| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩写词表 | 第11-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-33页 |
| 1 肠道共生菌与机体免疫 | 第17-19页 |
| 1.1 机体免疫影响肠道共生菌菌群 | 第17-18页 |
| 1.2 肠道共生菌影响机体免疫 | 第18-19页 |
| 2 铁调素与铁代谢 | 第19-26页 |
| 2.1 机体铁代谢 | 第19-21页 |
| 2.2 铁调素及其表达和调控 | 第21-24页 |
| 2.3 铁调素与疾病 | 第24-26页 |
| 3 炎性小体 | 第26-32页 |
| 3.1 炎性小体的结构 | 第27页 |
| 3.2 炎性小体激活的分子机制 | 第27页 |
| 3.3 典型炎性小体 | 第27-31页 |
| 3.4 非典型炎性小体 | 第31-32页 |
| 4 肠道共生菌与铁调素及炎性小体 | 第32-33页 |
| 4.1 肠道共生菌与铁调素 | 第32页 |
| 4.2 肠道共生菌与炎性小体 | 第32-33页 |
| 第二章 立题依据、研究目的及研究内容 | 第33-35页 |
| 1 立题依据 | 第33页 |
| 2 研究目的 | 第33页 |
| 3 研究内容与技术路线 | 第33-35页 |
| 3.1 研究内容 | 第33-34页 |
| 3.2 技术路线 | 第34-35页 |
| 第三章 B.infantis和B.fragilis影响铁调素表达的机制 | 第35-68页 |
| 1 引言 | 第35页 |
| 2 材料与仪器 | 第35-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第35页 |
| 2.2 试验仪器 | 第35-36页 |
| 2.3 主要试剂的配制 | 第36-38页 |
| 3 试验方法 | 第38-50页 |
| 3.1 B.infantis和B.fragilis的培养及制备 | 第38页 |
| 3.2 人单核细胞系(THP-1)细胞分化及接种B.infantis和B.fragilis | 第38-39页 |
| 3.3 人原代肝细胞培养及刺激 | 第39-40页 |
| 3.4 HuH7细胞的培养及处理 | 第40-42页 |
| 3.5 小鼠试验 | 第42页 |
| 3.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第42-45页 |
| 3.7 ELISA | 第45-47页 |
| 3.8 Western Blot | 第47-50页 |
| 3.9 血清铁含量检测 | 第50页 |
| 3.10 数据分析与处理 | 第50页 |
| 4 结果 | 第50-63页 |
| 4.1 细菌直接或间接刺激对HuH7细胞铁调素表达的影响 | 第50-52页 |
| 4.2 IL-1β对HuH7细胞铁调素表达的影响 | 第52-53页 |
| 4.3 接种B.infantis的THP-1巨噬细胞上清液中IL-1β对HuH7细胞BMP信号通路的影响 | 第53-55页 |
| 4.4 IL-1β对HuH7细胞铁调素表达及BMP信号通路的影响 | 第55页 |
| 4.5 IL-1β和IL-6对HuH7细胞BMP表达的影响 | 第55-57页 |
| 4.6 IL-1β对人原代肝细胞铁调素和BMP2表达的影响 | 第57-59页 |
| 4.7 IL-1β对小鼠铁稳态的影响 | 第59-61页 |
| 4.8 IL-1β对小鼠肝脏Activin B和BMP2表达的影响 | 第61-63页 |
| 5 讨论 | 第63-67页 |
| 6 小结 | 第67-68页 |
| 第四章 B.infantis和B.fragilis引起巨噬细胞分泌IL-1β的机制 | 第68-109页 |
| 1 引言 | 第68页 |
| 2 试验材料与试剂 | 第68-72页 |
| 2.1 试验材料 | 第68页 |
| 2.2 试验仪器 | 第68-70页 |
| 2.3 主要试剂的配制 | 第70-72页 |
| 3 试验方法 | 第72-85页 |
| 3.1 细菌培养及细菌悬液制备 | 第72页 |
| 3.2 L929细胞培养及L929细胞条件培养基(LCCM)的制备 | 第72页 |
| 3.3 THP-1细胞培养及分化 | 第72-73页 |
| 3.4 小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDM)的分离和培养 | 第73-74页 |
| 3.5 小鼠永生化骨髓来源巨噬细胞(IBMDM)的培养 | 第74页 |
| 3.6 人外周血PBMC来源的巨噬细胞(MDM)分离及培养 | 第74-75页 |
| 3.7 细菌接种及多种抑制剂和ATP的使用 | 第75-77页 |
| 3.8 ELISA检测IL-1β含量 | 第77页 |
| 3.9 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第77-81页 |
| 3.10 Western Blot | 第81-84页 |
| 3.11 细胞毒性检测 | 第84页 |
| 3.12 巨噬细胞吞噬及黏附能力检测 | 第84-85页 |
| 3.13 数据分析及处理 | 第85页 |
| 4 结果 | 第85-103页 |
| 4.1 B.infantis和B.fragilis引起小鼠BMDM分泌IL-1β | 第85-87页 |
| 4.2 ATP促使接种B.infantis和B.fragilis的小鼠BMDM分泌IL-1β | 第87-88页 |
| 4.3 B.infantis和B.fragilis引起IL-1β分泌与细菌活性及细胞吞噬无关 | 第88页 |
| 4.4 B.infantis和B.fragilis引起IBMDM分泌IL-1β依赖NLRP3炎性小体 | 第88-90页 |
| 4.5 B.infantis和B.fragilis引起IBMDM分泌IL-1β依赖钾离子外流 | 第90-91页 |
| 4.6 接种B.infantis和B.fragilis的THP-1分泌IL-1β与caspase-1相关 | 第91-95页 |
| 4.7 B.infantis和B.fragilis引起THP-1巨噬细胞分泌IL-1β依赖于钾离子外流,与细菌活性、THP-1巨噬细胞的吞噬作用及ATP无关 | 第95-96页 |
| 4.8 B.infantis引起人MDM分泌IL-1β | 第96-97页 |
| 4.9 热灭活B.infantis和B.fragilis引起BMDM和THP-1细胞分泌IL-1β | 第97-99页 |
| 4.10 B.infantis和B.fragilis与巨噬细胞接触是IL-1β生成的必要条件 | 第99-103页 |
| 5 讨论 | 第103-108页 |
| 6 小结 | 第108-109页 |
| 第五章 结论与创新 | 第109-111页 |
| 1 结论 | 第109页 |
| 2 创新 | 第109页 |
| 3 展望 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第129页 |
