| 本课题资助基金 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-12页 |
| ABSTRACT | 第12-18页 |
| 目录 | 第19-22页 |
| 缩略词表 | 第22-24页 |
| 第一部分 CSE腹腔注射肺气肿小鼠肺内CD31~-CD45~-Sca-1~+细胞数量和Shh信号通路的变化 | 第24-51页 |
| 第一章 前言 | 第24-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-39页 |
| 2.1 主要材料、试剂和设备 | 第26-30页 |
| 2.1.1 主要材料和试剂 | 第26-28页 |
| 2.1.2 主要设备 | 第28页 |
| 2.1.3 主要实验溶液的配制 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-38页 |
| 2.2.1 动物建模与对象分组 | 第30页 |
| 2.2.2 小鼠肺功能测定 | 第30-31页 |
| 2.2.3 小鼠肺组织标本的收集 | 第31页 |
| 2.2.4 小鼠肺组织单细胞悬液的制备 | 第31页 |
| 2.2.5 肺组织HE染色 | 第31-32页 |
| 2.2.6 肺组织病理形态学检测 | 第32页 |
| 2.2.7 流式细胞术(FCM)检测肺CD31~-CD45~-Sca-1~+细胞水平 | 第32-33页 |
| 2.2.8 Realtime RT-PCR检测肺组织内Shh、Ptch1、Gli1的mRNA表达 | 第33-35页 |
| 2.2.9 免疫印迹法检测肺组织内Shh、Ptch、Gli1的蛋白表达 | 第35-37页 |
| 2.2.10 免疫组织化学法检测肺组织内Shh、Ptch1、Gli1的分布与表达 | 第37-38页 |
| 2.3 统计学分析 | 第38-39页 |
| 第三章 实验结果 | 第39-46页 |
| 3.1 CSE腹腔注射后小鼠的行为学观察 | 第39页 |
| 3.2 肺功能结果分析 | 第39页 |
| 3.3 肺组织病理形态分析 | 第39-40页 |
| 3.4 小鼠肺CD31~-CD45~-Sca-1~+细胞水平 | 第40-41页 |
| 3.5 小鼠肺组织Shh、Ptch1和Gli1的mRNA表达 | 第41-43页 |
| 3.6 Western-Blot法检测小鼠肺组织Shh、Ptch1和Gli1的蛋白表达 | 第43-44页 |
| 3.7 免疫组织化学法检测小鼠肺组织Shh、Ptch1和Gli1蛋白的分布和表达 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-50页 |
| 4.1 肺气肿小鼠模型建造成功 | 第46页 |
| 4.2 肺气肿小鼠肺组织内CD31~-CD45~-Sca-1~+细胞水平下降 | 第46-48页 |
| 4.3 肺气肿小鼠肺组织内Shh信号通路受到抑制 | 第48-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 第二部分 腺病毒急性感染对肺气肿小鼠肺内CD31~-CD45~-Sca-1~+细胞数量和Shh信号通路的影响 | 第51-70页 |
| 第一章 前言 | 第51-52页 |
| 第二章 材料与方法 | 第52-56页 |
| 2.1. 主要材料、试剂和设备 | 第52页 |
| 2.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 2.2.1 动物建模与对象分组 | 第52-53页 |
| 2.2.2 小鼠肺功能测定 | 第53-54页 |
| 2.2.3 小鼠肺组织标本的收集 | 第54页 |
| 2.2.4 小鼠肺组织单细胞悬液的制备 | 第54页 |
| 2.2.5 冰冻切片及RFP荧光的观察 | 第54页 |
| 2.2.6 肺组织HE染色 | 第54页 |
| 2.2.7 肺组织病理形态学检测 | 第54-55页 |
| 2.2.8 流式细胞术(FCM)检测各组小鼠肺CD31~-CD45~-Sca-1~+细胞水平 | 第55页 |
| 2.2.9 Realtime RT-PCR检测各组小鼠肺组织内Shh、Ptch1、Gli1的mRNA表达 | 第55页 |
| 2.2.10 免疫印迹法检测各组小鼠肺组织内Shh、Ptch1、Gli1的蛋白表达 | 第55页 |
| 2.2.11 免疫组织化学法检测各组小鼠肺组织内Shh、Ptch1、Gli1的分布与表达 | 第55页 |
| 2.3 统计学分析 | 第55-56页 |
| 第三章 实验结果 | 第56-66页 |
| 3.1 CSE腹腔注射或腺病毒气管内滴注后小鼠的行为学观察 | 第56页 |
| 3.2 病毒感染及红色荧光蛋白的表达 | 第56页 |
| 3.3 肺功能结果分析 | 第56-57页 |
| 3.4 肺组织病理形态分析 | 第57-60页 |
| 3.4.1 各组肺组织病理观察(HE染色) | 第57-58页 |
| 3.4.2 各组肺组织的MLI和DI | 第58页 |
| 3.4.3 各组小鼠肺组织气道及血管炎症 | 第58-60页 |
| 3.5 各组小鼠肺CD31~-CD45~-Sca-1~+细胞水平 | 第60-61页 |
| 3.6 各组小鼠肺组织Shh、Ptch1和Gli1的mRNA表达 | 第61-62页 |
| 3.7 Western-Blot法检测各组肺组织Shh、Ptch1和Gli1的蛋白表达 | 第62-63页 |
| 3.8 免疫组织化学法检测各组小鼠肺组织Shh、Ptch1和Gli1蛋白的分布和表达 | 第63-66页 |
| 第四章 讨论 | 第66-69页 |
| 4.1 肺气肿小鼠腺病毒急性感染成功 | 第66-67页 |
| 4.2 肺气肿小鼠中受抑的肺CD31~-CD45~-Sca-1~+细胞水平在腺病毒急性感染后升高 | 第67页 |
| 4.3 肺气肿小鼠肺组织中受抑的Shh信号通路在腺病毒急性感染后显著激活 | 第67-69页 |
| 第五章 结论 | 第69-70页 |
| 总结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 综述 | 第78-93页 |
| 参考文献 | 第87-93页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
