| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 斑马鱼简介 | 第11-12页 |
| 1.2 斑马鱼心脏发育过程 | 第12-14页 |
| 1.3 转录因子调控脊椎动物心脏的早期发育 | 第14-16页 |
| 1.3.1 NK-2同源异性因子 | 第14页 |
| 1.3.2 锌指蛋白GATA转录因子 | 第14-15页 |
| 1.3.3 其它因子对心脏早期发育的调控 | 第15-16页 |
| 1.4 TMP基因家族 | 第16-17页 |
| 1.5 TMPA4简介 | 第17-18页 |
| 1.6 泛素化 | 第18页 |
| 1.7 蛋白糖基化 | 第18-19页 |
| 1.8 蛋白的SUMO化 | 第19-20页 |
| 1.9 本文的研究意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 材料、试剂与设备 | 第21-23页 |
| 2.1.1 酶类和试剂盒 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第21-22页 |
| 2.1.3 其他试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.1.5 生物信息学分析的主要软件与数据库 | 第22-23页 |
| 2.2 用到的生物学实验方法 | 第23-33页 |
| 2.2.1 组织样品总RNA的提取步骤 | 第23-24页 |
| 2.2.2 RNA甲醛变性胶电泳 | 第24页 |
| 2.2.3 PCR反应 | 第24-25页 |
| 2.2.4 PCR产物的纯化回收 | 第25页 |
| 2.2.5 感受态细胞的制备 | 第25页 |
| 2.2.6 转化(热休克法) | 第25-26页 |
| 2.2.7 质粒的小量制备 | 第26-27页 |
| 2.2.8 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第27页 |
| 2.2.9 测序 | 第27页 |
| 2.2.10 蛋白的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.11 核质膜蛋白的提取 | 第28-29页 |
| 2.2.12 酵母双杂交(Two Hybrid System) | 第29页 |
| 2.2.13 免疫共沉淀(CO-IP) | 第29-30页 |
| 2.2.14 SDS-PAGE | 第30-31页 |
| 2.2.15 Western blot | 第31-33页 |
| 第三章 结果与分析 | 第33-38页 |
| 3.1 TMP3基因在成体斑马鱼各组织中的表达检测 | 第33页 |
| 3.2 TMP3基因的亚细胞表达定位的分析 | 第33-36页 |
| 3.2.1 TMP3和TMPA4相互作用的亚细胞定位分析 | 第33-34页 |
| 3.2.2 TMP3在H9C2中的亚细胞表达 | 第34页 |
| 3.2.3 TMP3在成体斑马鱼心脏细胞中的亚细胞定位表达分析 | 第34-36页 |
| 3.3 TMP3蛋白的糖基化检测 | 第36页 |
| 3.4 TMP3敲除斑马鱼在蛋白水平上的检测 | 第36-38页 |
| 第四章 其它工作 | 第38-43页 |
| 4.1 FOXP4抑制NKX2.5的表达 | 第38页 |
| 4.2 FBXL5和FOXP4泛素化相关性的检测 | 第38-39页 |
| 4.3 多克隆抗体的制备 | 第39-43页 |
| 4.3.1 基因克隆及载体构建 | 第39页 |
| 4.3.2 融合蛋白Nfatc3的诱导表达 | 第39-40页 |
| 4.3.3 Nfatc3融合蛋白表达纯化 | 第40页 |
| 4.3.4 Nfatc3多克隆抗体的制备 | 第40页 |
| 4.3.5 Nfatc3多克隆抗体的检测 | 第40页 |
| 4.3.6 结果 | 第40-43页 |
| 第五章 结语与讨论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 附录1 | 第48-49页 |
| 附录2 | 第49-50页 |
| 后记 | 第50-51页 |
