| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略词表 | 第17-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-44页 |
| 1.1 脑卒中概述 | 第19-20页 |
| 1.2 脑卒中的病理生理学研究进展 | 第20-24页 |
| 1.2.1 早期脑卒中的去极化和兴奋性中毒 | 第21页 |
| 1.2.2 脑卒中的氧化应激性 | 第21-22页 |
| 1.2.3 脑卒中的炎症反应 | 第22页 |
| 1.2.4 脑卒中的脑屏障通透性 | 第22-23页 |
| 1.2.5 神经细胞的凋亡 | 第23页 |
| 1.2.6 脑水肿 | 第23-24页 |
| 1.2.7 脑卒中的额外损伤机制 | 第24页 |
| 1.3 脑卒中治疗现状 | 第24-28页 |
| 1.3.1 溶栓治疗 | 第25页 |
| 1.3.2 神经保护剂治疗 | 第25-28页 |
| 1.4 NF-κB信号通路与脑缺血 | 第28-30页 |
| 1.4.1 NF-κB与脑缺血概述 | 第28-29页 |
| 1.4.2 NF-κB与MCAO模型的关系 | 第29-30页 |
| 1.5 MIRNA与脑缺血 | 第30-35页 |
| 1.5.1 MicroRNA概述 | 第31页 |
| 1.5.2 MicroRNA与脑缺血的关系简述 | 第31-33页 |
| 1.5.3 MicroRNA与NF-κB信号通路 | 第33-34页 |
| 1.5.4 microRNA-181b-CYLD-NF-κB信号通路概述 | 第34-35页 |
| 1.6 本课题相关模型的概述 | 第35-40页 |
| 1.6.1 脑缺血模型的概述 | 第35页 |
| 1.6.2 线栓法制备小鼠局灶性脑缺血概述 | 第35-38页 |
| 1.6.3 氯化钴诱导N2a细胞缺氧模型的研究概述 | 第38-40页 |
| 1.7 异甜菊醇(Isosteviol)及其衍生物的研究进展 | 第40-42页 |
| 1.8 本课题的研究意义和主要内容 | 第42-44页 |
| 1.8.1 研究意义 | 第42-43页 |
| 1.8.2 研究内容 | 第43-44页 |
| 第二章 STVNa对体内急性局灶性小鼠永久性脑缺血损伤的神经保护作用研究 | 第44-70页 |
| 2.1 前言 | 第44-45页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第45-49页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第45页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第45-46页 |
| 2.2.3 实验设备 | 第46-48页 |
| 2.2.4 主要试剂的配制方法 | 第48-49页 |
| 2.3 实验方法 | 第49-58页 |
| 2.3.1 建模前准备 | 第49页 |
| 2.3.2 永久性脑缺血模型的构建 | 第49-50页 |
| 2.3.3 模型稳定性验证 | 第50-51页 |
| 2.3.4 动物各项生理参数的监测 | 第51页 |
| 2.3.5 实验分组及给药计划 | 第51-52页 |
| 2.3.6 行为学分析 | 第52-54页 |
| 2.3.7 小鼠脑部梗死体积的计算 | 第54页 |
| 2.3.8 石蜡组织切片的制备 | 第54-55页 |
| 2.3.9 苏木素-伊红(HE)染色 | 第55-56页 |
| 2.3.10 免疫组织化学染色 | 第56-58页 |
| 2.3.11 细胞计数方式 | 第58页 |
| 2.3.12 统计学分析 | 第58页 |
| 2.4 实验结果 | 第58-67页 |
| 2.4.1 脑部血流检测结果 | 第58-60页 |
| 2.4.2 STVNa对小鼠生理参数的影响 | 第60-61页 |
| 2.4.3 STVNa对永久性局灶脑缺血造成的小鼠脑梗塞体积的影响 | 第61-62页 |
| 2.4.4 STVNa对永久性局灶脑缺血造成的小鼠行为学的影响 | 第62-63页 |
| 2.4.5 STVNa在时间窗研究中对永久性局灶性脑缺血小鼠的保护作用 | 第63-64页 |
| 2.4.6 STVNa对永久性局灶脑缺血造成的小鼠病理学的影响 | 第64-67页 |
| 2.5 讨论 | 第67-68页 |
| 2.6 本章总结 | 第68-70页 |
| 第三章 STVNa对体外氯化钴化学法建立N2a细胞缺氧损伤模型的保护作用 | 第70-90页 |
| 3.1 前言 | 第70-71页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第71-73页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第71页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第71页 |
| 3.2.3 实验设备 | 第71-72页 |
| 3.2.4 主要试剂的配制方法 | 第72-73页 |
| 3.3 体外实验方法 | 第73-79页 |
| 3.3.1 细胞的培养 | 第73-74页 |
| 3.3.2 氯化钴诱导N2a细胞化学缺氧模型的建立 | 第74页 |
| 3.3.3 实验分组 | 第74-75页 |
| 3.3.4 N2a细胞显微镜下形态学观察 | 第75页 |
| 3.3.5 CCK8方法检测N2a细胞活性 | 第75-76页 |
| 3.3.6 TUNEL法检测体外细胞凋亡 | 第76-77页 |
| 3.3.7 N2a细胞线粒体膜电位的测定 | 第77页 |
| 3.3.8 ROS(活性氧)检测实验 | 第77-78页 |
| 3.3.9 细胞免疫荧光染色实验 | 第78-79页 |
| 3.3.10 统计学分析 | 第79页 |
| 3.4 实验结果 | 第79-87页 |
| 3.4.1 不同浓度的STVNa对N2a细胞活性的影响 | 第79-80页 |
| 3.4.2 不同浓度CoCl_2化学诱导缺氧条件下对N2a细胞活性的影响 | 第80-81页 |
| 3.4.3 不同浓度CoCl_2化学诱导缺氧条件下对N2a细胞凋亡的影响 | 第81页 |
| 3.4.4 不同时间给予STVNa对于CoCl_2化学诱导缺氧条件下N2a细胞活性的影响 | 第81-82页 |
| 3.4.5 不同时间给予STVNa对于CoCl_2化学诱导缺氧条件下N2a细胞活性的影响 | 第82-83页 |
| 3.4.6 STVNa对于CoCl_2化学诱导缺氧条件下N2a细胞凋亡的影响 | 第83-84页 |
| 3.4.7 STVNa对N2a细胞形态学的影响 | 第84-85页 |
| 3.4.8 STVNa对CoCl_2化学诱导缺氧条件下N2a细胞线粒体膜电位的影响 | 第85-86页 |
| 3.4.9 STVNa对CoCl_2化学诱导缺氧条件下N2a细胞ROS水平的影响 | 第86页 |
| 3.4.10 STVNa对CoCl_2化学诱导缺氧条件下N2a细胞NF-κB入核的影响 | 第86-87页 |
| 3.5 讨论 | 第87-89页 |
| 3.6 本章总结 | 第89-90页 |
| 第四章 STVNa对体内永久性脑缺血和体外缺氧损伤诱导的NF-κB中下游信号通路的影响 | 第90-117页 |
| 4.1 前言 | 第90-92页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第92-95页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第92页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第92-94页 |
| 4.2.3 实验设备 | 第94页 |
| 4.2.4 主要试剂的配制方法 | 第94-95页 |
| 4.3 体内实验方法 | 第95-104页 |
| 4.3.1 永久性脑缺血模型的构建 | 第95页 |
| 4.3.2 QPCR检测NF-κB相关基因的mRNA的表达水平 | 第95-99页 |
| 4.3.3 Westernblot检测NF-κB相关基因的蛋白的表达水平 | 第99-103页 |
| 4.3.4 统计学分析 | 第103-104页 |
| 4.4 体外实验方法 | 第104-105页 |
| 4.4.1 细胞的培养 | 第104页 |
| 4.4.2 氯化钴诱导N2a细胞化学缺氧模型的建立 | 第104页 |
| 4.4.3 实验分组 | 第104页 |
| 4.4.4 实时荧光定量PCR检测N2a细胞NF-κB相关基因的mRNA表达水平 | 第104页 |
| 4.4.5 Westrnblot检测N2a细胞NF-κB相关基因的蛋白表达水平 | 第104-105页 |
| 4.4.6 统计学分析 | 第105页 |
| 4.5 实验结果 | 第105-114页 |
| 4.5.1 STVNa对永久性脑缺血条件下诱导的NF-κB信号通路中IKKα、NF-κB水平的影响 | 第105-106页 |
| 4.5.2 STVNa对永久性脑缺血条件下诱导的NF-κB信号通路激活后介导的下游炎症因子TNF-α、IL-1β水平的影响 | 第106-108页 |
| 4.5.3 STVNa对永久性脑缺血条件下诱导的NF-κB信号通路激活后介导的下游凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3水平的影响 | 第108-110页 |
| 4.5.4 STVNa对CoCl_2化学诱导N2a细胞缺氧条件下NF-κB信号通路激活中IKKα、NF-κB水平的影响 | 第110-111页 |
| 4.5.5 STVNa对CoCl_2化学诱导N2a细胞缺氧条件下NF-κB信号通路激活后介导的下游炎症因子TNF-α、IL-1β水平的影响 | 第111-113页 |
| 4.5.6 STVNa对CoCl_2化学诱导缺氧条件下N2a细胞表达NF-κB信号通路激活后介导的下游凋亡因子Bcl-2、Bax、Caspase-3水平的影响 | 第113-114页 |
| 4.6 讨论 | 第114-116页 |
| 4.7 本章总结 | 第116-117页 |
| 第五章 STVNa通过介导miRNA-181b-CYLD-NF-κB信号通路发挥神经保护作用机制研究 | 第117-134页 |
| 5.1 前言 | 第117-118页 |
| 5.2 实验材料与设备 | 第118-119页 |
| 5.2.1 实验细胞 | 第118页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第118-119页 |
| 5.2.3 实验设备 | 第119页 |
| 5.2.4 主要试剂的配制方法 | 第119页 |
| 5.3 实验方法 | 第119-122页 |
| 5.3.1 永久性脑缺血模型的构建 | 第119页 |
| 5.3.2 CoCl_2化学法诱导N2a细胞缺氧模型的建立 | 第119页 |
| 5.3.3 转染实验 | 第119-120页 |
| 5.3.4 QPCR检测miRNA的表达水平 | 第120-122页 |
| 5.3.5 Weternblot检测相关基因的蛋白表达水平 | 第122页 |
| 5.3.6 统计学分析 | 第122页 |
| 5.4 实验结果 | 第122-131页 |
| 5.4.1 缺氧损伤后miR-181b表达的变化 | 第122-123页 |
| 5.4.2 miR-181b对CoCl_2诱导的N2a细胞缺氧后的影响 | 第123-126页 |
| 5.4.3 预测miR-181b的靶基因 | 第126页 |
| 5.4.4 CYLD在CoCl_2化学诱导N2a缺氧损伤上的变化情况 | 第126-127页 |
| 5.4.5 miR-181b靶向调节CYLD的表达 | 第127-129页 |
| 5.4.6 STVNa介导miR-181b-CYLD-NF-κB通路的表达 | 第129-131页 |
| 5.5 讨论 | 第131-133页 |
| 5.6 本章总结 | 第133-134页 |
| 总结与展望 | 第134-137页 |
| 总结 | 第134-135页 |
| 创新之处 | 第135-136页 |
| 展望 | 第136-137页 |
| 参考文献 | 第137-156页 |
| 攻读博士学位期间取得的研究成果 | 第156-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
| 附件 | 第159页 |
