摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第10-16页 |
1.1 研究意义 | 第10页 |
1.2 细丝蛋白研究现状 | 第10-14页 |
1.2.1 FLNB与FLNA的结构相似性 | 第10-11页 |
1.2.2 细丝蛋白突变导致疾病 | 第11页 |
1.2.3 细丝蛋白参与信号转导 | 第11-13页 |
1.2.4 细丝蛋白参与细胞迁移、侵袭 | 第13页 |
1.2.5 细丝蛋白参与基因转录、细胞增殖 | 第13-14页 |
1.3 细丝蛋白B最新研究进展 | 第14页 |
1.4 本课题产生的依据和研究目标 | 第14-16页 |
第2章 实验材料与方法 | 第16-39页 |
2.1 实验材料 | 第16-19页 |
2.1.1 实验耗材 | 第16页 |
2.1.2 实验试剂 | 第16-18页 |
2.1.3 实验所需的质粒和细胞 | 第18页 |
2.1.4 细菌或细胞培养基 | 第18页 |
2.1.5 实验仪器 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-38页 |
2.2.1 基因克隆 | 第19-29页 |
2.2.2 细胞瞬时转染 | 第29-30页 |
2.2.3 细胞稳定转染及稳定细胞株筛选 | 第30-32页 |
2.2.4 QautitativeReal-TimePCR(qPCR) | 第32-33页 |
2.2.5 Westernblot | 第33-35页 |
2.2.6 细胞增殖实验 | 第35-36页 |
2.2.7 细胞划痕实验 | 第36-37页 |
2.2.8 Transwell细胞迁移、侵袭实验 | 第37-38页 |
2.3 数据处理分析 | 第38-39页 |
第3章 实验结果 | 第39-60页 |
3.1 FLNBshRNA瞬时表达显著降低一部分PolⅠ和PolⅢ转录产物的表达 | 第39-41页 |
3.2 转染FLNBsiRNA显著降低293T细胞一部分PolⅠ和PolⅢ转录产物的表达 | 第41-42页 |
3.3 FLNB敲低稳定细胞系的建立 | 第42-43页 |
3.4 FLNB敲低稳定细胞系中PolⅠ和PolⅢ基因转录产物分析 | 第43-44页 |
3.5 FLNB瞬时过表达显著增加一部分PolⅠ和PolⅢ基因的表达 | 第44-46页 |
3.6 FLNB过表达稳定细胞系的建立 | 第46页 |
3.7 FLNB过表达稳定细胞系中PolI和PolIII基因表达分析 | 第46-47页 |
3.8 FLNB/FLNA双敲低稳定细胞系的建立 | 第47-49页 |
3.9 双敲低稳定细胞系PolI和PolIII基因表达分析 | 第49-50页 |
3.10 FLNB敲低抑制细胞增殖 | 第50-52页 |
3.11 FLNB过表达促进细胞增殖 | 第52-53页 |
3.12 FLNB敲低抑制细胞迁移 | 第53-56页 |
3.13 FLNB过表达促进细胞迁移 | 第56-58页 |
3.14 FLNB促进肿瘤细胞侵袭 | 第58-60页 |
第4章 结论与展望 | 第60-62页 |
4.1 结论与讨论 | 第60-61页 |
4.2 展望 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第70-71页 |
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第71页 |