| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第15-24页 |
| 1.1 禽腺病毒的分类 | 第16页 |
| 1.2 禽腺病毒的形态结构与理化特征 | 第16-17页 |
| 1.3 基因组结构 | 第17-18页 |
| 1.4 主要蛋白及其功能 | 第18-19页 |
| 1.5 禽腺病毒的流行病学特点研究 | 第19页 |
| 1.6 禽腺病毒的致病性 | 第19-20页 |
| 1.7 主要临床症状与病理学变化 | 第20-21页 |
| 1.8 禽腺病毒检测方法 | 第21-22页 |
| 1.8.1 血清学诊断 | 第21页 |
| 1.8.2 病毒分离鉴定 | 第21-22页 |
| 1.8.3 分子生物学技术 | 第22页 |
| 1.9 研究目的与意义 | 第22-24页 |
| 2 材料和方法 | 第24-37页 |
| 2.1 材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 病料及毒株来源 | 第24页 |
| 2.1.2 SPF鸡胚及试验动物 | 第24页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-37页 |
| 2.2.1 Ⅰ群血清4型禽腺病毒的分离鉴定 | 第25-29页 |
| 2.2.1.1 病料中病毒基因组的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.1.2 病料中FAdV-4的PCR检测 | 第26-27页 |
| 2.2.1.3 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| 2.2.1.4 PCR产物的回收 | 第27页 |
| 2.2.1.5 目的片段的连接转化 | 第27-28页 |
| 2.2.1.6 挑菌 | 第28页 |
| 2.2.1.7 菌液PCR鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.1.8 基因测序 | 第29页 |
| 2.2.1.9 测序结果的处理与病毒序列比对及遗传演化分析 | 第29页 |
| 2.2.2 一株FAdV-4的病毒分离鉴定与全基因组测序 | 第29-31页 |
| 2.2.2.1 腺病毒的分离 | 第29页 |
| 2.2.2.2 病毒基因组的提取和PCR扩增 | 第29页 |
| 2.2.2.3 SDTA1512株禽腺病毒全基因组克隆及序列分析 | 第29-31页 |
| 2.2.3 SDTA1512株禽腺病毒的致病性研究 | 第31-32页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR方法的建立 | 第32-35页 |
| 2.2.4.1 引物设计 | 第32页 |
| 2.2.4.2 标准品质粒的制备 | 第32页 |
| 2.2.4.3 标准品质粒的提取 | 第32-33页 |
| 2.2.4.4 标准品浓度计算 | 第33页 |
| 2.2.4.5 荧光定量PCR检测方法的建立 | 第33页 |
| 2.2.4.6 荧光定量PCR最佳反应条件的优化 | 第33-34页 |
| 2.2.4.7 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第34页 |
| 2.2.4.8 荧光定量PCR的特异性试验 | 第34页 |
| 2.2.4.9 荧光定量PCR的敏感性试验 | 第34页 |
| 2.2.4.10 重复性和稳定性试验 | 第34-35页 |
| 2.2.5 FAdV-4SDTA1512株体外传代及不同代次病毒基因序列变异分析 | 第35-37页 |
| 2.2.5.1 鸡胚肾细胞(CEK)的制备 | 第35页 |
| 2.2.5.2 FAdV-4SDTA1512株在CEK上的增殖规律的研究 | 第35页 |
| 2.2.5.3 病毒基因的PCR鉴定 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-52页 |
| 3.1 病毒的分离鉴定 | 第37-39页 |
| 3.1.1 病料中FAdV-4的PCR检测 | 第37页 |
| 3.1.2 病料中FAdV-4部分Hexon基因的序列分析 | 第37-39页 |
| 3.2 一株FAdV-4的病毒分离鉴定与全基因组测序 | 第39-42页 |
| 3.2.1 FAdV-4SDTA1512株的分离与鉴定 | 第39页 |
| 3.2.2 禽腺病毒的全基因序列扩增 | 第39-40页 |
| 3.2.3 SDTA1512株病毒基因组序列分析 | 第40-42页 |
| 3.2.3.1 SDTA1512全基因组、Hexon、Fiber1和Fiber2基因同源性分析 | 第40-41页 |
| 3.2.3.2 ORF19基因序列分析 | 第41-42页 |
| 3.3 SDTA1512株对SPF鸡的致病性研究 | 第42-43页 |
| 3.4 荧光定量PCR方法的结果 | 第43-47页 |
| 3.4.1 FAdV-4 Hexon基因片段PCR扩增 | 第43页 |
| 3.4.2 重组质粒的鉴定 | 第43页 |
| 3.4.3 标准品的制备及拷贝数测定 | 第43页 |
| 3.4.4 荧光定量PCR最佳反应条件的优化 | 第43页 |
| 3.4.5 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第43-45页 |
| 3.4.6 荧光定量PCR检测方法的特异性试验 | 第45页 |
| 3.4.7 荧光定量PCR检测方法的敏感性 | 第45-46页 |
| 3.4.8 重复性和稳定性试验 | 第46-47页 |
| 3.5 SDTA1512体外细胞增殖的研究 | 第47-52页 |
| 3.5.1 SDTA1512增殖对CEK细胞的影响 | 第47-49页 |
| 3.5.2 SDTA1512在CEK上的增殖动态规律 | 第49-50页 |
| 3.5.3 不同代次基因序列变异分析 | 第50-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
