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基于MIGS的水稻高效基因沉默体系建立及应用

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 绪论第11-21页
    1.1 研究背景第11-18页
        1.1.1 水稻功能基因研究概况第11-12页
        1.1.2 水稻淀粉合成代谢途径第12-15页
        1.1.3 RNAi相关研究第15-18页
    1.2 立题依据及意义第18-19页
    1.3 研究内容及技术路线第19-21页
        1.3.1 研究内容第19-20页
        1.3.2 技术路线第20-21页
第二章 材料与方法第21-29页
    2.1 实验材料第21页
        2.1.1 植物材料第21页
        2.1.2 菌株和载体第21页
    2.2 实验试剂第21页
    2.3 实验仪器第21-22页
    2.4 实验方法第22-29页
        2.4.1 大肠杆菌DH5α 感受态制备第22-23页
        2.4.2 根癌农杆菌感受态制备第23页
        2.4.3 质粒DNA的提取、酶切、连接和转化第23-25页
        2.4.4 MIGS-OsPDS表达载体构建第25-26页
        2.4.5 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化第26-27页
        2.4.6 水稻转基因再生植株鉴定第27-28页
        2.4.7 目标基因表达分析第28-29页
第三章 结果与分析第29-43页
    3.1 水稻MIGS-OsPDS载体的构建第29-31页
        3.1.1 OsPDS基因扩增及验证第29-30页
        3.1.2 MIGS-OsPDS载体构建第30-31页
    3.2 农杆菌介导的MIGS-OsPDS转化及分析第31-36页
        3.2.1 MIGS-OsPDS转基因阳性苗的获得第31-32页
        3.2.2 MIGS-OsPDS转基因水稻表型分析第32-35页
        3.2.3 MIGS-OsPDS转基因植株目标基因表达检测第35-36页
    3.3 水稻MIGS-OsROC5、MIGS-OsLAZY1载体构建及转化分析第36-38页
        3.3.1 MIGS-Os ROC5、MIGS-OsLAZY1转基因植株PCR阳性检测第36-37页
        3.3.2 MIGS-Os ROC5、MIGS-OsLZAY1转基因植株表型分析第37页
        3.3.3 MIGS-Os ROC5转基因植株目标基因表达检测第37-38页
    3.4 基于MIGS方法的双基因沉默第38-41页
        3.4.1 MIGS双基因沉默载体的构建及验证第39-40页
        3.4.2 MIGS双基因沉默水稻转基因植株表型分析第40-41页
    3.5 MIGS方法在水稻淀粉合成途径调控中的应用第41-43页
第四章 讨论第43-45页
第五章 结论第45-46页
参考文献第46-53页
附录:部分实验的详细步骤及试剂配方第53-58页
    附录1 水稻淀粉合成过程中关键酶及主要功能第53-55页
    附录2 主要缓冲液和培养基配方第55-57页
    附录3 引物序列第57-58页
致谢第58-59页
硕士学习期间取得的研究成果第59-60页

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