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神经毒素基因RjAa17f重组棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第10-21页
    1.1 杆状病毒概述第10-15页
        1.1.1 杆状病毒的分类第10页
        1.1.2 杆状病毒的生活史第10-13页
        1.1.3 杆状病毒的应用第13-15页
    1.2 重组杆状病毒杀虫剂概述第15-17页
        1.2.1 表达酶和激素的重组杆状病毒第15-16页
        1.2.2 表达昆虫特异性毒素的重组杆状病毒第16-17页
        1.2.3 缺失病毒非必需基因的重组杆状病毒第17页
        1.2.4 插入增效蛋白的重组杆状病毒第17页
    1.3 蝎毒素的研究概述第17-19页
        1.3.1 蝎毒素分类第18页
        1.3.2 蝎毒素的应用价值第18-19页
    1.4 本研究的目的意义第19-21页
第二章 材料与方法第21-30页
    2.1 实验材料第21页
        2.1.1 载体、菌株、病毒、细胞系及试虫第21页
        2.1.2 主要生化试剂及试剂盒第21页
        2.1.3 实验常用试剂配置第21页
        2.1.4 引物设计第21页
    2.2 实验方法第21-30页
        2.2.1 碱裂解法提取质粒 DNA第21-22页
        2.2.2 酶切与链接反应第22-23页
        2.2.3 氯化钙转化感受态细胞的方法第23页
        2.2.4 电转化感受态细胞的方法第23页
        2.2.5 PCR 扩增反应第23-24页
        2.2.6 目的基因的重组第24页
        2.2.7 目的基因的转座第24页
        2.2.8 从细菌中提取 bacmid DNA第24-25页
        2.2.9 昆虫细胞的转染第25页
        2.2.10 病毒细胞的扩繁第25页
        2.2.11 病毒滴度的测定第25页
        2.2.12 病毒生长曲线的测定第25-26页
        2.2.13 定量 PCR 分析病毒 DNA 复制第26页
        2.2.14 从细胞中提取 RNA 并 RT-PCR 分析病毒转录第26页
        2.2.15 重组病毒的投射电镜观察第26-27页
        2.2.16 重组病毒的虫体扩繁与纯化第27页
        2.2.17 重组病毒的生物测定第27-28页
        2.2.18 实验载体示意图及技术路线第28-30页
第三章 重组病毒 RjAa17f-HearNPV 的构建及生物学分析第30-41页
    3.1 HtEc-RjAa17f 载体的双酶切鉴定第30页
    3.2 RjAa17f 重组 HaBacHZ8 的鉴定第30-33页
        3.2.1 RjAa17f 重组 HaBacHZ8 的 PCR 鉴定第31-32页
        3.2.2 RjAa17f 重组 HaBacHZ8 的 Hind Ⅲ酶切鉴定第32-33页
    3.3 恢复 HaBacHZ8-RjAa17f 的多角体基因第33-34页
        3.3.1 辅助质粒(pMON7124)转化 E.coli HaBacHZ8-RjAa17f第33-34页
        3.3.2 ph 基因恢复 HaBacHZ8-RjAa17f第34页
    3.4 RjAa17f-HearNPV 病毒粒子的获得第34-36页
    3.5 重组 RjAa17f-HearNPV 的生长曲线第36页
    3.6 重组 RjAa17f-HearNPV 的 DNA 复制曲线第36-38页
    3.7 重组病毒细胞转录水平分析第38-39页
    3.8 重组病毒透射电镜分析第39页
    3.9 重组病毒的生物测定第39-41页
第四章 结论与讨论第41-43页
    4.1 结论第41-42页
    4.2 讨论第42-43页
参考文献第43-48页
附录第48-50页
致谢第50-51页
作者简介第51页

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