摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略词表 | 第9-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-40页 |
1 研究意义 | 第15-17页 |
2 研究概况及趋势 | 第17-26页 |
·我国柑橘砧木研究现状 | 第17-18页 |
·我国柑橘砧木育种的发展趋势 | 第18-26页 |
·柑橘砧木资源发掘与引进筛选 | 第18-19页 |
·柑橘砧木种质创新与育种 | 第19-22页 |
·柑橘砧木-接穗互作的研究进展 | 第22-24页 |
·柑橘矮化砧木矮化的作用机制 | 第24-26页 |
3 rol基因功能研究进展 | 第26-29页 |
·rol基因的分类 | 第26-27页 |
·rol基因功能的功能研究 | 第27-28页 |
·rol基因的表达及调控 | 第28-29页 |
4 植物矮化机理研究进展 | 第29-37页 |
·矮化突变体的主要类型 | 第29-37页 |
·GA合成代谢相关的矮化突变体 | 第29-31页 |
·GA信号转导通路受阻相关的植物矮化突变体 | 第31-34页 |
·IAA相关的植物矮化突变体 | 第34-36页 |
·BR相关的植物矮化突变体 | 第36-37页 |
5 研究的内容 | 第37-39页 |
6 研究的技术路线 | 第39-40页 |
第二章 转rol ABC基因枳橙的分子鉴定 | 第40-56页 |
1 材料与方法 | 第40-47页 |
·材料 | 第40页 |
·试剂与仪器 | 第40-41页 |
·方法 | 第41-47页 |
·CTAB法提取转rol ABC基因枳橙总DNA | 第41-42页 |
·Trizol法提取转rol ABC基因枳橙总RNA | 第42页 |
·第一链cDNA的合成 | 第42-43页 |
·PCR,RT-PCR和semi-RT PCR鉴定 | 第43页 |
·实时荧光定量PCR标准品的制备 | 第43页 |
·标准曲线的建立与样品实时定量PCR | 第43-44页 |
·数据分析 | 第44页 |
·实时定量PCR数学运算公式 | 第44页 |
·Southem blot鉴定 | 第44-47页 |
2 结果分析 | 第47-53页 |
·转rol ABC基因枳橙PCR、RT-PCR分析 | 第47-48页 |
·转rol ABC基因枳橙Southern杂交 | 第48页 |
·转rol ABC基因枳橙实生后代PCR分析 | 第48-49页 |
·转rol ABC基因枳橙实生后代Semi-RT PCR分析 | 第49页 |
·荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第49-50页 |
·引物扩增特异性验证 | 第50-51页 |
·2~(-ΔΔCt)法计算rol ABC基因相对表达量的差异 | 第51-53页 |
3 讨论 | 第53-55页 |
·主要分子鉴定方法的特点及结果讨论 | 第53页 |
·荧光定量RT-PCR对rol基因在枳橙中转录表达的稳定性 | 第53-55页 |
4 结论 | 第55-56页 |
第三章 转rol ABC基因枳橙形态学特征与生理特性的变化 | 第56-76页 |
1 材料与方法 | 第56-62页 |
·材料 | 第56页 |
·试剂与仪器 | 第56-57页 |
·试剂 | 第56-57页 |
·仪器 | 第57页 |
·方法 | 第57-62页 |
·转rol ABC基因枳橙形态学观测 | 第57-58页 |
·转rol ABC基因枳橙生理特性观测 | 第58-62页 |
2 结果 | 第62-74页 |
·转rol ABC基因枳橙自根苗、嫁接苗形态学变化 | 第62-74页 |
·转rol ABC基因枳橙出现典型的rol基因性状 | 第62-65页 |
·转rol ABC基因枳橙开花、结果习性改变 | 第65-66页 |
·转rol ABC基因枳橙组织形态学观测 | 第66-68页 |
·转rol ABC基因枳橙实生T1代形态学变化 | 第68-71页 |
·转rol ABC基因枳橙叶绿素含量与光合特性 | 第71-73页 |
·转rol ABC基因枳橙SOD、POD和Pro测定 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-75页 |
4 小结 | 第75-76页 |
第四章 转rolABC基因枳橙对接穗品种生长、生理的影响 | 第76-92页 |
1 材料与方法 | 第76-77页 |
·材料 | 第76-77页 |
·方法 | 第77页 |
·叶绿素含量测定、光合作用测定、SOD酶活性测定、POD酶活性测定、游离脯氨酸含量测定 | 第77页 |
·接穗的生长特性测定 | 第77页 |
·砧木-接穗rol基因漂移检测 | 第77页 |
2 结果 | 第77-90页 |
·转rol ABC基因枳橙与接穗嫁接成活率 | 第77-78页 |
·转rol ABC基因枳橙对大红甜橙与沙田柚幼苗期生长特性的影响 | 第78-79页 |
·转rol ABC基因枳橙对大红甜橙与沙田柚生长曲线的影响 | 第79-81页 |
·转rol ABC基因枳橙对接穗品种幼年树光合特性的影响 | 第81-83页 |
·转rol ABC基因枳橙对接穗SOD酶活性的影响 | 第83-84页 |
·转rol ABC基因枳橙对接穗POD酶活性的影响 | 第84页 |
·转rol ABC基因枳橙对接穗游离脯氨酸含量的影响 | 第84-85页 |
·转rol ABC基因枳橙对成年树叶绿素含量与光合作用的影响 | 第85-87页 |
·转rol ABC基因枳橙对大红甜橙果实品质的影响 | 第87-88页 |
·转rol ABC基因枳橙实生后代对沙田柚生长影响 | 第88-89页 |
·rol基因转移检测 | 第89-90页 |
3 讨论 | 第90页 |
4 小结 | 第90-92页 |
第五章 转基因枳橙中rol ABC基因表达与矮化的关系 | 第92-113页 |
1 材料与方法 | 第92-95页 |
·材料 | 第92-93页 |
·rol ABC基因表达与矮化关系试验材料 | 第92-93页 |
·GA20oxl了基因表达与矮化关系试验材料 | 第93页 |
·方法 | 第93-95页 |
·rol ABC基因在枳橙7个组织中的qRT PCR分析 | 第93-94页 |
·转rol ABC基因枳橙生长特性调查 | 第94页 |
·GA_3的敏感性试验 | 第94页 |
·GA20oxl基因在积橙中的qRTPCR分析 | 第94页 |
·POD含量测定 | 第94页 |
·IAA、GA_1和GA_4的含量测定 | 第94-95页 |
2 结果分析 | 第95-109页 |
·转rol ABC基因枳橙生长变化特性 | 第95-96页 |
·rol A、rol B、rol C基因在三个转基因枳橙株系中的差异 | 第96-97页 |
·rol A、rol B和rol C基因之间的表达差异 | 第97-98页 |
·rol A、rol B、rol C基因在枳橙中七个不同组织中的表达差异 | 第98-99页 |
·rol基因在枳橙中不同采样时间的表达差异 | 第99-100页 |
·rol基因在枳橙中的空间表达差异 | 第100页 |
·rol基因表达与矮化性状形成的相关性 | 第100-104页 |
·温度对rol基因在枳橙中表达的影响 | 第104-105页 |
·转rol ABC基因枳橙中GA20ox 1基因表达的影响 | 第105-107页 |
·喷施GA_3对转rol ABC基因枳橙生长的影响 | 第107页 |
·转rol ABC基因枳橙幼芽激素含量测定 | 第107-109页 |
3 讨论 | 第109-111页 |
·rol基因表达与转基因枳橙矮化的关系 | 第109-110页 |
·GA20ox1基因表达与转rol ABC基因枳橙矮化的关系 | 第110-111页 |
4 小结 | 第111-113页 |
全文结论 | 第113-114页 |
论文创新点 | 第114-115页 |
下一步工作设想 | 第115-116页 |
参考文献 | 第116-125页 |
附图 | 第125-128页 |
致谢 | 第128-129页 |
个人简历 | 第129页 |
获奖情况 | 第129-130页 |
发表的文章 | 第130页 |
参与的科研项目 | 第130-131页 |
学术交流 | 第131页 |
科研成果 | 第131页 |