| 中文摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 主要英文缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-27页 |
| 1.1 疱疹病毒感染性 | 第10-11页 |
| 1.2 HSV-1UL43 基因 | 第11-15页 |
| 1.3 生物信息学 | 第15-16页 |
| 1.4 生物信息学的研究方向 | 第16-18页 |
| 1.4.1 序列比对 | 第16-17页 |
| 1.4.2 蛋白质的分析 | 第17-18页 |
| 1.4.3 蛋白质功能性预测 | 第18页 |
| 1.5 病毒侵入的方式 | 第18-21页 |
| 1.6 疱疹病毒融合机制 | 第21-22页 |
| 1.7 病毒诱导的膜融合和自我抑制现象 | 第22-24页 |
| 1.8 无病毒细胞融合模型 | 第24-25页 |
| 1.9 本研究目的、意义和内容 | 第25-27页 |
| 第二章 HSV-1UL43 基因遗传信息学分析 | 第27-36页 |
| 2.1 实验目的 | 第27页 |
| 2.2 主要生物分析软件和网站 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-28页 |
| 2.3.1 HSV-1 UL43 基因以及其同源基因核苷酸序列遗传进化树分析 | 第27页 |
| 2.3.2 HSV-1 UL43 基因以及其同源基因核苷酸序列多重比对 | 第27页 |
| 2.3.3 HSV-1 和 Prv UL43p 基本特性分析 | 第27页 |
| 2.3.4 HSV-1 UL43p 立体构象分析 | 第27-28页 |
| 2.3.5 HSV-1 UL43p 和 Prv UL43p 疏水性分析 | 第28页 |
| 2.3.6 HSV-1 UL43p 和 Prv UL43p 跨膜结构分析 | 第28页 |
| 2.3.7 HSV-1 UL43p 和 Prv UL43p 磷酸化位点预测 | 第28页 |
| 2.4 实验结果 | 第28-34页 |
| 2.4.1 遗传进化树分析 | 第28-29页 |
| 2.4.2 核苷酸及氨基酸同源比对 | 第29-30页 |
| 2.4.3 蛋白质理化性质分析 | 第30-31页 |
| 2.4.4 二级结构预测 | 第31页 |
| 2.4.5 蛋白质立体结构预测 | 第31-32页 |
| 2.4.6 蛋白质疏水性分析 | 第32页 |
| 2.4.7 蛋白质跨膜结构预测和分析 | 第32-33页 |
| 2.4.8 蛋白质磷酸化位点预测 | 第33-34页 |
| 2.5 本章小结 | 第34-36页 |
| 第三章 HSV-1UL43 基因载体构建以及体外表达 | 第36-45页 |
| 3.1 实验目的 | 第36页 |
| 3.2 主要实验材料及试剂 | 第36-38页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.2.2 主要试剂配制方法 | 第36-38页 |
| 3.2.3 主要实验仪器 | 第38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-42页 |
| 3.3.1 病毒的扩增 | 第38页 |
| 3.3.2 UL43 基因的克隆和测序 | 第38-39页 |
| 3.3.3 PCR 产物的纯化和回收: | 第39页 |
| 3.3.4 目的片段与克隆载体体外重组 | 第39-40页 |
| 3.3.5 感受态细胞的制备 | 第40页 |
| 3.3.6 重组质粒转化 | 第40页 |
| 3.3.7 克隆载体的鉴定 | 第40页 |
| 3.3.8 质粒的鉴定与提取 | 第40-41页 |
| 3.3.9 构建 HSV-1UL43 真核表达载体及鉴定表达后目的蛋白 | 第41-42页 |
| 3.4 结果 | 第42-44页 |
| 3.4.1 HSV-1UL43 基因的克隆和测序 | 第42-43页 |
| 3.4.2 PCR 鉴定重组质粒 | 第43-44页 |
| 3.4.3 HSV-1UL43 基因的表达 | 第44页 |
| 3.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 HSV-1 UL43p 功能初步研究 | 第45-60页 |
| 4.1 实验目的 | 第45页 |
| 4.2 主要实验材料及试剂 | 第45-46页 |
| 4.2.1 瞬时转染试剂与材料 | 第45页 |
| 4.2.2 CELISA 试剂与材料 | 第45-46页 |
| 4.2.3 细胞融合分析试剂与材料 | 第46页 |
| 4.3 实验方法 | 第46-53页 |
| 4.3.1 HSV-1 糖蛋白 gB, gD, gH, gL 克隆载体构建 | 第46-49页 |
| 4.3.2 HSV-1 糖蛋白 gB, gD, gH, gL 真核表达质粒的构建 | 第49-50页 |
| 4.3.3 Westemblot 鉴定分析 | 第50页 |
| 4.3.4 脂质体转染 COS 细胞: | 第50页 |
| 4.3.5 瞬时转染方法 | 第50页 |
| 4.3.6 细胞内和细胞表面表达总方法 | 第50-51页 |
| 4.3.7 细胞融合分析方法 | 第51-52页 |
| 4.3.8 注意事项 | 第52-53页 |
| 4.4 结果 | 第53-59页 |
| 4.4.1 HSV-1gB,gD,gH,gL 基因扩增及测序 | 第53-54页 |
| 4.4.2 特异性抗体鉴定蛋白质的表达 | 第54-55页 |
| 4.4.3 COS 细胞中 HSV-1 糖蛋白的表达 | 第55-56页 |
| 4.4.4 无病毒细胞融合模型效果 | 第56-57页 |
| 4.4.5 UL43p 在膜融合过程中的作用 | 第57-59页 |
| 4.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第五章 讨论 | 第60-65页 |
| 第六章 结论和展望 | 第65-67页 |
| 6.1 全文总结 | 第65页 |
| 6.2 展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 攻读硕士学位期间论文发表情况 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
