摘要 | 第9-14页 |
Abstract | 第14-19页 |
前言 | 第20-30页 |
参考文献 | 第25-30页 |
第一部分 结直肠癌 Duffy 抗原趋化因子受体的表达与微血管密度的相关性 | 第30-56页 |
材料和方法 | 第31-38页 |
1. 材料 | 第31-33页 |
1.1 患者和组织样本 | 第31页 |
1.2 实验仪器及设备 | 第31-32页 |
1.3 试剂 | 第32-33页 |
2. 方法 | 第33-38页 |
2.1 组织 RNA 提取 | 第33页 |
2.2 RNA 浓度和纯度检测 | 第33页 |
2.3 RNA 质量检测 | 第33-34页 |
2.4 基因组 DNA 的除去反应 | 第34页 |
2.5 反转录反应 | 第34页 |
2.6 SYBR Green Real Time PCR 反应 | 第34-36页 |
2.7 DARC、CD34 和 MMP-9 免疫组织化学染色 | 第36-37页 |
2.8 免疫组织化学染色结果判断 | 第37-38页 |
2.9 统计分析 | 第38页 |
结果 | 第38-47页 |
1. 结直肠癌和正常结直肠组织中 DARC 蛋白和 mRNA 的表达 | 第38-40页 |
2. 结直肠癌 DARC 蛋白表达和病理特征的相关性 | 第40页 |
3. 结直肠癌和正常结直肠组织中 MMP-9 的表达 | 第40-41页 |
4. 结直肠癌 MMP-9 表达和病理特征的相关性 | 第41页 |
5. 结直肠癌 MVD 和病理特征的相关性 | 第41页 |
6. 结直肠癌 DARC 蛋白表达、MVD 以及 MMP-9 表达相关性 | 第41-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
第二部分 Duffy 抗原趋化因子受体 TaqMan-MGB 探针实时 PCR 基因分型方法的建立及人群基因频率调查 | 第56-77页 |
材料和方法 | 第57-64页 |
1. 材料 | 第57-59页 |
1.1 血液样本 | 第57页 |
1.2 实验仪器及设备 | 第57-58页 |
1.3 试剂 | 第58-59页 |
2. 方法 | 第59-64页 |
2.1 血液基因组 DNA 的提取 | 第59-60页 |
2.2 DNA 浓度和纯度检测 | 第60页 |
2.3 引物和探针的设计与合成 | 第60页 |
2.4 PCR-ASP | 第60-62页 |
2.5 TaqMan-MGB 探针实时 PCR | 第62-63页 |
2.6 统计分析 | 第63-64页 |
结果 | 第64-67页 |
1. TaqMan-MGB 探针实时 PCR 基因分型结果 | 第64页 |
2. TaqMan-MGB 探针实时 PCR 的重复性 | 第64页 |
3. TaqMan-MGB 探针实时 PCR 的最低检出限 | 第64-65页 |
4. TaqMan-MGB 探针实时 PCR 与 PCR-ASP 的比较 | 第65-66页 |
5. 大连汉族献血人群 FY*A、FY*B 的基因频率分布特点、Duffy 抗原不配合几率及其与其它地区人群的比较 | 第66-67页 |
讨论 | 第67-71页 |
结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-77页 |
第三部分 结直肠癌 Duffy 抗原趋化因子受体单核苷酸多态性和结直肠癌的相关性 | 第77-98页 |
材料和方法 | 第77-84页 |
1. 材料 | 第77-80页 |
1.1 研究对象 | 第78页 |
1.2 实验仪器及设备 | 第78-80页 |
1.3 试剂 | 第80页 |
2. 方法 | 第80-84页 |
2.1 血液基因组 DNA 的提取 | 第80页 |
2.2 DNA 浓度和纯度检测 | 第80页 |
2.3 TaqMan-MGB 探针实时 PCR | 第80-81页 |
2.4 红细胞趋化因子清除功能检测 | 第81-83页 |
2.5 红细胞膜表面 DARC 表达的流式细胞术检测 | 第83-84页 |
2.6 统计分析 | 第84页 |
结果 | 第84-89页 |
1. 结直肠癌病例组和对照组 DARC 基因分型结果的 Hardy–Weinberg 平衡检验 | 第84-85页 |
2. 结直肠癌病例组和对照组 DARC 基因型分布的比较 | 第85-86页 |
3. DARC 基因型和结直肠癌患者的病理特征的关系 | 第86-87页 |
4. DARC 基因型和红细胞趋化因子清除功能的关系 | 第87页 |
5. DARC 基因型和红细胞膜表面 DARC 表达的关系 | 第87-89页 |
讨论 | 第89-93页 |
结论 | 第93-94页 |
参考文献 | 第94-98页 |
综述 | 第98-122页 |
参考文献 | 第109-122页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第122-123页 |
致谢 | 第123-124页 |