| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-43页 |
| 2.1 仪器和试剂 | 第18-20页 |
| 2.2 部分溶液的配制 | 第20-22页 |
| 2.2.1 LB液的配制 | 第20页 |
| 2.2.2 细胞培养试剂配制 | 第20页 |
| 2.2.3 DNA电泳试剂配制 | 第20-21页 |
| 2.2.4 Western Blot试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.3 细胞株、质粒 | 第22页 |
| 2.4 实验步骤 | 第22-43页 |
| 2.4.1 细胞培养 | 第22-24页 |
| 2.4.2 感受态E.Coli的制备 | 第24页 |
| 2.4.3 重组DNA | 第24-31页 |
| 2.4.4 DNA电泳 | 第31页 |
| 2.4.5 转染 | 第31页 |
| 2.4.6 免疫蛋白印迹实验(Western Blot) | 第31-35页 |
| 2.4.7 免疫共沉淀(选用Sigma公司的flag M2(mouse)抗体偶联的beads) | 第35-36页 |
| 2.4.8 免疫荧光染色 | 第36-37页 |
| 2.4.9 RNA干扰技术 | 第37-40页 |
| 2.4.10 利用慢病毒包装体系建立稳定细胞株(gateway system) | 第40-41页 |
| 2.4.11 裸鼠成瘤实验 | 第41-43页 |
| 3 一个与MDM2结合并依赖P53影响肿瘤的蛋白：DNAJB1 | 第43-52页 |
| 3.1 通过P、IF实验验证DNAJB1与MDM2的相互作用 | 第43-44页 |
| 3.2 DNAJB1在翻译后水平稳定MDM2,并通过泛素途径减缓MDM2-介导的蛋白降解 | 第44-47页 |
| 3.3 DNAJB1依赖于MDM2来稳定P53蛋白 | 第47-49页 |
| 3.4 DNAJB1减缓MDM2介导的P53蛋白泛素化并提高P53的转录活性 | 第49-50页 |
| 3.5 DNAJB1依赖于P53影响肿瘤的生长 | 第50-52页 |
| 4 一个与MDMX结合并依赖P53影响肿瘤的蛋白：UXT | 第52-62页 |
| 4.1 质粒测序结果回报 | 第52-53页 |
| 4.2 pcDNA3-UXT质粒转染后蛋白表达图片 | 第53-54页 |
| 4.3 UXT与MDMX的相互作用 | 第54-56页 |
| 4.4 UXT通过P53通路影响P21蛋白表达 | 第56-58页 |
| 4.5 UXT对细胞生物学效应的影响 | 第58-62页 |
| 4.5.1 UXT对细胞生长的影响 | 第58页 |
| 4.5.2 UXT对DNA损伤及其它刺激的影响 | 第58-62页 |
| 5 讨论 | 第62-68页 |
| 6 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 综述 | 第77-103页 |
| 参考文献 | 第94-103页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果目录 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
