| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 插图和附表清单 | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 菌根概述 | 第10页 |
| 1.2 外生菌根(Ecotomycorrhiza,ECM) | 第10-11页 |
| 1.2.1 外生菌根改善植物对养分的吸收 | 第10页 |
| 1.2.2 外生菌根提高植物的抗病性 | 第10-11页 |
| 1.2.3 外生菌根提高植物的抗逆性 | 第11页 |
| 1.3 菌根真菌侵染植物根部的分子机理研究 | 第11-12页 |
| 1.4 异柠檬酸脱氢酶与三羧酸循环 | 第12-13页 |
| 1.5 异柠檬酸脱氢酶的分类及其功能研究 | 第13-14页 |
| 1.5.1 NAD-依赖型异柠檬酸脱氢酶 | 第13页 |
| 1.5.2 NADP-依赖型异柠檬酸脱氢酶 | 第13-14页 |
| 1.6 IDH的酶学性质 | 第14-16页 |
| 1.6.1 IDH的底物特异性 | 第14-15页 |
| 1.6.2 IDH的最适pH和最适pH范围 | 第15-16页 |
| 1.6.3 IDH的最适温度和热稳定性 | 第16页 |
| 1.6.4 金属离子对IDH的影响 | 第16页 |
| 1.7 虎榛子简介 | 第16页 |
| 1.8 土生空团菌简介 | 第16-17页 |
| 1.9 木研究内容、目的与意义 | 第17-18页 |
| 1.10 本研究的技术路线 | 第18-19页 |
| 2 材料 | 第19-20页 |
| 2.1 试验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 供试菌种 | 第19页 |
| 2.1.2 供试植物 | 第19页 |
| 2.2 实验试剂与仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第20页 |
| 3 试验方法 | 第20-29页 |
| 3.1 Cg优良菌株的筛选及虎榛子组培幼苗接种培养 | 第20-23页 |
| 3.1.1 供试培养基 | 第20-21页 |
| 3.1.2 虎榛子幼苗的培养 | 第21-22页 |
| 3.1.3 供试真菌的培养 | 第22页 |
| 3.1.4 虎榛子组培苗接种及培养 | 第22页 |
| 3.1.5 虎榛子组培幼苗各项指标的测定 | 第22页 |
| 3.1.6 虎榛子菌根形态观察 | 第22页 |
| 3.1.7 虎榛子菌根解剖学特性观测 | 第22-23页 |
| 3.2 NADP-IDH的提取、酶活差异分析及酶学性质研究 | 第23-27页 |
| 3.2.1 IDH粗酶液的提取 | 第23页 |
| 3.2.2 粗酶液的纯化 | 第23页 |
| 3.2.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对纯化的蛋白检测 | 第23-24页 |
| 3.2.4 蛋白质浓度的测定 | 第24-25页 |
| 3.2.5 IDH酶活测定 | 第25页 |
| 3.2.6 pH对IDH的影响 | 第25-26页 |
| 3.2.7 温度对IDH活性的影响 | 第26页 |
| 3.2.8 金属离子对IDH活性的影响 | 第26页 |
| 3.2.9 IDH对辅酶NADP+的动力学参数测定 | 第26页 |
| 3.2.10 IDH对底物DL-异柠檬酸三钠的动力学参数测定 | 第26页 |
| 3.2.11 数据分析 | 第26-27页 |
| 3.3 NADP-ICDH基因表达分析 | 第27-29页 |
| 3.3.1 总RNA的抽提 | 第27页 |
| 3.3.2 总RNA的检测 | 第27页 |
| 3.3.3 cDNA一链合成 | 第27-28页 |
| 3.3.4 半定量PCR检测虎榛子NADP-IDH基因引物的选择 | 第28页 |
| 3.3.5 PCR反应成分 | 第28-29页 |
| 4 结果与分析 | 第29-41页 |
| 4.1 接种土生空团菌对虎榛子组培苗生长指标的影响 | 第29-30页 |
| 4.2 虎榛子形成菌根的形态 | 第30-31页 |
| 4.3 NADP-ICDH的提取、酶活差异分析及酶学性质研究 | 第31-40页 |
| 4.3.1 葡聚糖凝胶层析 | 第31-33页 |
| 4.3.2 SDS-PAGE检测 | 第33-34页 |
| 4.3.3 BCA法测定蛋白含量标准曲线的绘制 | 第34页 |
| 4.3.4 比活的计算 | 第34-35页 |
| 4.3.5 NADP-IDH的最适pH | 第35-36页 |
| 4.3.6 NADP-IDH的最适温度 | 第36页 |
| 4.3.7 NADP-IDH的热稳定性 | 第36-38页 |
| 4.3.8 金属离子对NADP-1DH活性的影响 | 第38-39页 |
| 4.3.9 酶动力学性质测定 | 第39-40页 |
| 4.4 NADP-IDH基因表达分析 | 第40-41页 |
| 4.4.1 总RNA的提取 | 第40页 |
| 4.4.2 不同组织间IDH的表达情况PCR扩增结果分析 | 第40-41页 |
| 5 讨论 | 第41-42页 |
| 6 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
