| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第9-11页 |
| 英文縮略词表 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 第一章 ：DMD病人尿液细胞iPSCs的诱导 | 第17-40页 |
| 1.1 实验材料 | 第17-21页 |
| 1.1.1 实验仪器 | 第17页 |
| 1.1.2 主要实验试剂、耗材 | 第17-18页 |
| 1.1.3 质粒 | 第18页 |
| 1.1.4 细胞系 | 第18页 |
| 1.1.5 实验动物 | 第18-19页 |
| 1.1.6 主要试剂配制 | 第19-21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-30页 |
| 1.2.1 MEF细胞的制备 | 第21-23页 |
| 1.2.2 尿液细胞的分离和培养 | 第23-24页 |
| 1.2.3 DMD病人尿液细胞iPS细胞的诱导 | 第24-26页 |
| 1.2.4 DMD-UiPS细胞的传代 | 第26页 |
| 1.2.5 DMD-UiPS细胞的冻存和复苏 | 第26-27页 |
| 1.2.6 碱性磷酸酶检测 | 第27页 |
| 1.2.7 DMD-UiPS细胞表面标志物的检测 | 第27页 |
| 1.2.8 DMD-UiPS细胞核型检测 | 第27-28页 |
| 1.2.9 DMD-UiPS细胞的MLPA分析 | 第28-30页 |
| 1.2.10 DMD-UiPS细胞体外随机向三胚层分化能力检测 | 第30页 |
| 1.3 实验结果 | 第30-38页 |
| 1.3.1 脂质体Lipofectamine2000转染HEK293T细胞 | 第30-31页 |
| 1.3.2 DMD-UC向DMD-UiPS细胞的诱导 | 第31-32页 |
| 1.3.3 DMD-UiPS细胞碱性磷酸酶染色结果 | 第32-33页 |
| 1.3.4 DMD-UiPS细胞表面标志免疫荧光检测结果 | 第33-35页 |
| 1.3.5 DMD-UiPS细胞核型检测结果 | 第35页 |
| 1.3.6 DMD-UiPS细胞gDNA的MLPA分析 | 第35-36页 |
| 1.3.7 DMD-UiPS细胞体外EB形成 | 第36-37页 |
| 1.3.8 体外三胚层随机分化能力检测结果 | 第37-38页 |
| 1.4 讨论 | 第38-39页 |
| 1.5 结论 | 第39-40页 |
| 第二章 ：hESCs向限定性内胚层细胞的定向分化 | 第40-51页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第40-42页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第40页 |
| 2.1.2 主要实验试剂、耗材 | 第40页 |
| 2.1.3 细胞系 | 第40页 |
| 2.1.4 引物序列 | 第40-41页 |
| 2.1.5 主要试剂配制 | 第41-42页 |
| 2.2 实验方法 | 第42-46页 |
| 2.2.1 hESC向限定性内胚层细胞分化的方法步骤 | 第42页 |
| 2.2.2 ET5-DECs的传代 | 第42-43页 |
| 2.2.3 ET5-DECs的冻存 | 第43页 |
| 2.2.4 ET5-DECs的复苏 | 第43页 |
| 2.2.5 RT-PCR检测ET5-DECs表面标志基因的表达 | 第43-45页 |
| 2.2.6 流式分析ET5-DECs表面标志物的表达 | 第45-46页 |
| 2.3 实验结果 | 第46-49页 |
| 2.3.1 ET5向限定性内胚层细胞分化过程的细胞形态变化 | 第46-47页 |
| 2.3.2 RT-PCR对限定性内胚层细胞表达基因FoxA2、Sox17的检测 | 第47-48页 |
| 2.3.3 流式分析DEC表面标志物的表达 | 第48-49页 |
| 2.4 讨论 | 第49-50页 |
| 2.5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 综述 | 第54-68页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 攻读硕士学位期间主要研究成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
