| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 第一章 脐带间充质干细胞的分离扩增及生物学特性研究 | 第17-24页 |
| 1.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 1.1.1 脐带 | 第17页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 1.1.3 主要仪器和耗材 | 第18页 |
| 1.1.4 主要溶液的配制 | 第18-19页 |
| 1.2 方法 | 第19-21页 |
| 1.2.1 UC-MSCs的分离、培养 | 第19页 |
| 1.2.2 UC-MSCs传代 | 第19页 |
| 1.2.3 UC-MSCs形态观察 | 第19页 |
| 1.2.4 UC-MSCs免疫表型检测 | 第19-20页 |
| 1.2.5 UC-MSCs成骨诱导分化 | 第20页 |
| 1.2.6 UC-MSCs成脂诱导分化 | 第20-21页 |
| 1.3 实验结果 | 第21-22页 |
| 1.3.1 UC-MSCs的形态观察 | 第21页 |
| 1.3.2 UC-MSCs免疫表型的检测 | 第21-22页 |
| 1.3.3 UC-MSCs成骨诱导分化 | 第22页 |
| 1.3.4 UC-MSCs成脂诱导分化 | 第22页 |
| 1.4 结论 | 第22-24页 |
| 第二章 脐带间充质干细胞的外泌体提取及活性鉴定 | 第24-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的培养基(收集不同代数的培养上清) | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 主要仪器和耗材 | 第24-25页 |
| 2.1.4 主要溶液的配制 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-26页 |
| 2.2.1 外泌体提取 | 第25页 |
| 2.2.2 外泌体形态观察 | 第25页 |
| 2.2.3 BCA法测量蛋白浓度 | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-30页 |
| 2.3.1 UC-MSCs细胞提取外泌体 | 第26-27页 |
| 2.3.2 UC-MSCs细胞提取外泌体的活性鉴定 | 第27-30页 |
| 2.4 结论 | 第30-31页 |
| 第三章 重组腺病毒miR-486对间充质干细胞的修饰 | 第31-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 3.1.1 载体及目的基因信息 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 3.2 方法 | 第32-35页 |
| 3.2.1 携带pHBAd-U6-GFP过表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 3.2.2 高表达miR-486外泌体提取 | 第33页 |
| 3.2.3 外泌体RNA的提取 | 第33-34页 |
| 3.2.4 外泌体miR-486的表达检测(qRT-PCR) | 第34-35页 |
| 3.3 实验结果 | 第35-38页 |
| 3.3.1 pHBAd-U6-GFP-mmu-mir486重组载体测序结果： | 第35页 |
| 3.3.2 重组腺病毒感染UC-MSCs | 第35-36页 |
| 3.3.3 过表达miR-486UC-MSCs细胞miR-486的表达 | 第36-37页 |
| 3.3.4 过表达miR-486的UC-MSCs细胞提取外泌体其miR-486的表达 | 第37页 |
| 3.3.5 miR-486高表达外泌体作用于心肌细胞后miR-486表达检测 | 第37-38页 |
| 3.4 结论 | 第38-39页 |
| 第四章 MIRNA-486高表达外泌体鉴定及生物学特性 | 第39-52页 |
| 4.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 4.1.1 细胞株： | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂： | 第39页 |
| 4.1.3 主要实验仪器 | 第39-40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 4.2.1 高表达miR-486外泌体提取 | 第40页 |
| 4.2.2 高表达miR-486外泌体RNA的提取 | 第40页 |
| 4.2.3 外泌体miR-486的表达检测 | 第40页 |
| 4.2.4 CCK8法检测高表达miR-486外泌体对心肌细胞增殖的影响 | 第40页 |
| 4.2.5 Dye670检测高表达miR-486外泌体对心肌细胞的增殖影响 | 第40-41页 |
| 4.2.6 高表达miR-486外泌体对心肌细胞和血管内皮细胞迁移的影响 | 第41页 |
| 4.2.7 AnnexinV-APC检测高表达miR-486外泌体对心肌细胞凋亡的影响 | 第41-42页 |
| 4.3 实验结果 | 第42-50页 |
| 4.3.1 CCK8法检测高表达miR-486外泌体对心肌细胞增殖的影响 | 第42页 |
| 4.3.2 Dye670检测过表达miR-486外泌体对大鼠心肌细胞的增殖影响 | 第42-43页 |
| 4.3.3 过表达miR-486外泌体对血管内皮细胞迁移的影响 | 第43-45页 |
| 4.3.4 过表达miR-486外泌体作用于心肌细胞迁移实验 | 第45-46页 |
| 4.3.5 AnnexinV-APC/PI染色法测过表达miR-486外泌体对凋亡心肌中的影响 | 第46-50页 |
| 4.4 实验结论 | 第50-52页 |
| 第五章 讨论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 主要简历 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
