摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第13-31页 |
1.1 植物病原微生物致病机理研究 | 第13-16页 |
1.1.1 致病机理 | 第13-14页 |
1.1.2 致病因子 | 第14-16页 |
1.1.2.1 脂多糖(lipopolysaccharides,LPS) | 第14页 |
1.1.2.2 胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS) | 第14-15页 |
1.1.2.3 胞外酶(extracellular enzyme) | 第15页 |
1.1.2.4 Ⅲ型效应物(type Ⅲ effector) | 第15-16页 |
1.2 双组份调控系统的研究进展 | 第16-21页 |
1.2.1 双组份调控系统 | 第16-21页 |
1.2.1.1 双组份调控系统简介 | 第16-17页 |
1.2.1.2 双组份调控系统在原核生物和真核生物中的分布和不同 | 第17-18页 |
1.2.1.3 双组份调控系统中的HK和RR的组成和化学性质 | 第18-19页 |
1.2.1.4 双组份调控系统中典型的调控类型 | 第19-21页 |
1.3 水稻细菌性条斑病 | 第21-24页 |
1.3.1 水稻细菌性条斑病 | 第21-22页 |
1.3.2 水稻细菌性条斑病菌 | 第22-24页 |
1.4 黄单胞菌属中的双组份调控系统研究进展 | 第24-27页 |
1.5 ColRS双组份调控系统研究进展 | 第27-29页 |
1.6 Xoc中双组份调控系统的研究进展 | 第29页 |
1.7 本研究的内容、目的与意义 | 第29-31页 |
1.7.1 研究内容 | 第29-30页 |
1.7.2 研究目的和意义 | 第30-31页 |
第二章 材料与方法 | 第31-51页 |
2.1 材料 | 第31-38页 |
2.1.1 质粒与菌株 | 第31-33页 |
2.1.2 研究涉及的抗生素 | 第33-34页 |
2.1.3 研究涉及的培养基 | 第34-35页 |
2.1.4 引物 | 第35-36页 |
2.1.5 研究常用缓存液、试剂 | 第36-37页 |
2.1.6 植株材料 | 第37-38页 |
2.2 分子生物学操作技术 | 第38-44页 |
2.2.1 PCR扩增 | 第38-39页 |
2.2.2 DNA纯化与回收 | 第39-40页 |
2.2.3 Xoc总DNA的提取 | 第40页 |
2.2.4 质粒DNA的提取(碱裂解法) | 第40-41页 |
2.2.5 DNA酶切和连接 | 第41-42页 |
2.2.6 DNA转化 | 第42-43页 |
2.2.6.1 感受态的制备 | 第42-43页 |
2.2.6.2 化学转化和电脉冲转化 | 第43页 |
2.2.7 DNA凝胶电泳 | 第43-44页 |
2.3 微生物学操作技术 | 第44-49页 |
2.3.1 细菌的活化、培养与保存 | 第44-45页 |
2.3.2 生理生化表型检测 | 第45-47页 |
2.3.2.1 胞外多糖(EPS)的检测 | 第45-46页 |
2.3.2.2 胞外蛋白酶检测 | 第46页 |
2.3.2.3 游动性检测 | 第46页 |
2.3.2.4 生物膜形成能力检测 | 第46页 |
2.3.2.5 生长曲线检测 | 第46页 |
2.3.2.6 菌株抗逆性检测 | 第46-47页 |
2.3.3 三亲本结合实验 | 第47-48页 |
2.3.4 缺失突变体的构建 | 第48页 |
2.3.5 反式互补菌株的构建 | 第48-49页 |
2.4 植株实验 | 第49-51页 |
2.4.1 菌株致病力检测 | 第49页 |
2.4.2 过敏性反应检测 | 第49页 |
2.4.3 叶表附生能力检测 | 第49-51页 |
第三章 结果与分析 | 第51-82页 |
3.1 生物信息学分析Xoc colRS基因 | 第51-58页 |
3.1.1 Xoc GX01基因组中colRS基因的预测 | 第51-52页 |
3.1.2 Xoc GX01基因组中colRS基因的排列 | 第52-53页 |
3.1.3 Xoc GX01基因组中预测的ColRS结构域分析 | 第53-54页 |
3.1.4 colRS基因部分病原细菌中的分布与相似性分析 | 第54-56页 |
3.1.5 colRS基因的进化分析 | 第56-58页 |
3.2 Xoc GX01中colRS基因的功能研究 | 第58-71页 |
3.2.1 缺失突变体的构建 | 第58-59页 |
3.2.2 重组质粒的构建 | 第59-62页 |
3.2.2.1 两侧翼片段的扩增 | 第59-60页 |
3.2.2.2 重组质粒与验证 | 第60-61页 |
3.2.2.3 突变体构建、筛选和验证 | 第61-62页 |
3.2.3 突变体生理生化表型检测 | 第62-71页 |
3.2.3.1 突变体胞外多糖检测 | 第62-64页 |
3.2.3.2 突变体胞外蛋白酶检测 | 第64-66页 |
3.2.3.3 突变体游动性检测 | 第66-67页 |
3.2.3.4 突变体生物膜形成能力检测 | 第67-68页 |
3.2.3.5 突变体致病能力检测 | 第68-70页 |
3.2.3.6 突变体抗逆性检测 | 第70-71页 |
3.3 XOC3259/XOC3260的功能研究 | 第71-82页 |
3.3.1 互补菌株的构建 | 第71-72页 |
3.3.2 互补重组质粒的构建 | 第72-76页 |
3.3.2.1 互补基因片段的扩增 | 第72-73页 |
3.3.2.2 重组质粒与验证 | 第73-75页 |
3.3.2.3 互补菌株的构建、筛选和验证 | 第75-76页 |
3.3.3 突变体互补菌株生理生化表型检测 | 第76-82页 |
3.3.3.1 生长曲线检测 | 第76页 |
3.3.3.2 生物膜检测 | 第76-78页 |
3.3.3.3 抗逆性检测 | 第78-79页 |
3.3.3.4 叶表附生能力检测 | 第79-80页 |
3.3.3.5 致病力检测 | 第80-82页 |
第四章 讨论 | 第82-87页 |
4.1 Xoc GX01中colRS基因生物信息学分析结果 | 第82页 |
4.2 Xoc GX01中主效colRS基因 | 第82-83页 |
4.3 colRS基因之间信号交叉传递的初步探索 | 第83页 |
4.4 colRS基因影响Xoc GX01中后期生长 | 第83-84页 |
4.5 colRS基因影响Xoc GX01的抗逆性 | 第84-85页 |
4.6 colRS基因影响Xoc GX01生物膜的形成和吸附能力 | 第85页 |
4.7 colRS基因影响Xoc GX01对寄主植株的叶表附生和致病能力 | 第85-86页 |
4.8 后续工作 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第98页 |