摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-21页 |
1.1 研究背景 | 第11-18页 |
1.1.1 水稻功能基因研究概况 | 第11-12页 |
1.1.2 水稻淀粉合成代谢途径 | 第12-15页 |
1.1.3 RNAi相关研究 | 第15-18页 |
1.2 立题依据及意义 | 第18-19页 |
1.3 研究内容及技术路线 | 第19-21页 |
1.3.1 研究内容 | 第19-20页 |
1.3.2 技术路线 | 第20-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-29页 |
2.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第21页 |
2.2 实验试剂 | 第21页 |
2.3 实验仪器 | 第21-22页 |
2.4 实验方法 | 第22-29页 |
2.4.1 大肠杆菌DH5α 感受态制备 | 第22-23页 |
2.4.2 根癌农杆菌感受态制备 | 第23页 |
2.4.3 质粒DNA的提取、酶切、连接和转化 | 第23-25页 |
2.4.4 MIGS-OsPDS表达载体构建 | 第25-26页 |
2.4.5 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第26-27页 |
2.4.6 水稻转基因再生植株鉴定 | 第27-28页 |
2.4.7 目标基因表达分析 | 第28-29页 |
第三章 结果与分析 | 第29-43页 |
3.1 水稻MIGS-OsPDS载体的构建 | 第29-31页 |
3.1.1 OsPDS基因扩增及验证 | 第29-30页 |
3.1.2 MIGS-OsPDS载体构建 | 第30-31页 |
3.2 农杆菌介导的MIGS-OsPDS转化及分析 | 第31-36页 |
3.2.1 MIGS-OsPDS转基因阳性苗的获得 | 第31-32页 |
3.2.2 MIGS-OsPDS转基因水稻表型分析 | 第32-35页 |
3.2.3 MIGS-OsPDS转基因植株目标基因表达检测 | 第35-36页 |
3.3 水稻MIGS-OsROC5、MIGS-OsLAZY1载体构建及转化分析 | 第36-38页 |
3.3.1 MIGS-Os ROC5、MIGS-OsLAZY1转基因植株PCR阳性检测 | 第36-37页 |
3.3.2 MIGS-Os ROC5、MIGS-OsLZAY1转基因植株表型分析 | 第37页 |
3.3.3 MIGS-Os ROC5转基因植株目标基因表达检测 | 第37-38页 |
3.4 基于MIGS方法的双基因沉默 | 第38-41页 |
3.4.1 MIGS双基因沉默载体的构建及验证 | 第39-40页 |
3.4.2 MIGS双基因沉默水稻转基因植株表型分析 | 第40-41页 |
3.5 MIGS方法在水稻淀粉合成途径调控中的应用 | 第41-43页 |
第四章 讨论 | 第43-45页 |
第五章 结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
附录:部分实验的详细步骤及试剂配方 | 第53-58页 |
附录1 水稻淀粉合成过程中关键酶及主要功能 | 第53-55页 |
附录2 主要缓冲液和培养基配方 | 第55-57页 |
附录3 引物序列 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
硕士学习期间取得的研究成果 | 第59-60页 |