| 中文摘要 | 第3-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第12-14页 |
| 前言 | 第14-19页 |
| 参考文献 | 第16-19页 |
| 第一部分 人肝癌HepG2/mTOR~+细胞株的构建 | 第19-27页 |
| 1 材料 | 第19-22页 |
| 1.1 重组质粒 | 第19页 |
| 1.2 细胞株 | 第19页 |
| 1.3 实验试剂 | 第19-20页 |
| 1.4 主要仪器及耗材 | 第20-21页 |
| 1.5 主要试剂配制 | 第21-22页 |
| 2 方法 | 第22-25页 |
| 2.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2 质粒转染 | 第23页 |
| 2.3 倒置显微镜下细胞形态学观察 | 第23页 |
| 2.4 Western blot实验 | 第23-24页 |
| 2.5 统计学处理 | 第24-25页 |
| 3 结果 | 第25-26页 |
| 3.1 重组质粒转染后人肝癌HepG2细胞的形态变化 | 第25页 |
| 3.2 人肝癌HepG2/mTOR~+细胞株中mTOR的表达 | 第25-26页 |
| 4 讨论 | 第26-27页 |
| 第二部分 南蛇藤提取物对人肝癌HepG2/mTOR~+细胞的影响 | 第27-38页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| 1.1 药品 | 第27页 |
| 1.2 细胞株 | 第27页 |
| 1.3 实验试剂 | 第27-28页 |
| 1.4 主要仪器及耗材 | 第28页 |
| 1.5 主要试剂配制 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-31页 |
| 2.1 细胞培养 | 第28-29页 |
| 2.2 细胞活力实验(MTT法) | 第29页 |
| 2.3 倒置显微镜及透射电镜观察细胞形态 | 第29页 |
| 2.4 流式细胞术检测凋亡 | 第29页 |
| 2.5 细胞划痕实验 | 第29-30页 |
| 2.6 细胞侵袭和迁移实验 | 第30页 |
| 2.7 统计学处理 | 第30-31页 |
| 3 结果 | 第31-36页 |
| 3.1 COE对人肝癌HepG2/mTOR~+细胞增殖的影响 | 第31页 |
| 3.2 COE对人肝癌HepG2/mTOR~+细胞形态的影响 | 第31-33页 |
| 3.3 COE对人肝癌HepG2/mTOR~+细胞凋亡的影响 | 第33-34页 |
| 3.4 COE对人肝癌HepG2/mTOR~+细胞迁移能力的影响 | 第34-35页 |
| 3.5 COE对人肝癌HepG2/mTOR~+细胞侵袭能力的影响 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 第三部分 南蛇藤提取物促进人肝癌HepG2/mTOR~+细胞凋亡的分子机制 | 第38-47页 |
| 1 材料 | 第38-39页 |
| 1.1 药品 | 第38页 |
| 1.2 细胞株 | 第38页 |
| 1.3 实验试剂 | 第38-39页 |
| 1.4 实验仪器及耗材 | 第39页 |
| 2 方法 | 第39-41页 |
| 2.1 药物准备 | 第39页 |
| 2.2 细胞培养 | 第39页 |
| 2.3 Western blot实验 | 第39-40页 |
| 2.4 统计学处理 | 第40-41页 |
| 3 结果 | 第41-45页 |
| 3.1 COE对mTOR蛋白表达的影响 | 第41-42页 |
| 3.2 COE对凋亡相关蛋白的影响 | 第42-43页 |
| 3.3 COE对mTOR信号转导通路相关蛋白的影响 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 第四部分 南蛇藤提取物与雷帕霉素联合应用的疗效比较 | 第47-56页 |
| 1 材料 | 第47-49页 |
| 1.1 药品 | 第47页 |
| 1.2 细胞株 | 第47页 |
| 1.3 实验试剂 | 第47-48页 |
| 1.4 主要仪器及耗材 | 第48-49页 |
| 1.5 主要试剂配制 | 第49页 |
| 2 方法 | 第49-51页 |
| 2.1 细胞培养 | 第49页 |
| 2.2 倒置显微镜和透射电镜下细胞形态学观察 | 第49页 |
| 2.3 流式细胞术检测凋亡 | 第49页 |
| 2.4 Westen blot实验 | 第49-50页 |
| 2.5 统计学处理 | 第50-51页 |
| 3 结果 | 第51-55页 |
| 3.1 COE和RAPA对人肝癌HepG2/mTOR~+细胞形态的影响 | 第51-52页 |
| 3.2 COE和RAPA对人肝癌HepG2/mTOR~+细胞凋亡的影响 | 第52-53页 |
| 3.3 COE和RAPA对凋亡相关蛋白的影响 | 第53-54页 |
| 3.4 COE和RAPA对mTOR相关信号转导通路的影响 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 文献综述 | 第60-65页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕博士期间发表的学术论文目录 | 第66-67页 |
