| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 常用英文缩写词汇 | 第8-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-23页 |
| 第一章 引言 | 第12-23页 |
| 1 疱疹病毒 | 第12-14页 |
| 1.1 疱疹病毒粒子的结构 | 第12页 |
| 1.2 疱疹病毒组装 | 第12-14页 |
| 2 皮层蛋白 | 第14-17页 |
| 2.1 皮层蛋白和与核衣壳蛋白相互作用 | 第14页 |
| 2.2 皮层蛋白之间的相互作用 | 第14-15页 |
| 2.3 皮层蛋白与和囊膜蛋白的相互作用 | 第15-17页 |
| 3 主要皮层蛋白及其功能 | 第17-18页 |
| 3.1 UL48 | 第17页 |
| 3.2 UL49 | 第17页 |
| 3.3 UL46和UL47 | 第17页 |
| 3.4 其他 | 第17-18页 |
| 4 鸭瘟病毒 | 第18-19页 |
| 4.1 鸭瘟病毒在感染鸭体内的分布和形态学发生 | 第18页 |
| 4.2 鸭瘟病毒在感染宿主细胞内分布和形态学发生 | 第18-19页 |
| 4.3 基因组的结构 | 第19页 |
| 4.4 疤疹病毒基因的保守性 | 第19页 |
| 5 疱疹病毒UL14基因的结构及其编码蛋白的特点 | 第19-22页 |
| 5.1 UL14基因的结构 | 第19-20页 |
| 5.2 UL14蛋白特点及功能 | 第20-22页 |
| 6 本论文选题目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二部分试验部分 | 第23-111页 |
| 第二章 鸭瘟病毒UL14基因的生物信息学分析 | 第23-44页 |
| 1 材料 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-26页 |
| 2.1 密码子偏爱性分析 | 第23-24页 |
| 2.2 氨基酸序列分析 | 第24-26页 |
| 3 结果 | 第26-40页 |
| 3.1 密码子偏爱性分析 | 第26-31页 |
| 3.2 UL14的氨基酸序列分析 | 第31-40页 |
| 4 讨论 | 第40-44页 |
| 第三章 鸭瘟病毒UL14基因克隆、原核表达及其多抗制备 | 第44-59页 |
| 1 材料 | 第44-45页 |
| 1.1 毒株菌株试验动物 | 第44页 |
| 1.2 仪器 | 第44-45页 |
| 2 试验方法 | 第45-50页 |
| 2.1 UL14基因的克隆 | 第45-47页 |
| 2.2 UL14蛋白的表达纯化 | 第47-49页 |
| 2.3 UL14蛋白多克隆抗体的制备 | 第49-50页 |
| 3 试验结果 | 第50-57页 |
| 3.1 目的片段的克隆 | 第50-52页 |
| 3.2 目的基因的原核表达 | 第52-56页 |
| 3.3 多抗制备 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 UL14基因转录表达时相及基因类型确定和亚细胞定位 | 第59-72页 |
| 1 材料 | 第59-60页 |
| 1.1 毒株/鸭胚 | 第59页 |
| 1.2 主要试剂 | 第59页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第59-60页 |
| 2 试验方法 | 第60-65页 |
| 2.1 荧光定量PCR法检测鸭瘟病毒体外感染宿主细胞UL14基因的转录时相分析 | 第60-62页 |
| 2.2 鸭瘟病毒体外感染宿主细胞UL14基因的表达时相分析 | 第62-63页 |
| 2.3 UL14在体外培养细胞的亚细胞定位 | 第63-64页 |
| 2.4 药物抑制试验 | 第64-65页 |
| 3 试验结果 | 第65-70页 |
| 3.1 RNA完整检测及引物的特异性检测 | 第65页 |
| 3.2 溶解曲线分析 | 第65-66页 |
| 3.3 相对定量 | 第66-67页 |
| 3.4 UL14蛋白表达分析 | 第67页 |
| 3.5 UL14蛋白在宿主细胞内表达分析 | 第67-68页 |
| 3.6 UL14在鸭瘟病毒复制过程中的亚细胞定位 | 第68-69页 |
| 3.7 药物抑制试验 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 第五章 DPV-UL14核定位信号的发现及其和VP16相互作用 | 第72-92页 |
| 1 试验材料 | 第72-74页 |
| 1.1 质粒、菌株、毒株 | 第72-74页 |
| 1.2 主要试剂 | 第74页 |
| 2 试验方法 | 第74-80页 |
| 2.1 UL14功能结构域核定位信号的分析 | 第74-78页 |
| 2.2 UL14和VP16相互作用 | 第78-80页 |
| 3 试验结果 | 第80-90页 |
| 3.1 UL14功能结构域核定位信号的分析 | 第80-83页 |
| 3.2 UL14蛋白转运VP16入细胞核 | 第83-88页 |
| 3.3 缺失突变体和VP16的共定位 | 第88-89页 |
| 3.4 PULL4氨基酸序列和HSP70氨基酸序列的比对 | 第89-90页 |
| 4 讨论 | 第90-92页 |
| 第六章 鸭瘟病毒UL14缺失对病毒复制和结构成熟抑制作用 | 第92-111页 |
| 1 试验材料 | 第92-95页 |
| 1.1 毒株和细胞 | 第92页 |
| 1.2 质粒 | 第92-93页 |
| 1.3 引物 | 第93-94页 |
| 1.4 试剂 | 第94页 |
| 1.5 仪器 | 第94-95页 |
| 2 试验方法 | 第95-99页 |
| 2.1 UL14缺失株的构建 | 第95-96页 |
| 2.2 UL14回复株的构建 | 第96-97页 |
| 2.3 UL14缺失和回复病毒株的拯救 | 第97-98页 |
| 2.4 UL14缺失和回复病毒株的鉴定 | 第98页 |
| 2.5 空斑试验 | 第98页 |
| 2.6 重组病毒生长曲线 | 第98-99页 |
| 2.7 病毒粒子超微结构观察 | 第99页 |
| 3 试验结果 | 第99-108页 |
| 3.1 缺失和回复同源片段的扩增 | 第99-100页 |
| 3.2 RED重组卡那霉素阳性克隆子的鉴定 | 第100-101页 |
| 3.3 酶切图谱鉴定 | 第101页 |
| 3.4 病毒拯救 | 第101-102页 |
| 3.5 缺失和回复病毒株WESTERN-BLOT鉴定 | 第102-103页 |
| 3.6 间接免疫荧光试验(ⅡF)鉴定UL14基因缺失和回复病毒 | 第103-104页 |
| 3.7 空斑试验 | 第104-105页 |
| 3.8 病毒增殖曲线 | 第105-106页 |
| 3.9 病毒超微结构观察 | 第106-108页 |
| 4 讨论 | 第108-111页 |
| 全文总结 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-134页 |
| 致谢 | 第134页 |
