序列比较第33-34页
            2.3.7 蛋白结二级结构构预测第34页
            2.3.8 蛋白三级结构预测第34-35页
    3 讨论第35-38页
        3.1 RCAE操作注意事项第36页
        3.2 关于IGF-2 基因cDNA全序列克隆的讨论第36-38页
第三章 天祝白牦牛IGF-2 基因mRNA组织表达第38-45页
    1 材料第38页
        1.1 样品采集第38页
        1.2 主要试剂和仪器第38页
    2 方法第38-40页
        2.1 引物设计与合成第38-39页
        2.2 各组织总RNA的提取第39页
        2.3 cDNA的合成第39页
        2.4 引物检测第39-40页
        2.5 建立标准曲线第40页
        2.6 组织样品的Real-tine PCR第40页
    3.结果第40-43页
        3.1 各组织总RNA检测第41页
        3.2 引物检测结果第41页
        3.3 标准曲线第41-42页
        3.4 IGF-2 基因的Real-time PCR第42-43页
    4 讨论第43-45页
        4.1 Real-time PCR操作注意事项第43页
        4.2 天祝白牦牛IGF-2 基因组织表达的讨论第43-45页
第四章 天祝白牦牛IGF-2 基因多态性及其与生产性状的相关性分析第45-53页
    1 材料第45页
        1.1 试验对象第45页
        1.2 主要试剂与仪器第45页
    2 方法第45-48页
        2.1 提取血液基因组DNA第45页
        2.2 构建DNA混合池第45页
        2.3 引物设计第45-46页
        2.4 PCR扩增第46页
        2.5 HRM基因分型第46-48页
        2.7 数据统计第48页
    3 结果第48-50页
        3.1 血样DNA检测第48页
        3.2 天祝白牦牛IGF-2 基因多态位点分析第48-49页
        3.3 多态位点与尺体性状的相关性第49-50页
    4.讨论第50-53页
        4.1 HRM操作注意事项第50-51页
        4.2 天祝白牦牛IGF-2 基因多态性及其与生产性状的相关性结果的讨论第51-53页
第五章 结论第53-54页
附录第54-56页
    所用试剂及试剂盒第54页
    所用仪器第54-56页
参考文献第56-63页
致谢第63-64页
导师简介第64-65页
作者简介第65-66页

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