| 英文縮略对照表 | 第8-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-33页 |
| 1.1 真核基因转录和P-TEFb活性调控机制 | 第13-18页 |
| 1.1.1 真核基因转录循环 | 第13-14页 |
| 1.1.2 RNA聚合酶Ⅱ活性调控 | 第14-18页 |
| 1.2 P-TEFb复合体简介 | 第18-22页 |
| 1.2.1 P-TEFb的发现、结构及其功能 | 第18-19页 |
| 1.2.2 P-TEFb活性调控的信号通路和分子机制 | 第19-22页 |
| 1.3 P-TEFb与其募集蛋白 | 第22-25页 |
| 1.3.1 P-TEFb与BRD4 | 第22-23页 |
| 1.3.2 BRD4和BET家族蛋白 | 第23-25页 |
| 1.3.3 细胞对BRD4募集P-TEFb的调控 | 第25页 |
| 1.4 超级延伸复合物 | 第25-29页 |
| 1.4.1 人类和果蝇的超级延伸复合物的组成成分 | 第25-26页 |
| 1.4.2 超级延伸复合物与人类疾病 | 第26-28页 |
| 1.4.3 SECs参与RNApolⅡ介导的通用延伸 | 第28-29页 |
| 1.5 Nuclear speckles | 第29-31页 |
| 1.5.1 Nuclear speckles的发现 | 第29-30页 |
| 1.5.2 Nuclear speckles的组成、结构和动态变化 | 第30-31页 |
| 1.5.3 Nuclear speckles和RNA PolⅡ、PTEFb的关系 | 第31页 |
| 1.6 本课题研究的目标、内容和意义 | 第31-33页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第33-53页 |
| 2.1 实验药品、试剂与仪器 | 第33-37页 |
| 2.1.1 细胞株、菌株和质粒资源 | 第33-34页 |
| 2.1.2 主要试剂和材料 | 第34-35页 |
| 2.1.3 主要实验仪器和耗材 | 第35-37页 |
| 2.2 常用溶液配方 | 第37-41页 |
| 2.2.1 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化相关溶液 | 第37页 |
| 2.2.2 质粒DNA制备相关溶液 | 第37-38页 |
| 2.2.3 质粒DNA亚克隆相关溶液 | 第38页 |
| 2.2.4 细胞培养、转染及感染相关溶液 | 第38-39页 |
| 2.2.5 生化实验相关溶液 | 第39-40页 |
| 2.2.6 Western blot相关溶液 | 第40-41页 |
| 2.2.7 免疫荧光相关溶液配方 | 第41页 |
| 2.3 实验方法 | 第41-53页 |
| 2.3.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第41-42页 |
| 2.3.2 质粒转化 | 第42页 |
| 2.3.3 质粒DNA小量提取 | 第42-43页 |
| 2.3.4 质粒中量提取 | 第43页 |
| 2.3.5 DNA限制性内切酶酶切 | 第43-44页 |
| 2.3.6 DNA样品琼脂糖凝胶电泳 | 第44页 |
| 2.3.7 琼脂糖胶回收DNA片段(QIAGEN试剂盒) | 第44-45页 |
| 2.3.8 DNA连接 | 第45页 |
| 2.3.9 普通PCR反应 | 第45-46页 |
| 2.3.10 PCR反应(改进型QuikChange方案) | 第46-47页 |
| 2.3.11 特异性shRNA的构建 | 第47-48页 |
| 2.3.12 细胞培养 | 第48页 |
| 2.3.13 细胞瞬时转染 | 第48页 |
| 2.3.14 病毒包装感染 | 第48-49页 |
| 2.3.15 细胞的药物处理 | 第49页 |
| 2.3.16 细胞裂解液 | 第49页 |
| 2.3.17 核分级分离(Nuclear fractionation) | 第49-50页 |
| 2.3.18 免疫共沉淀 | 第50-51页 |
| 2.3.19 SDS-PAGE蛋白电泳 | 第51页 |
| 2.3.20 免疫荧光实验(Immunofluoresence) | 第51页 |
| 2.3.21 免疫印记实验(Western blot) | 第51-53页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第53-71页 |
| 3.1 在应激条件下,两种复合物(BRD4/P-TEFb复合物和ELL2/AFF4/P-TEFb复合物)组分在speckles中的共定位情况 | 第53-57页 |
| 3.2 BRD4的澳结构域对BRD4定位于speckles无影响 | 第57-58页 |
| 3.3 CDK9是BRD4定位于speckles的关键因子 | 第58-60页 |
| 3.4 探讨CyclinT1定位于speckles中的机制 | 第60-62页 |
| 3.5 ELL2将CyclinT1募集到speckles中 | 第62-64页 |
| 3.6 CDK9定位于speckles的机制探索 | 第64-66页 |
| 3.7 AFF4定位于speckles机制的探讨 | 第66-68页 |
| 3.8 讨论和展望 | 第68-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
