| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略词 | 第10-11页 |
| 前言(Introduction) | 第11-14页 |
| 材料与方法(Materials&Methods) | 第14-25页 |
| 1.材料 | 第14-17页 |
| 1.1 细胞及质粒 | 第14页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第14-15页 |
| 1.3 主要试剂 | 第15页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第15-17页 |
| 2.实验方法 | 第17-24页 |
| 2.1 实验分组 | 第17-18页 |
| 2.1.1 基于FRET技术在MIN6细胞中实时定量监测PKA变化时的实验分组 | 第17页 |
| 2.1.2 采用ELISA法检测MIN6细胞内没有添加ISO时胰岛素释放量的分组 | 第17-18页 |
| 2.1.3 采用ELISA法检测MIN6细胞内添加ISO后胰岛素释放量的分组 | 第18页 |
| 2.2 MIN6细胞换液、传代、冻存及复苏的方法 | 第18-19页 |
| 2.2.1 MIN6细胞的换液 | 第18页 |
| 2.2.2 MIN6细胞的传代 | 第18-19页 |
| 2.2.3 MIN6细胞的冻存 | 第19页 |
| 2.2.4 MIN6细胞的复苏 | 第19页 |
| 2.3 质粒的扩增与储备 | 第19-21页 |
| 2.3.1 制备DH-5α感受态细胞 | 第19-20页 |
| 2.3.2 转化 | 第20页 |
| 2.3.3 质粒的提取与储备 | 第20-21页 |
| 2.4 电穿孔转染法将质粒转入MIN6细胞 | 第21页 |
| 2.5 采用基于FRET的生物传感器技术在MIN6细胞中实时定量检测PKA | 第21-22页 |
| 2.5.1 FRET技术实时定量检测PKA的原理 | 第22页 |
| 2.5.2 观察MIN6细胞转染质粒AKR后PKA荧光生物传感器表达 | 第22页 |
| 2.5.3 基于FRET技术在不同浓度葡萄糖和GC干预下实时定量检测PKA | 第22页 |
| 2.6 ELISA法检测各组MIN6细胞胰岛素的释放量 | 第22-24页 |
| 2.6.1 采集MIN6细胞胰岛素样品 | 第22-23页 |
| 2.6.2 测定MIN6细胞上清中胰岛素 | 第23-24页 |
| 3.技术路线 | 第24页 |
| 4.统计学方法 | 第24-25页 |
| 结果(Results) | 第25-38页 |
| 1.MIN6细胞在培养中的一般形态 | 第25页 |
| 2.PKA荧光生物传感器质粒AKR表达的观察 | 第25-26页 |
| 3.基于FRET技术在MIN6细胞中实时定量检测不同浓度葡萄糖环境下不同浓度GC水平对PKA含量的影响 | 第26-35页 |
| 3.1 无葡萄糖低GC组MIN6细胞内PKA的检测 | 第26-27页 |
| 3.2 无葡萄糖高GC组MIN6细胞内PKA的检测 | 第27-28页 |
| 3.3 低葡萄糖低GC组MIN6细胞内PKA的检测 | 第28-30页 |
| 3.4 低葡萄糖高GC组MIN6细胞内PKA的检测 | 第30-31页 |
| 3.5 高葡萄糖低GC组MIN6细胞内PKA的检测 | 第31-32页 |
| 3.6 高葡萄糖高GC组MIN6细胞内PKA含量检测 | 第32-33页 |
| 3.7 不同葡萄糖浓度下不同水平GC干预对PKA生成影响的比较 | 第33-35页 |
| 4.ELISA法检测不同浓度GC对各组MIN6细胞胰岛素分泌量的影响 | 第35-38页 |
| 4.1 在没有添加刺激剂ISO的情况下检测胰岛素分泌量 | 第35页 |
| 4.2 在添加刺激剂ISO的情况下检测胰岛素分泌量 | 第35-36页 |
| 4.3 添加刺激剂ISO前后胰岛素分泌量的比较 | 第36-38页 |
| 讨论(Discussion) | 第38-41页 |
| 展望 | 第40-41页 |
| 结论(Conclusions) | 第41-42页 |
| 参考文献(References) | 第42-45页 |
| 文献综述(Review) | 第45-53页 |
| 参考文献(References) | 第50-53页 |
| 致谢(Acknowledgements) | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54-55页 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第55页 |
