| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 结直肠癌研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 结直肠癌化学预防研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3 Nrf2/ARE信号通路研究进展 | 第12-14页 |
| 1.4 木犀草素研究进展 | 第14-16页 |
| 第2章 木犀草素能够激活Caco-2细胞中Nrf2/ARE信号通路 | 第16-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第16-17页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-23页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第17-18页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第18页 |
| 2.2.3 荧光素酶活性检测 | 第18-19页 |
| 2.2.4 细胞活力测定(MTT法) | 第19页 |
| 2.2.5 总RNA提取 | 第19-20页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR | 第20-21页 |
| 2.2.7 Western blot实验 | 第21-22页 |
| 2.2.8 胞质蛋白和核蛋白提取 | 第22页 |
| 2.2.9 细胞免疫荧光实验 | 第22-23页 |
| 2.2.10 数据分析 | 第23页 |
| 2.3 实验结果 | 第23-27页 |
| 2.3.1 木犀草素增强Caco-2细胞中ARE-pGL3荧光素酶的表达 | 第23-24页 |
| 2.3.2 木犀草素对Caco-2细胞细胞活力的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.3 木犀草素增强Caco-2细胞中GR、TR、HO-1、NQO1和γGCS mRNA的表达 | 第25页 |
| 2.3.4 木犀草素增强Caco-2细胞中Nrf2、TR和γGCS蛋白的表达 | 第25-26页 |
| 2.3.5 木犀草素增强Caco-2细胞中Nrf2的蛋白表达和入核 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-28页 |
| 第3章 木犀草素能够减轻H_2O_2对Caco-2细胞造成的氧化损伤 | 第28-33页 |
| 3.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第28页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-30页 |
| 3.2.1 细胞活力测定(MTT法) | 第28-29页 |
| 3.2.2 ROS检测 | 第29页 |
| 3.2.3 细胞凋亡检测 | 第29-30页 |
| 3.2.4 数据分析 | 第30页 |
| 3.3 实验结果 | 第30-32页 |
| 3.3.1 木犀草素能够减弱H_2O_2处理Caco-2细胞导致的细胞活力下降 | 第30-31页 |
| 3.3.2 木犀草素能够减少H_2O_2对Caco-2细胞诱导的ROS升高 | 第31页 |
| 3.3.3 木犀草素能够减少H_2O_2对Caco-2细胞诱导的细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 3.4 讨论 | 第32-33页 |
| 第4章 木犀草素在Caco-2细胞中通过p38 MAPK激活Nrf2/ARE信号通路 | 第33-41页 |
| 4.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第33页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第33-34页 |
| 4.2 实验方法 | 第34-37页 |
| 4.2.1 Western blot实验 | 第34-35页 |
| 4.2.2 胞质蛋白和核蛋白提取 | 第35页 |
| 4.2.3 细胞活力测定(MTT法) | 第35-36页 |
| 4.2.4 ROS检测 | 第36页 |
| 4.2.5 细胞凋亡检测 | 第36页 |
| 4.2.6 数据分析 | 第36-37页 |
| 4.3 实验结果 | 第37-40页 |
| 4.3.1 抑制p38 MAPK能够下调木犀草素诱导的Nrf2表达 | 第37页 |
| 4.3.2 抑制p38 MAPK能够下调木犀草素诱导的Nrf2入核 | 第37-38页 |
| 4.3.3 抑制p38 MAPK能够减弱木犀草素诱导的Caco-2细胞活力上调 | 第38页 |
| 4.3.4 抑制p38 MAPK能够减少木犀草素诱导的ROS下调 | 第38-39页 |
| 4.3.5 抑制p38 MAPK能够减少木犀草素诱导的Caco-2细胞凋亡下调 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-41页 |
| 第5章 木犀草素对小鼠结直肠癌的化学预防作用研究 | 第41-48页 |
| 5.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 5.1.1 实验动物 | 第41页 |
| 5.1.2 实验材料 | 第41页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第41页 |
| 5.1.4 实验仪器 | 第41-42页 |
| 5.2 实验方法 | 第42-45页 |
| 5.2.1 结直肠癌动物模型建立及给药 | 第42页 |
| 5.2.2 结肠H&E染色 | 第42-43页 |
| 5.2.3 结肠蛋白提取 | 第43页 |
| 5.2.4 Western blot实验 | 第43-44页 |
| 5.2.5 结肠RNA提取 | 第44页 |
| 5.2.6 荧光实时定量PCR | 第44-45页 |
| 5.2.7 数据分析 | 第45页 |
| 5.3 实验结果 | 第45-47页 |
| 5.3.1 木犀草素能够减少结直肠癌的发生和改善改善结直肠癌的病情 | 第45-46页 |
| 5.3.2 木犀草素增加结肠组织中Nrf2、TR、γ-GCS和HO-1的蛋白表达 | 第46-47页 |
| 5.3.3 木犀草素能够增加结肠组织中相关代谢酶和炎症因子的mRNA表达 | 第47页 |
| 5.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第6章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录 | 第54-57页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
