摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第9-14页 |
1.1 研究意义 | 第9页 |
1.2 FLNA研究现状 | 第9-12页 |
1.3 RNA聚合酶Ⅲ基因转录研究现状 | 第12-13页 |
1.4 本项目立项依据和研究目标 | 第13-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-28页 |
2.1 实验材料 | 第14-16页 |
2.1.1 实验仪器及耗材 | 第14-15页 |
2.1.2 实验试剂 | 第15-16页 |
2.1.3 实验所需质粒及细胞 | 第16页 |
2.2 实验方法 | 第16-27页 |
2.2.1 基因克隆 | 第16-22页 |
2.2.2 细胞培养、稳定细胞系筛选及MTT实验 | 第22-24页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR | 第24-26页 |
2.2.4 WesternBlot | 第26-27页 |
2.2.5 双荧光检测报告基因活性 | 第27页 |
2.3 实验数据处理 | 第27-28页 |
第3章 实验结果 | 第28-40页 |
3.1 FLNA敲低增加BRF1和TFⅢC2的表达 | 第28-30页 |
3.2 FLNA过表达抑制BRF1和TFⅢC2的表达 | 第30-31页 |
3.3 SAOS2细胞MRNA-SEQ分析表明,FLNA敲低促进转录因子SP1MRNA水平的表达 | 第31-32页 |
3.4 RT-QPCR和WESTERNBLOT分析表明FLNA敲低确实增加SP1的表达 | 第32-34页 |
3.5 FLNA敲低细胞系,再次敲低SP1的表达后,抑制BRF1、TFⅢC2、及POLⅢ基因的表达 | 第34-36页 |
3.6 FLNA敲低增加BRF1和TFⅢC2启动子活性 | 第36-37页 |
3.7 FLNA-SP1双敲低抑制BRF1和TFⅢC2启动子活性 | 第37-38页 |
3.8 FLNA-SP1双敲低细胞系较FLNA单敲低细胞系细胞增殖能力下降 | 第38-40页 |
第4章 结论与展望 | 第40-42页 |
4.1 结论与讨论 | 第40-41页 |
4.2 展望 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-49页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49-50页 |
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第50页 |