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水稻细菌性条斑病菌双组份调控系统colRS基因的功能研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 前言第13-31页
    1.1 植物病原微生物致病机理研究第13-16页
        1.1.1 致病机理第13-14页
        1.1.2 致病因子第14-16页
            1.1.2.1 脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)第14页
            1.1.2.2 胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS)第14-15页
            1.1.2.3 胞外酶(extracellular enzyme)第15页
            1.1.2.4 Ⅲ型效应物(type Ⅲ effector)第15-16页
    1.2 双组份调控系统的研究进展第16-21页
        1.2.1 双组份调控系统第16-21页
            1.2.1.1 双组份调控系统简介第16-17页
            1.2.1.2 双组份调控系统在原核生物和真核生物中的分布和不同第17-18页
            1.2.1.3 双组份调控系统中的HK和RR的组成和化学性质第18-19页
            1.2.1.4 双组份调控系统中典型的调控类型第19-21页
    1.3 水稻细菌性条斑病第21-24页
        1.3.1 水稻细菌性条斑病第21-22页
        1.3.2 水稻细菌性条斑病菌第22-24页
    1.4 黄单胞菌属中的双组份调控系统研究进展第24-27页
    1.5 ColRS双组份调控系统研究进展第27-29页
    1.6 Xoc中双组份调控系统的研究进展第29页
    1.7 本研究的内容、目的与意义第29-31页
        1.7.1 研究内容第29-30页
        1.7.2 研究目的和意义第30-31页
第二章 材料与方法第31-51页
    2.1 材料第31-38页
        2.1.1 质粒与菌株第31-33页
        2.1.2 研究涉及的抗生素第33-34页
        2.1.3 研究涉及的培养基第34-35页
        2.1.4 引物第35-36页
        2.1.5 研究常用缓存液、试剂第36-37页
        2.1.6 植株材料第37-38页
    2.2 分子生物学操作技术第38-44页
        2.2.1 PCR扩增第38-39页
        2.2.2 DNA纯化与回收第39-40页
        2.2.3 Xoc总DNA的提取第40页
        2.2.4 质粒DNA的提取(碱裂解法)第40-41页
        2.2.5 DNA酶切和连接第41-42页
        2.2.6 DNA转化第42-43页
            2.2.6.1 感受态的制备第42-43页
            2.2.6.2 化学转化和电脉冲转化第43页
        2.2.7 DNA凝胶电泳第43-44页
    2.3 微生物学操作技术第44-49页
        2.3.1 细菌的活化、培养与保存第44-45页
        2.3.2 生理生化表型检测第45-47页
            2.3.2.1 胞外多糖(EPS)的检测第45-46页
            2.3.2.2 胞外蛋白酶检测第46页
            2.3.2.3 游动性检测第46页
            2.3.2.4 生物膜形成能力检测第46页
            2.3.2.5 生长曲线检测第46页
            2.3.2.6 菌株抗逆性检测第46-47页
        2.3.3 三亲本结合实验第47-48页
        2.3.4 缺失突变体的构建第48页
        2.3.5 反式互补菌株的构建第48-49页
    2.4 植株实验第49-51页
        2.4.1 菌株致病力检测第49页
        2.4.2 过敏性反应检测第49页
        2.4.3 叶表附生能力检测第49-51页
第三章 结果与分析第51-82页
    3.1 生物信息学分析Xoc colRS基因第51-58页
        3.1.1 Xoc GX01基因组中colRS基因的预测第51-52页
        3.1.2 Xoc GX01基因组中colRS基因的排列第52-53页
        3.1.3 Xoc GX01基因组中预测的ColRS结构域分析第53-54页
        3.1.4 colRS基因部分病原细菌中的分布与相似性分析第54-56页
        3.1.5 colRS基因的进化分析第56-58页
    3.2 Xoc GX01中colRS基因的功能研究第58-71页
        3.2.1 缺失突变体的构建第58-59页
        3.2.2 重组质粒的构建第59-62页
            3.2.2.1 两侧翼片段的扩增第59-60页
            3.2.2.2 重组质粒与验证第60-61页
            3.2.2.3 突变体构建、筛选和验证第61-62页
        3.2.3 突变体生理生化表型检测第62-71页
            3.2.3.1 突变体胞外多糖检测第62-64页
            3.2.3.2 突变体胞外蛋白酶检测第64-66页
            3.2.3.3 突变体游动性检测第66-67页
            3.2.3.4 突变体生物膜形成能力检测第67-68页
            3.2.3.5 突变体致病能力检测第68-70页
            3.2.3.6 突变体抗逆性检测第70-71页
    3.3 XOC3259/XOC3260的功能研究第71-82页
        3.3.1 互补菌株的构建第71-72页
        3.3.2 互补重组质粒的构建第72-76页
            3.3.2.1 互补基因片段的扩增第72-73页
            3.3.2.2 重组质粒与验证第73-75页
            3.3.2.3 互补菌株的构建、筛选和验证第75-76页
        3.3.3 突变体互补菌株生理生化表型检测第76-82页
            3.3.3.1 生长曲线检测第76页
            3.3.3.2 生物膜检测第76-78页
            3.3.3.3 抗逆性检测第78-79页
            3.3.3.4 叶表附生能力检测第79-80页
            3.3.3.5 致病力检测第80-82页
第四章 讨论第82-87页
    4.1 Xoc GX01中colRS基因生物信息学分析结果第82页
    4.2 Xoc GX01中主效colRS基因第82-83页
    4.3 colRS基因之间信号交叉传递的初步探索第83页
    4.4 colRS基因影响Xoc GX01中后期生长第83-84页
    4.5 colRS基因影响Xoc GX01的抗逆性第84-85页
    4.6 colRS基因影响Xoc GX01生物膜的形成和吸附能力第85页
    4.7 colRS基因影响Xoc GX01对寄主植株的叶表附生和致病能力第85-86页
    4.8 后续工作第86-87页
参考文献第87-97页
致谢第97-98页
攻读学位期间发表论文情况第98页

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